云南地区大叶千斤拔不同种质的异黄酮含量比较

目的:建立大叶千斤拔中异黄酮含量测定方法,对比云南不同地区大叶千斤拔的药材质量,初步明确影响异黄酮含量的因素。方法:以染料木素为对照品,对紫外分光光度法测定大叶千斤拔中异黄酮的含量进行方法学考察,并用此方法测定采自云南不同地区野生及栽培的26份大叶千斤拔中异黄酮的含量。结果:采集野生样品中异黄酮的平均含量为0.990‰,其中屏边县的种质含量最高,为1.553‰,而绿春县(B)的种质含量最低,为0.652‰。分别栽培在3个地点的同一份大叶千斤拔种质,异黄酮含量有明显差异;在同一栽培条件下不同来源的大叶千斤拔种质异黄酮含量也有明显差异。结论:种质和环境因子对大叶千斤拔有效成分的积累均有影响。

蔓性千斤拔与大叶千斤拔的鉴别研究

目的:对蔓性千斤拔及大叶千斤拔进行鉴别研究,建立其全面、准确的鉴别方法。方法:采用薄层色谱法和高效液相色谱法对两种千斤拔干燥根中的染料木苷进行定性定量分析,通过DNA分子鉴定技术建立其DNA条形码。结果:在TLC的基础上,运用HPLC建立了检测千斤拔药材中染料木苷含量的方法;建立了基于ITS2序列的蔓性千斤拔与大叶千斤拔的DNA条形码,从分子水平上将二者区分。结论:运用不同的鉴定方法可对蔓性千斤拔及大叶千斤拔进行准确、全面、快速的鉴定,避免了因为方法的局限性影响鉴别的准确性,为千斤拔药材的鉴别提供新的科学依据。

大叶千斤拔与蔓性千斤拔的高效液相色谱指纹图谱鉴别研究

目的鉴别大叶千斤拔、蔓性千斤拔。方法采用HPLC法,Krosmasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-水梯度洗脱,检测波长为274 nm,流速为1 ml/min,柱温为30℃。结果在选定色谱条件下,建立了稳定可控的高效液相色谱图;应用主成分分析法、系统聚类分析法将药材分成两类,并计算相似度。结论应用高效液相色谱法鉴别大叶千斤拔、蔓性千斤拔是可行的。

不同种不同药用部位不同产地千斤拔中总黄酮的含量测定

目的用紫外分光光度法对不同入药部位、不同产地5种千斤拔中总黄酮的含量进行测定,评价其非传统入药部位及不同种、不同产地的药材质量,以期寻找新药用资源和新的药用部位。方法紫外-可见分光光度法于510nm波长处测定总黄酮的量。结果芦丁在9.17～64.19μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率99.63%,RSD为1.36%(n=9)。不同种千斤拔中,与蔓性千斤拔、大叶千斤拔(《中国药典》收载)比较,球穗千斤拔、宽叶千斤拔根中总黄酮的含量较低,腺毛千斤拔根中总黄酮的含量接近;各个种叶中总黄酮的含量普遍较高,茎中量较低。不同产地千斤拔根中:大叶千斤拔以购于四川成都(云南产)含量最高,蔓性千斤拔采于湖北宜昌夷陵区最高,球穗千斤拔含量均较低。结论该方法简便、快速、准确,可用于千斤拔药材质量控制。不同产地中千斤拔总黄酮含量差异较大,说明产地的海拔高度、气候、土壤等条件、生长年限、贮藏年限等对千斤拔总黄酮含量有明显影响。从有效成分总黄酮、资源的综合及可持续利用角度考虑,千斤拔各种的叶可以与其根同等入药,其茎的含量也可以考虑使用;腺毛千斤拔可以与药典收载种同等入药。

共有及变异峰率双指标序列法分析两种不同来源千斤拔红外指纹图谱

目的通过共有及变异峰率双指标序列法分析两种不同来源的千斤拔红外指纹图谱.方法以石油醚、氯仿、乙酸乙酯、水四种溶剂依次提取千斤拔药材不同极性部位成分及其药材测定其红外指纹图谱,研究各个样品之间的异同.结果采用该方法可区别出不同来源千斤拔药材.结论该方法便于两个及以上样品之间的比较,应用范围广,为不同来源的千斤拔药材鉴别及质量评价提供了简便的方法.

共有峰率和变异峰率双指标序列法鉴别千斤拔

目的以共有峰率和变异峰率双指标序列法分析不同种千斤拔指纹图谱。方法采用石油醚、氯仿、95%乙醇、水等四种溶剂分别提取千斤拔药材不同极性部位成分,测定其紫外、红外指纹图谱,研究各个样品之间的异同。结果该方法可以区别出不同种千斤拔药材。结论该方法便于两个及以上样品之间的比较,应用范围广,为千斤拔药材质量评价提供了简便的方法。

