期刊文献+
共找到93篇文章
< 1 2 5 >
每页显示 20 50 100
CYTOTOXICITY OF INDIRECT IMMUNOTOXIN MEDIATED BY ANTI-GASTRIC CANCER MONOCLONAL ANTIBODIES ON TUMOR CELLS
1
作者 黎松 张学庸 +1 位作者 陈希陶 樊代明 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1990年第2期34-37,共4页
In the present study, an indirect assay was employed to investigate 5 anti-gastric cancer monoclonal antibodies for their cytotoxic potential as ricin A chain-containing immunotoxins. The tumor cell, were treated with... In the present study, an indirect assay was employed to investigate 5 anti-gastric cancer monoclonal antibodies for their cytotoxic potential as ricin A chain-containing immunotoxins. The tumor cell, were treated with dilutions of tested antibody followed by ricin A chain coupled to goat anti-mouse immunoglobulin. The cytotoxic effect was determined with tetrazolium colorimetric assay. The results showed that among the 5 antibodies chosen, MGb2 and MG7 could be well used for preparation of effective A chain immunotoxins. 展开更多
关键词 CYTOTOXICITY OF INDIRECT IMMUNOTOXIN mediated BY ANTI-GASTRIC CANCER monoclonal ANTIBODIES ON TUMOR cellS line IT link DEAE
下载PDF
Monoclonal Antibodies Recognizing HIV-1 gp41 Could Inhibit Env-Mediated Syncytium Formation 被引量:1
2
作者 张耿 陈应华 《Tsinghua Science and Technology》 SCIE EI CAS 2005年第4期512-516,共5页
Some monoclonal antibodies (mAbs) could inhibit infection by HIV-1. In this study, four mAbs against HIV-1 gp41 were prepared in mice. All four mAbs could bind to the recombinant soluble gp41 and recognize the nativ... Some monoclonal antibodies (mAbs) could inhibit infection by HIV-1. In this study, four mAbs against HIV-1 gp41 were prepared in mice. All four mAbs could bind to the recombinant soluble gp41 and recognize the native envelope glycoprotein gp160 expressed on the HIV-Env^+ CHO-WT cell in flow cytometry analysis. Interestingly, the results show that all four mAbs purified by affinity chromatography could inhibit HIV-1 Env-mediated membrane fusion (syncytium formation) by 40%-60% at 10 μg/mL, which implies potential inhibitory activities against HIV-1. 展开更多
