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A MONOCLONAL ANTIBODY RECOGNIZING NON DERIVATIVE 13 HYDROXY GIBBERELLINS AND THEIR GLUCOSIDES * 被引量:14
1
作者 郑志富 周燮 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1995年第10期761-769,共9页
The production and characterization of a monoclonal antibody (MAb AB10) against GA 3 glucoside as well as GA 3 is described. MAb AB10 was derived from an immunogen in which human serum albumin (HSA) was linked to G... The production and characterization of a monoclonal antibody (MAb AB10) against GA 3 glucoside as well as GA 3 is described. MAb AB10 was derived from an immunogen in which human serum albumin (HSA) was linked to GA 3 at carbon 3. This antibody showed high affinity for GA 3 glucoside as well as for 13 hydroxy gibberellins (GA 1, GA 3, GA 5, etc). The affinity of MAb AB10 for 13 hydroxy GAs was significantly reduced by methylation of the 7 oic acid but not by glycosylation of 3 hydroxyl group. Based on this antibody, both of competitive enzyme linked immunosorbent assays (ELISAs) for GA 3 glucoside and for GA 3 were developed. These two ELISAs displayed linear detection ranges from 0 2 pmol to 20 pmol. Using these assays, the fluctuation of GA 3 like and GA 3 glucoside like substances in the leaves of Rumex japonicus was investigated. The results indicated that the glycosylation of free GAs was connected with leaf senescence and that the function of 6 benzyl amino purine in retarding the leaf senescence was probably related to delaying the process of glycosylation of free GAs. 展开更多
关键词 monoclonal antibody enzyme linked immunosorbent assay GAs Glycosylation Senescence Rumex japonicus
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Study on the Production of Pentachloronitrobenzene Monoclonal Antibody and Its ELISA Kit for Rapid Detection
2
作者 Yuhua MA Kuo ZHANG +5 位作者 Jianxiong ZHANG Fangfang JIA Fangyang HE Yanan CUI Mingyang LI Yuping WAN 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2021年第5期17-20,44,共5页
[Objectives]This study was conducted to develop an enzyme-linked immunoassay kit that can detect the residual amount of pentachloronitrobenzene in Penaeus vannamei.[Methods]This study was conducted to develop an enzym... [Objectives]This study was conducted to develop an enzyme-linked immunoassay kit that can detect the residual amount of pentachloronitrobenzene in Penaeus vannamei.[Methods]This study was conducted to develop an enzyme-linked immunoassay kit that can detect the residual amount of pentachloronitrobenzene in P.vannamei.