基于低共熔溶剂提取千斤拔多糖

目的采用一种新型绿色溶剂低共熔溶剂(deep eutectic solvents, DESs)提取千斤拔多糖,并对其提取工艺及提取效率进行考察。方法采用响应面法,优化千斤拔多糖提取工艺,并以水提醇沉法评价DESs提取效率。结果由氯化胆碱和1,3-丁二醇合成的低共熔溶剂最适合于千斤拔多糖的提取。经响应面法优化后,在提取温度70℃、水比例11%、提取时间41 min、液固比11 mL/g下,千斤拔多糖提取率可达2.47%,显著高于水提醇沉后所得多糖(P<0.05)。结论低共熔溶剂作为提取介质具有高效和绿色的优点,可用于千斤拔多糖的提取,同时本结果为DESs提取中药活性成分提供新思路。

反向高效液相色谱法同时测定千斤拔不同种、不同药用部位中醋酸乙酯部位化学成分的含量

【目的】同时测定千斤拔的不同种、不同药用部位中醋酸乙酯部位化学成分的含量,以期评价不同种药材的质量,为寻找新药源和新的药用部位提供一定的实验数据。【方法】采用反向高效液相色谱法(RP-HPLC)进行测定。应用Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.5%磷酸水(23∶77,10 min;43∶57,11~55 min),流速为1 mL/min,柱温30℃,检测波长为240 nm。【结果】千斤拔燃料木素在2.01504~10.0752μg内呈良好的线性关系,回收率为99.75%,相对标准偏差(RSD)为0.92%;5,7,2’,4’-四羟基异黄酮在2.01042~10.0521μg内呈良好的线性关系,回收率为101.24%,RSD为1.13%;3,5,7,3’,5’-五羟基-4’-甲氧基黄烷在2.01246~10.0623μg内呈良好的线性关系,回收率为102.35%,RSD为1.48%。蔓性千斤拔根、茎中燃料木素和5,7,2’,4’-四羟基异黄酮含量最高,宽叶千斤拔的叶中富含3,5,7,3’,5’-五羟基-4’-甲氧基黄烷,球穗千斤拔仅根、茎含有较少的燃料木素。蔓性千斤拔茎、叶中有效成分的含量远高于其他千斤拔茎、叶的含量。【结论】检测该方法简便、快速、准确。从有效化学成分角度考虑,建议球穗千斤拔不宜替代药典品种蔓性千斤拔、大叶千斤拔入药;从有效化学成分资源的综合及可持续利用角度考虑,建议蔓性千斤拔的茎、叶可以与其根同等入药。

大叶千斤拔的质量标准研究

目的建立妇科千金片/胶囊君药大叶千斤拔药材的质量标准。方法采用显微观察大叶千斤拔细胞学特征;采用薄层色谱法(TLC)对大叶千斤拔中染料木苷进行定性鉴别;采用《中国药典》四部通则0832、2302、2341、2321、2351(第二法)、2201及高效液相色谱方法测定大叶千斤拔水分、总灰分、有机氯农药残留量、重金属及有害物质残留量、黄曲霉毒素、浸出物和染料木苷含量。结果大叶千斤拔的性状和细胞学特征明显,染料木苷斑点清晰,药材水分为8.02%~9.72%,总灰分为1.67%~4.68%,染料木苷含量为0.03%~0.08%,浸出物为8.76%~16.33%,黄曲霉毒素含量为0~3.79μg·kg^(-1),重金属及有害物质Pb含量为0.24~0.94 mg·kg^(-1)、Cd含量为0.023~0.060 mg·kg^(-1)、Hg含量为0.0024~0.0052 mg·kg^(-1)、Cu含量为3.37~6.40 mg·kg^(-1)、As含量为0.10~0.14 mg·kg^(-1),没有检测到有机氯农药残留。结论本研究从性状、显微、鉴别等方面对中药材大叶千斤拔进行质量控制,为该药材标准化的建设提供基础。

大叶千斤拔挥发性成分的气相色谱-质谱分析

用水蒸汽蒸馏法提取大叶千斤拔根挥发油,用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)进行分析测定。结果表明,共分辨出72个色谱峰,鉴定出53种成分,占挥发油总含量的94.16%。主要组分为烯类和醇类,如长叶烯、β-雪松烯和α-杉木烯等,以及α-桉叶醇、布藜醇和法尼醇等。该结果可用于千斤拔的进一步开发和质量控制。

西双版纳重要傣药大叶千斤拔总黄酮富集工艺研究

以大叶千斤拔总黄酮含量为指标,考察大孔树脂、聚酰胺树脂、硅胶柱层析及溶剂萃取法对大叶千斤拔中总黄酮的富集效果。结果表明,乙酸乙酯萃取法和硅胶柱层析法联用能有效富集大叶千斤拔中的总黄酮。最佳纯化工艺为:大叶千斤拔提取液浓缩至无醇味,用2倍体积的乙酸乙酯萃取5次,所得萃取液浓缩蒸干后,用甲醇溶解至0.1 g/m L,拌样,上200-300目硅胶柱,上样量为1∶50,径高比为1∶15,用氯仿-甲醇(18∶1,v/v)的洗脱液洗脱,根据薄层结果,合并黄酮部分,浓缩蒸干后即得大叶千斤拔的黄酮提取物,纯度为54%。