关键词 HIV-1 monoclonal antibody cell fusion
原文传递
布鲁氏菌LPS单克隆抗体的制备与鉴定
3
作者 廖倩 向梦玲 +4 位作者 凌洪权 董春霞 骆璐 吴胜昔 曾政 《重庆理工大学学报(自然科学)》 CAS 北大核心 2024年第8期291-297,共7页
制备布鲁氏菌LPS特异性单克隆抗体,为建立布鲁氏菌病血清学及新型免疫传感器检测方法提供有效试剂。将天然提取的布鲁氏菌LPS抗原使用长程免疫法腹腔注射BALB/c小鼠,经过5次常规免疫及1次加强免疫后,取小鼠脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2... 制备布鲁氏菌LPS特异性单克隆抗体,为建立布鲁氏菌病血清学及新型免疫传感器检测方法提供有效试剂。将天然提取的布鲁氏菌LPS抗原使用长程免疫法腹腔注射BALB/c小鼠,经过5次常规免疫及1次加强免疫后,取小鼠脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,使用间接酶联免疫吸附试验(iELISA)对杂交瘤细胞进行筛选,并对纯化后的单克隆抗体进行生物特性鉴定。结果表明:筛选出3株稳定分泌单抗的阳性细胞株,分别命名为2-4A、3-4E、5-10B;经过亚型鉴定,3-8E、2-4A为IgG1亚型,5-10B为IgG2b亚型。将5-10B细胞株使用腹腔注射法制备腹水,并通过Protein A柱纯化腹水。纯化后单抗达到了电泳纯,BCA法测定其浓度最高可达1.431 8 mg·mL^(-1), ELISA效价达到1∶512 000,间接ELISA结果显示制备的抗体具有良好的特异性。研究制备的高特异性、高活性的单克隆抗体可为后续布鲁氏菌病特异性诊断技术研究提供参考。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 LPS 细胞融合 单克隆抗体 生物特性鉴定
下载PDF
小反刍兽疫病毒非结构蛋白C单克隆抗体的制备与鉴定
4
作者 李菊 毕冬琳 +5 位作者 杨晓莉 杨东亮 张潇文 刘方程 李琼毅 柏家林 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第5期1047-1054,共8页
为制备小反刍兽疫病毒(PPRV)非结构蛋白C单克隆抗体,根据PPRV C基因编码多肽链氨基酸序列抗原性分析,设计合成一条含20个氨基酸的抗原肽(CRSGKPRGETPGPLLPEIMQ)和一条含21个氨基酸的筛选抗原多肽(PLRAGERGLAPQAVQHRTLIK),将它们分别与... 为制备小反刍兽疫病毒(PPRV)非结构蛋白C单克隆抗体,根据PPRV C基因编码多肽链氨基酸序列抗原性分析,设计合成一条含20个氨基酸的抗原肽(CRSGKPRGETPGPLLPEIMQ)和一条含21个氨基酸的筛选抗原多肽(PLRAGERGLAPQAVQHRTLIK),将它们分别与钥孔血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin, KLH)和生物素羧基蛋白(biotin carboxyl carrier protein, Biotin)交联,制备获得免疫原和筛选抗原。用免疫原肌肉注射5只8~12周龄、体重约20 g的无特定病原体(specific pathogen free, SPF)级BALB/c雌性小鼠,第1次免疫后分别间隔7 d进行第2次免疫和第3次免疫,三免后21 d进行冲击免疫,冲击免疫后第3天采集血液分离血清,采用间接酶联免疫吸附法(ELISA)测得1只免疫小鼠血清抗体效价为1∶312 500,2只为1∶62 500。取3只小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0经聚乙二醇(PEG)融合制备杂交瘤细胞,通过间接ELISA筛选出26株阳性淋巴杂交瘤细胞,进一步经克隆化培养筛选出46株单克隆细胞株。通过Western blot(WB)筛选获得2株能稳定分泌特异性抗PPRV C蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,WB、间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay, IFA)鉴定显示,制备的单克隆抗体具有较好的灵敏性和病毒反应性。研究结果为进一步阐明C蛋白在PPRV生命周期中的作用奠定了基础,也为小反刍兽疫(PPR)诊断提供了有效的诊断试剂。 展开更多