[Results]The standard curve range of the kit was 0-8.1μg/L;the detection limit for P.vannamei was 0.912μg/kg;the recovery was 80.6%-103.5%;and the relative standard deviation range within batches was 5.3%-10.1%,and the relative standard deviation range between batches was 6.7%-8.1%.The specificity of the pentachloronitrobenzene monoclonal antibody was relatively good,and the cross-reaction rates with pentachlorophenol,hexachlorobenzene,tetrachlorophthalide,and chlorothalonil were low,all of which did not exceed 30%.The ELISA kit could be stored at 4℃for 12 months,showing good stability.[Conclusions]The detection kit has low cost,short time and small deviation,and is an ideal preliminary screening method. 展开更多
关键词 PENTACHLORONITROBENZENE monoclonal antibody enzyme linked immunosorbent assay kit
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Preparation of Monoclonal Antibodies to Trimethoprim and ELISA Kit for Rapid Detection 被引量:1
3
作者 韩深 吴小胜 +3 位作者 贾芳芳 罗晓琴 万宇平 何方洋 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2016年第10期2267-2270,2372,共5页
[Objective] This study was conducted to find out an approach for determining trimethoprim residues in water. [Method] Trimethoprim antigen was prepared through a series of reactions from trimethoprim hapten which was ... [Objective] This study was conducted to find out an approach for determining trimethoprim residues in water. [Method] Trimethoprim antigen was prepared through a series of reactions from trimethoprim hapten which was generated through the reaction between trimethoprim and maleic anhydride. And trimethoprim monoclonal antibodies were prepared by animal immune, and used to prepare ELISA kit to detect trimethoprim residues in water. Finally, the limit of detection (LED) of the ELISA kit was determined. [Result] The standard curve covered a concentration range of 0-80 μg/L. The LeD of trimethoprim in water using the ELISA kit was 2.34 μg/kg; the IC50 (half maximal inhibitory concentration) was 4.8 μg/L; the recovery rate of added trimethoprim standard ranged from 60.5% to 79.7%; within-and among-batches RSD was less than 10%. The trimethoprim monoclonal antibody was specific, as the cross-reactivity rate of trimethoprim antibody and diaveridine was less than 1%. The stability tests revealed that the ELISA kit was stable after being stored at 4 ℃ for 12 months. [Conclusion] The results will provide references for controlling the abuse of trimethoprim. 展开更多
