抗人纤维蛋白单克隆抗体SZ－63可变区基因的克隆及其基因工程抗体的研究

应用氯化铯－超离心法从抗人纤维蛋白单克隆抗体ＳＺ一６３杂交瘤细胞抽取总ＲＮＡ，经Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）纤维素柱层析分离出ｍＲＮＡ。采用ＲＴ－ＰＣＲ技术，扩增出了ＳＺ－６３重链和轻链可变区基因。应用基因重组技术将ＳＺ－６３可变区基因片段与人免疫球蛋白γ１重链ＣＨ１和轻链恒区基因进行拼接，构建噬菌体ＳＺ－６３／ＨｕＦａｂ表达载体，并在大肠杆菌中表达。表达的嵌合抗体Ｆａｂ片段为可溶性，ＥＬＩＳＡ及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测证实能特异地与人纤维蛋白呈结合反应，表达量约为２１０μｇ／Ｌ。