关键词 小反刍兽疫病毒 非结构蛋白C 杂交瘤细胞技术 单克隆抗体
下载PDF
猪圆环病毒2型Cap蛋白的原核表达及其单克隆抗体制备
5
作者 孙荣航 容芳 +2 位作者 陈桂娥 刘郁夫 陈瑞爱 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第14期61-67,73,126,共9页
为了制备猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)Cap蛋白单克隆抗体,试验将Cap基因克隆至原核表达载体pET-28a(+)上并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,将获得的重组表达菌pET28a-Cap/BL21(DE3)用IPTG进行诱导后表达重组蛋... 为了制备猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)Cap蛋白单克隆抗体,试验将Cap基因克隆至原核表达载体pET-28a(+)上并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,将获得的重组表达菌pET28a-Cap/BL21(DE3)用IPTG进行诱导后表达重组蛋白,利用His标签对表达的重组蛋白进行纯化;将纯化后的重组蛋白于皮下免疫Balb/c小鼠,免疫结束后测定免疫小鼠血清效价,当小鼠血清抗体效价达到1∶100000时进行细胞融合;采用有限稀释法进行亚克隆,筛选能够稳定分泌抗体且抗体效价高的阳性杂交瘤细胞株,鉴定杂交瘤细胞株抗体亚类,并选择1株抗体效价最高的细胞株再次注射到小鼠腹腔中(5×10^(5)个/只),取腹水采用亲和层析法对单克隆抗体进行纯化;采用间接ELISA方法测定单克隆抗体效价并检测其特异性,分别采用Western-blot和间接免疫荧光试验检测单克隆抗体的反应性。结果表明:PCR扩增得到大小为708 bp的Cap基因,经双酶切与测序验证后,成功构建重组表达质粒pET28a-Cap;重组表达菌pET28a-Cap/BL21(DE3)经诱导后表达的重组蛋白可与His标签抗体发生特异性反应,纯化后的重组蛋白在预期位置(31.7 ku)出现清晰的单一条带;共筛选出8株能够稳定分泌抗体且抗体效价高的阳性单克隆细胞株(1E5、2A9、3C6、4B3、5F7、6D11、7A2、8G1株),抗体亚类鉴定均为IgG1亚类。其中7A2株抗体效价最高,用于单克隆抗体的制备;间接ELISA方法证实7A2株单克隆抗体仅与PCV-2 Cap蛋白发生反应,与猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)、猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)和猪伪狂犬病病毒(Porcine pseudorabies virus,PRV)不发生反应;Western-blot和间接免疫荧光试验均证实PCV-2 Cap蛋白可被7A2株单克隆抗体特异性识别。说明本试验成功制备出具有高纯度、强特异性、良好反应性的PCV-2 Cap蛋白单克隆抗体。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型(PCV-2) 单克隆抗体 CAP蛋白 细胞融合 亚克隆
下载PDF
链霉素残留检测ELISA试剂盒的研制及应用 被引量:14
6
作者 范国英 王顺岗 +3 位作者 王自良 张改平 邓润广 杨艳艳 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期380-384,共5页
本研究采用EDC法人工合成链霉素抗原(SM—BSA),免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术获得了分泌抗链霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株,建立了快速检测链霉素(SM)残留的酶联免疫方法,并成功研制了试剂盒。然后对其灵敏度、准确度、特异... 本研究采用EDC法人工合成链霉素抗原(SM—BSA),免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术获得了分泌抗链霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株,建立了快速检测链霉素(SM)残留的酶联免疫方法,并成功研制了试剂盒。然后对其灵敏度、准确度、特异性、基质效应性等技术指标进行检测,同时应用该试剂盒对生长猪尿液中的残留情况进行检测。结果表明:除双氢链霉素外,该试剂盒与其它抗生素类药物均无交叉反应;线性检测范围为1~1289g/L,相关系数R^2=0.9251,灵敏度为0.45μg/L,半数抑制浓度(IC50)为7.769g/L,检测限为19g/L;猪尿样的平均添加回收率为84.1%;基质对该试剂盒的检测结果影响不大。该试剂盒具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于SM残留的快速检测,具有较高的推广应用价值。 展开更多