关键词 TRIMETHOPRIM monoclonal antibodies enzyme linked immunosorbent assay kit
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精子肽的固相合成及应用初探 被引量:6
4
作者 白玲 张志刚 +1 位作者 王润华 蔡豪斌 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第8期96-98,共3页
目的 :探讨将多肽固相合成技术用于检测抗精子抗体的ELISA试剂盒制备。方法 :以多肽固相合成法合成特异性精子肽 ,并经高效液相纯化分析及质谱分析。以此合成精子肽包板制备检测抗精子抗体的ELISA试剂盒 ,检测血清标本的AsAb。结果 :HPL... 目的 :探讨将多肽固相合成技术用于检测抗精子抗体的ELISA试剂盒制备。方法 :以多肽固相合成法合成特异性精子肽 ,并经高效液相纯化分析及质谱分析。以此合成精子肽包板制备检测抗精子抗体的ELISA试剂盒 ,检测血清标本的AsAb。结果 :HPLC结果显示 ,合成的精子肽纯度达 98 2 6%;质谱分析结果主峰分子质量与理论值一致。采用合成多肽抗原建立了检测抗精子抗体的酶联免疫吸附测定方法 ;不明原因不育患者组与对照组间AsAb发生率呈非常显著差异(P <0 0 0 5 )。结论 :本固相合成法可获得高纯度特异性精子肽 ;该精子肽包板的ELISA试剂盒可靠简便。 展开更多
关键词 多肽 固相合成 抗精子抗体 酶联免疫吸附测定 免疫学
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以精子抗原肽为抗原的抗精子抗体ELISA检测方法的建立 被引量:4
5
作者 谢琦 白玲 +3 位作者 佘尚扬 叶元 夏红卫 刘永明 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期310-312,共3页
目的建立组合多个精子抗原肽为抗原的检测抗精子抗体的酶联免疫吸附测定(ELISA)法。方法用PS3全自动多肽合成仪合成4个特异精子肽,并经反相高效液相色谱(RP-HPLC)纯化和质谱鉴定。用ELISA检测4个合成肽的抗原性,基于对这些合成肽抗原活... 目的建立组合多个精子抗原肽为抗原的检测抗精子抗体的酶联免疫吸附测定(ELISA)法。方法用PS3全自动多肽合成仪合成4个特异精子肽,并经反相高效液相色谱(RP-HPLC)纯化和质谱鉴定。用ELISA检测4个合成肽的抗原性,基于对这些合成肽抗原活性的评价,将4个精子抗原肽混合后(组合肽)作为抗精子抗体(AsAb)检测用抗原。结果合成了实验所需要的抗原性肽段,RP-HPLC结果显示纯度达95%以上。以组合肽为抗原建立的检测AsAb的间接ELISA方法,与商品化试剂盒相比符合率为95.6%。结论固相多肽合成技术可用于合成高纯度的精子抗原肽,以组合的精子抗原肽作为包被抗原建立的ELISA方法可提高AsAb检测的灵敏度。 展开更多
关键词 固相多肽合成 精子抗原肽 抗精子抗体 酶联免疫吸附试验
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精子抗原肽的合成及其在酶联免疫吸附法检测抗精子抗体中的应用价值 被引量:2
6
作者 白玲 谢琦 +2 位作者 佘尚扬 夏红卫 刘永明 《中国计划生育学杂志》 2012年第8期544-547,共4页
目的:以合成精子抗原肽为抗原建立酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测抗精子抗体(AsAb)。方法:通过PS3全自动合成仪合成精子肽P10G、YLPl2和SP17抗原肽,经反相高效液相色谱(HPLC)纯化和质谱鉴定,分别包板制备ELISA试剂盒,并检测血清标本。结... 目的:以合成精子抗原肽为抗原建立酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测抗精子抗体(AsAb)。方法:通过PS3全自动合成仪合成精子肽P10G、YLPl2和SP17抗原肽,经反相高效液相色谱(HPLC)纯化和质谱鉴定,分别包板制备ELISA试剂盒,并检测血清标本。结果:成功合成3种目的肽,质谱分析结果主峰分子量与理论值基本一致,HPLC结果显示其纯度为97.5%、97.78%和95.5%。以3种合成肽为抗原建立ELISA检测AsAb,与商品化试剂盒比较,均显示极好的一致性(Kappa值>0.75)。结论:全自动固相多肽合成技术可用于高纯度的精子抗原肽合成,所合成的P10G、YLPl2和SP17抗原肽均具有较好的抗原活性,可作为ELISA的包被抗原用于AsAb检测。 展开更多
关键词 精子抗原肽 抗精子抗体 固相多肽合成 酶联免疫吸附测定法
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混合单克隆抗体在固相ELISA双夹心法中的应用研究 被引量:2
7
作者 杜国光 邱裕民 +3 位作者 李倩 刘新军 杨非易 葛韵琴 《生物化学杂志》 CSCD 1989年第6期555-559,共5页