大叶千斤拔药材等级评价研究

目的为大叶千斤拔药材等级评价的修订提供科学依据。方法收集不同产地大叶千斤拔样品30批,对其直径、杂质、水分、总灰、浸出物、染料木苷含量进行测定;参照2020年版《中华人民共和国药典》第四部通则2201及采用高效液相色谱法分别测定浸出物、染料木苷含量;运用Excel和SPSS统计软件对数据进行相关性分析、聚类分析,结合生产和市场实际运用,为制订大叶千斤拔药材商品等级评价提供依据;建立大叶千斤拔抑菌生物评价方法,并通过聚类分析和PCA分析进行不同产地药材生物活性情况分析。结果通过相关性分析、聚类分析,筛选出直径、浸出物、染料木苷含量3个指标,并结合生产实际划分选货和统货。生物活性评价表明不同产区大叶千斤拔的抑菌效果存在差异。结论所建立的大叶千斤拔药材商品等级划分综合考虑了外观性状和成分含量,该评价方法适合于大叶千斤拔药材的等级判断,为后期基于功能性成分的含量和生物活性评价制订更加全面合理的大叶千斤拔药材商品等级标准提供依据。

大叶千斤拔活性成分分布及积累动态

目的考察染料木苷、染料木素及大豆苷元在大叶千斤拔植株不同部位分布与积累的动态变化规律。方法利用高效液相色谱法,采用C_（18）反相色谱柱,柱温为35℃,以甲醇-0.1%磷酸水溶液（48∶52,V/V）为流动相,检测波长为250 nm,测定和比较不同采收期大叶千斤拔根、茎、叶中染料木苷、染料木素和大豆苷元的含量以及不同生长年限的大叶千斤拔根中三种成分的含量。结果染料木苷、染料木素和大豆苷元主要分布于大叶千斤拔根中,且在10月份积累量最高,2月份积累量最低;6.5~7.5年生大叶千斤拔根中这三种成分的含量最高,但从种植成本考虑,3.5年采收比较合适。结论根据大叶千斤拔中活性成分的分布与积累规律,发现大叶千斤拔的最佳采收期为10月份,最佳采收年限为三年半,最佳药用部位为根。

法定千斤拔的本草考证及现代研究

法定千斤拔药材品种较多,别名众多,产地范围广,给千斤拔的临床应用带来安全隐患。本文通过本草考证及现代研究,结合植物形态、药材性状、药性药效、产地分布等对千斤拔进行品种考证,为千斤拔的进一步研究和开发利用提供参考。

HPLC-ELSD测定多种千斤拔中的β-谷甾醇

目的采用HPLC法测定腺毛千斤拔、宽叶千斤拔的根茎及大叶千斤拔、蔓性千斤拔不同产地的根中β-谷甾醇的含量。方法色谱柱为Kromasil C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇,流速1.0mL·min-1,柱温25℃。结果β-谷甾醇0.65～3.25μg与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为99.40%,RSD=0.87%(n=9)。腺毛千斤拔、宽叶千斤拔的根和茎中β-谷甾醇含量均较高;湖北宜昌的蔓性千斤拔及成都华西植物园的大叶千斤拔的根中β-谷甾醇含量最高,其他产地含量较低;大叶千斤拔根中β-谷甾醇的含量较蔓性千斤拔高。结论所用方法简便、快速、准确,可控制千斤拔药材的质量。

大叶千斤拔根、茎的HPLC指纹图谱及成分差异研究

目的:为了研究大叶千斤拔根、茎的化学成分差异,首先建立大叶千斤拔根的HPLC指纹图谱,对根、茎的成分差异进行定性分析;其次,针对二者共有成分染料木苷、6″-O-丙二酰染料木苷、染料木素建立含量测定方法,进行定量评价。方法:采用Agilent Zorbax SB-phenyl(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.5%乙酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长260 nm;采用中药指纹图谱相似度评价系统(2.0版)进行相似度评价;对3个成分的含量测定结果,采用SPSS(16.0)软件t检验分析,确定区分根、茎的指标成分。结果:11批根的图谱相似度为0.919~0.984,7批茎的图谱相似度为0.638~0.848;染料木苷、6″-O-丙二酰染料木苷、染料木素3个成分的含量在根中分别为0.64~1.30、0.62~1.21、0.13~0.47 mg·g^-1,在茎中分别为0.07~0.31、0.14~1.00、0.10~0.28 mg·g^-1。结论:大叶千斤拔根、茎的化学成分存在一定差异,染料木苷、6″-O-丙二酰染料木苷、染料木素3个成分总量可用于大叶千斤拔根的质量控制,染料木苷含量或染料木苷与染料木素的含量比值可作为区分根、茎的指标。

广西产3种千斤拔的生药学鉴别

目的对半灌木、蔓性、大叶3种千斤拔进行生药学鉴别。方法采用基原鉴别法、性状鉴别法、显微鉴别法。结果广西产3种千斤拔在原植物特征、药材性状、显微结构和粉末特征等方面,均有差异。结论以上特征明显、稳定,可作为广西产3种千斤拔的鉴别依据。