关键词 链霉素 单克隆抗体 细胞融合 竞争ELISA 快速检测试剂盒
下载PDF
抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选及金标试纸检测方法的建立 被引量:11
7
作者 王自良 王建华 +4 位作者 杨艳艳 杨继飞 张海棠 范国英 张改平 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2006年第5期6-12,共7页
以BSA-CAP-HS免疫Balb/C小鼠,用细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞,体内诱生腹水法制备cAP mAb,并鉴定其免疫学特性;依据胶体金免疫层析试验(GICA)原理,以CAP mAb 为金标抗体,研制CAP残留快速检测金标试纸(CAP-St... 以BSA-CAP-HS免疫Balb/C小鼠,用细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞,体内诱生腹水法制备cAP mAb,并鉴定其免疫学特性;依据胶体金免疫层析试验(GICA)原理,以CAP mAb 为金标抗体,研制CAP残留快速检测金标试纸(CAP-Strip),并对其性能进行测定。结果表明,筛选出了3株杂交瘤细胞,其中最好的4F9-B2株间接ELISA效价细胞培养上清为1:1 280,腹水为1:640 000,亲和常数(Ku)为 1.84×1010 L/mol,对CAP的半数抑制浓度(IC50)为0.88μg/L,与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应(CR%)为150%,与其他酰胺醇类和抗菌素类药物无交叉反应;CAP-Strip的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit拟合曲线,目测检测限为0.5μg/L;其敏感性与竞争ELISA试剂盒相当,符合率为100%;可见CAP-Strip具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于CAP残留的快速检测,具有较高的推广应用价值。 展开更多
关键词 氯霉素 细胞融合 单克隆抗体 胶体金免疫层析试验 快速检测试纸
下载PDF
抗链霉素杂交瘤细胞株的建立与竞争ELISA试剂盒的研制 被引量:6
8
作者 范国英 王建华 +4 位作者 朱金凤 张改平 邓瑞广 刘庆堂 杨继飞 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2007年第4期46-50,共5页
制备牛血清白蛋白-链霉素(SM-BSA)免疫Balb/c小鼠,用细胞融合技术制备抗链霉索单克隆抗体(SM mAb)杂交瘤细胞,体内诱生腹水法制备SM mAb。依据竞争ELISA原理,应用SM mAb研制SM快速ELISA检测试剂盒(SM-Kit),并对其灵敏度、准确度、特异... 制备牛血清白蛋白-链霉素(SM-BSA)免疫Balb/c小鼠,用细胞融合技术制备抗链霉索单克隆抗体(SM mAb)杂交瘤细胞,体内诱生腹水法制备SM mAb。依据竞争ELISA原理,应用SM mAb研制SM快速ELISA检测试剂盒(SM-Kit),并对其灵敏度、准确度、特异性、基质效应性等进行检测。结果表明,SM-Kit标准曲线呈典型的S型,线性检测范围为1~128μg/L,相关系数R2=0.925 1,灵敏度为0.45μg/L,半数抑制浓度(IC50)为7.76μg/L,检测限为1μg/L;奶样、猪尿样的平均添加回收率分别为104.45%和84.1%;SM-Kit与双氢链霉素的交叉反应率(CR)为104.16%,与其他抗生素类药物的CR<0.001%;基质对SM-Kit的检测结果影响不大。可见SM-Kit具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于SM残留的快速检测,具有较高的推广应用价值。 展开更多