在进行固相ELISA双夹心法时,要选择两种配对的单克隆抗体(McAb)殊非易事。本文用不同McAb的混合物与另一种McAb进行配对夹心,获得了较好的效果。实验表明,在心肌肌球蛋白轻链(CM—LC)的固相ELISA双夹心体系中,以抗CM-LCMcAb(1G6)铺底,(... 在进行固相ELISA双夹心法时,要选择两种配对的单克隆抗体(McAb)殊非易事。本文用不同McAb的混合物与另一种McAb进行配对夹心,获得了较好的效果。实验表明,在心肌肌球蛋白轻链(CM—LC)的固相ELISA双夹心体系中,以抗CM-LCMcAb(1G6)铺底,(2B4及2F6)混合物为后续复盖抗体,最低检出量可低达10ng/mL,其检出率较单独2B4或单独2F6作为后续复盖抗体者高5—10倍。而若反之,以(2B4及2F6)混合物铺底,1G6作为后续复盖抗体,则其最低检出量竟高至200ng/mL,还不如以其中之一铺底为佳。在人绒毛膜促性腺激素(HCG)的检测体系中,用多克隆抗体与单克隆抗体配对的研究中,也获得了类似的实验结果。 展开更多
关键词 单克隆抗体 固相ELISA
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精子抗原肽P10G和YLP12的合成及在ELISA检测中的意义 被引量:1
8
作者 白玲 谢琦 +2 位作者 佘尚扬 夏红卫 刘永明 《现代医药卫生》 2012年第11期1601-1602,1605,共3页
目的人工合成精子肽P10G和YLP12,以此为抗原建立检测抗精子抗体(AsAb)的酶联免疫吸附测定法(ELISA)。方法用PS3全自动合成仪合成精子肽P10G和YLP12,经反相高效液相色谱纯化和质谱鉴定。分别包板制备ELISA试剂盒,用以检测血清中的AsAb。... 目的人工合成精子肽P10G和YLP12,以此为抗原建立检测抗精子抗体(AsAb)的酶联免疫吸附测定法(ELISA)。方法用PS3全自动合成仪合成精子肽P10G和YLP12,经反相高效液相色谱纯化和质谱鉴定。分别包板制备ELISA试剂盒,用以检测血清中的AsAb。结果成功合成两种目的肽,质谱结果显示其相对分子质量均与理论相对分子质量相吻合,高效液谱法(HPLC)结果显示其纯度为97.5%和97.8%。以该两种合成肽为抗原,建立AsAb的ELISA,与商品化试剂盒比较均显示极好的一致性(Kappa值为0.77和0.79,>0.75)。结论全自动固相多肽合成技术可用于合成高纯度的精子抗原肽,所合成的P10G和YLPl2均具有较好的抗原活性,可作为包被抗原用于AsAb的ELISA检测。 展开更多
关键词 精子 肽类 抗体 酶联免疫吸附测定 固相多肽合成 精子抗原肽
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精子肽的固相合成及其在免疫性不孕诊断中的应用研究 被引量:4
9
作者 郭海艳 周文达 《现代检验医学杂志》 CAS 2008年第2期66-68,共3页
目的合成特异性精子肽,并对其抗原性进行初步评价,从而探讨检测抗精子抗体的ELISA试剂盒制备。方法应用固相多肽合成技术,以Fmoc基团保护的氨基酸为原料,合成特异性精子肽。以高效液相色谱(HPLC)技术鉴定纯化,并用ELISA检测其抗原性。... 目的合成特异性精子肽,并对其抗原性进行初步评价,从而探讨检测抗精子抗体的ELISA试剂盒制备。方法应用固相多肽合成技术,以Fmoc基团保护的氨基酸为原料,合成特异性精子肽。以高效液相色谱(HPLC)技术鉴定纯化,并用ELISA检测其抗原性。结果成功合成了所需肽段,HPLC结果显示纯度达95%以上。该合成肽包被的ELISA试剂盒检测抗精子抗体的结果,与商品化试剂盒相比较符合率达90.6%。结论固相多肽合成技术可用于合成高纯度特异性的精子肽,且所合成肽段具有良好的抗原活性,包板建立的ELISA方法可以用于免疫性不孕中抗精子抗体的检测。 展开更多
关键词 固相多肽合成 免疫性不孕 抗精子抗体 酶联免疫吸附试验
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柯萨奇病毒A6型空心和实心病毒抗原检测系统的建立和应用
10
作者 戈小琴 张克 +4 位作者 武瑞霞 安燕秋 李雅静 李文麒 胡雅灵 《中国疫苗和免疫》 CSCD 北大核心 2022年第5期554-558,共5页
目的建立和应用柯萨奇病毒A6型(Coxsackievirus A6,CV-A6)空心和实心病毒抗原检测系统。方法利用蔗糖密度梯度分离CV-A6空心和实心病毒颗粒,采用CV-A6病毒纯化液免疫Balb/c小鼠,筛选出特异性强的CV-A6空心和实心病毒单克隆抗体,进行效... 目的建立和应用柯萨奇病毒A6型(Coxsackievirus A6,CV-A6)空心和实心病毒抗原检测系统。方法利用蔗糖密度梯度分离CV-A6空心和实心病毒颗粒,采用CV-A6病毒纯化液免疫Balb/c小鼠,筛选出特异性强的CV-A6空心和实心病毒单克隆抗体,进行效价测定;CV-A6单克隆抗体与多克隆抗体进行酶联免疫吸附试验双抗夹心系统匹配,建立病毒抗原检测系统,验证其线性、灵敏度、结合能力和特异性;应用其检测CV-A6疫苗研发过程中的抗原含量。结果本研究获得了特异性强的CV-A6空心和实心病毒颗粒单克隆抗体,效价分别为10^(7)和10^(6);分别与CV-A6兔多克隆抗体匹配出ELISA双抗夹心病毒抗原检测系统。该系统与其他肠道病毒无交叉反应,与CV-A6空心和实心病毒抗原含量存在明显的剂量效应关系,对CV-A6疫苗研究过程中的各工序段样品含量的检测结果准确。结论本研究建立的CV-A6空心和实心病毒抗原检测系统符合定性和定量检测需求,为CV-A6疫苗研究提供了一种快捷和准确的抗原含量检测方法。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒A6型 空心病毒颗粒 实心病毒颗粒 单克隆抗体 双抗夹心酶联免疫吸附试验 病毒抗原检测系统
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