应用单克隆抗体检测白蛉体内的前鞭毛体

以杜氏利什曼前鞭毛体为靶抗原的L12G9单克隆抗体(McAb),检测人工感染杜氏利什曼原虫的白蛉。当空腹雌蛉吸取病鼠血液后,分别饲养4、6、8和10d后解剖。吸血后4d,前鞭毛体较少。阳性率仅为15.9％;而10d,其感染程度较重,可获100％的阳性检出率。其阳性率与白蛉的感染程度呈正相关。另外又证明应用单克隆抗体检测时,原虫数不能低于11×10~7/ml,宜选择胃血完全消化后的白蛉,方可得到良好的效果。如捕获的白蛉,胃内前鞭毛体较少,则可经NNN基培养后,再进行检测,亦可获得同样效果。

杜氏利什曼原虫表膜的制备及保护性McAb识别膜抗原的研究

本文用匀浆及超声波破碎杜氏利什曼原虫四川犬分离株前鞭毛体,蔗糖密度梯度离心分离其表膜,电镜观察见所得样品是单位膜和膜下微管组成的表膜,测得微管直径平均为23.3nm,微管间距巨平均为15.7nm,经SDS-PAGE分离显示1条主带,次带约15条,再转移到硝化纤维膜上,用单克隆抗体2H6-E3识别,仅见有一条区带,分子量为63kDa,该单克隆抗体是己经被证实定位于前鞭毛体表膜,并具有免疫保护性的。