关键词 链霉素 单克隆抗体 细胞融合 竞争ELISA 快速检测试剂盒
下载PDF
抗雌二醇单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:3
9
作者 戴小华 吴国娟 +2 位作者 沈红 赵小萌 陆彦 《中国农学通报》 CSCD 2005年第6期83-85,共3页
活化雌二醇(E2)C3处的酚-OH,与牛血清白蛋白(BSA)偶联,制备得E2的完全抗原,利用完全抗原免疫动物,采用单克隆抗体技术,经过细胞融合、克隆筛选、扩大培养、动物体内诱生腹水等过程,最后获得了E2的单克隆抗体,对纯化的单克隆抗体的性质鉴... 活化雌二醇(E2)C3处的酚-OH,与牛血清白蛋白(BSA)偶联,制备得E2的完全抗原,利用完全抗原免疫动物,采用单克隆抗体技术,经过细胞融合、克隆筛选、扩大培养、动物体内诱生腹水等过程,最后获得了E2的单克隆抗体,对纯化的单克隆抗体的性质鉴定,结果显示:其抗体效价为1:106,抗体属于IgG2a型;分子量为179000Da;E2单克隆抗体的亲和常数K2.9108L/mol。 展开更多
关键词 雌二醇 鉴定 制备 单克隆抗体技术 牛血清白蛋白 免疫动物 细胞融合 扩大培养 动物体内 抗体效价 亲和常数 全抗原 E2 分子量 MOL 腹水 诱生
下载PDF
雌三醇单克隆抗体的制备与表征 被引量:6
10
作者 王永成 常文保 郭振泉 《北京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期459-465,共7页
活化雌三醇 (E3 )C3处的酚—OH ,与牛血清白蛋白 (BSA)偶联 ,制备得E3 的完全抗原。利用完全抗原免疫动物 ,采用单克隆抗体技术 ,经过细胞融合、克隆筛选、扩大培养、动物体内诱生等过程 ,最后获得了E3 的单克隆抗体。对纯化的单克隆抗... 活化雌三醇 (E3 )C3处的酚—OH ,与牛血清白蛋白 (BSA)偶联 ,制备得E3 的完全抗原。利用完全抗原免疫动物 ,采用单克隆抗体技术 ,经过细胞融合、克隆筛选、扩大培养、动物体内诱生等过程 ,最后获得了E3 的单克隆抗体。对纯化的单克隆抗体的性质进行表征 ,结果表明 :抗体的效价为 6 0× 10 -10 mol L ,抗体属于IgG1型 ,分子量为 16 80 0 0u ,单克隆抗体与固定化抗原亲和常数为4 7× 10 7L mol。 展开更多
关键词 雌三醇 细胞融合 单克隆抗体
下载PDF
应用活体骨髓瘤细胞制备单克隆抗体 被引量:4
11
作者 李永亮 田美娜 +2 位作者 卢曾军 杨苏珍 刘在新 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期63-66,共4页
目的:用活体骨髓瘤细胞SP2/0做融合提高融合率制备单克隆抗体,并与常规方法比较效果。方法:将SP2/0细胞打到8周龄的SPF级BALB/c小鼠皮下,待实体瘤生长到直径达2~3cm时无菌解剖取实体瘤,分离出骨髓瘤细胞进行融合。同时用培养基培养SP2/... 目的:用活体骨髓瘤细胞SP2/0做融合提高融合率制备单克隆抗体,并与常规方法比较效果。方法:将SP2/0细胞打到8周龄的SPF级BALB/c小鼠皮下,待实体瘤生长到直径达2~3cm时无菌解剖取实体瘤,分离出骨髓瘤细胞进行融合。同时用培养基培养SP2/0细胞进行融合做比较,分两组进行。比较两种方法的融合率以及两种方法制备出来的单克隆抗体的相对亲和力。结果:做了6次融合,实体瘤融合组融合率为70.4%,常规法融合组44.6%,两种方法制备单抗的相对亲和力均达到1∶100000以上。结论:利用活体实体瘤细胞进行融合能明显提高细胞融合率。 展开更多
关键词 单克隆抗体(MAb)SP2/0细胞 活体骨髓瘤细胞 融合
下载PDF
抗Der p 2单克隆抗体细胞株的建立与鉴定 被引量:2
12
作者 张红绪 胡萍 +2 位作者 胡庚熙 刘丹丹 邢文会 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期136-139,共4页
目的:建立Der p 2(屋尘螨Ⅱ类变应原)杂交瘤细胞株,并对其分泌的Der p 2单克隆抗体进行鉴定.方法:用重组Der p 2蛋白作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选和3次克隆化,制备出单克隆抗体.... 目的:建立Der p 2(屋尘螨Ⅱ类变应原)杂交瘤细胞株,并对其分泌的Der p 2单克隆抗体进行鉴定.方法:用重组Der p 2蛋白作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选和3次克隆化,制备出单克隆抗体.采用间接ELISA法、Western blot法确定单克隆抗体的免疫球蛋白的类型和亚类、相对亲和力、特异性,对单克隆抗体进行鉴定.结果:获得3株能稳定分泌高效价Der p 2单克隆抗体的杂交瘤细胞株,186为IgG1类,1G11、4B1为IgG2a类.间接ELISA法检测细胞上清效价为10^4~10^5,腹水效价为10^5~10^6.Western blot试验证明3株单抗与Der p 2蛋白均有特异性反应,结论:成功制备了3株抗Der p 2的单克隆抗体,均具有良好的特异性和亲和力,为进一步建立Der p 2蛋白检测和纯化的方法奠定了基础. 展开更多
关键词 Der P 2 单克隆抗体 杂交瘤 细胞融合
下载PDF
高亲和力大豆凝集素单抗制备及免疫学特性鉴定 被引量:3
13
作者 胡骁飞 李燕虹 +5 位作者 邢云瑞 胡思宇 孙亚宁 邢广旭 邓瑞广 张改平 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2477-2483,共7页
为制备高亲和力的大豆凝集素(SBA)单克隆抗体,本试验以50μg SBA蛋白/200μL乳化液/只的剂量免疫BALB/c小鼠,间接ELISA和间接竞争ELISA鉴定多抗血清效价和灵敏性。选择血清效价和灵敏性较好的小鼠进行细胞融合。通过有限稀释亚克隆筛选... 为制备高亲和力的大豆凝集素(SBA)单克隆抗体,本试验以50μg SBA蛋白/200μL乳化液/只的剂量免疫BALB/c小鼠,间接ELISA和间接竞争ELISA鉴定多抗血清效价和灵敏性。选择血清效价和灵敏性较好的小鼠进行细胞融合。通过有限稀释亚克隆筛选出能稳定分泌SBA单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株。采用体内诱生腹水法批量制备SBA单克隆抗体并对其免疫学特性进行鉴定。结果表明,SBA免疫的4只小鼠中,1号小鼠效价最高且灵敏性最好,半数抑制浓度(IC50)为571.4μg·L^-1。选取该小鼠进行细胞融合,并最终得到1株杂交瘤细胞,命名为5B4E10。制备的SBA单克隆抗体的效价达到1∶409600以上,IC50为82.04μg·L^-1,亚型为IgG1型,亲和力常数(Ka)为1.83×10^9 L·mol^-1。且该抗体与大豆球蛋白、β-伴大豆球蛋白和其他抗营养因子无交叉反应。本研究结果为建立大豆及其制品中SBA的免疫学检测方法奠定了良好的抗体基础。 展开更多
关键词 大豆凝集素(SBA) 动物免疫 细胞融合 杂交瘤筛选 单克隆抗体
下载PDF
抗牛H-Y抗原单克隆抗体的研制试验 被引量:2
14
作者 高淑静 温山鸿 +2 位作者 罗承浩 肖锡斌 张昌卿 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期99-103,共5页
H-Y抗原是位于Y染色体上的基因位点所编码的细胞膜抗原,能直接或间接地诱导原始性腺分化为睾丸。以牛睾丸组织匀浆作为抗原,免疫BALB/C小鼠,用杂交瘤细胞技术制备的单克隆抗体6F、7H与部分牛精子呈阳性反应。
关键词 免疫 细胞融合杂交 单克隆抗体 H-Y抗原
下载PDF
高亲和力克伦特罗单克隆抗体的研制及免疫试纸检测方法的建立 被引量:3
15
作者 张海棠 王自良 +2 位作者 刘玺 钟华 范国英 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第5期149-153,共5页
重氮化法将克伦特罗(CL)偶联于BSA合成免疫抗原BSA-CL,戊二醛法(GA)合成包被抗原OVA-CL,用BSA-CL免疫Balb/C小鼠。细胞融合技术建立高亲和力CL单克隆抗体(CLmAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备CLmAb,并测定其亲和性。依据胶体金免疫... 重氮化法将克伦特罗(CL)偶联于BSA合成免疫抗原BSA-CL,戊二醛法(GA)合成包被抗原OVA-CL,用BSA-CL免疫Balb/C小鼠。细胞融合技术建立高亲和力CL单克隆抗体(CLmAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备CLmAb,并测定其亲和性。依据胶体金免疫层析试验(GICA)原理,应用CLmAb研制CL残留快速检测免疫试纸(CL-Strip),并测定其性能。结果表明,筛选出16株杂交瘤细胞,其中亲和力最高的为3C12-6H6,亲和常数(Ka)为1.76×1010L/mol。CL-Strip的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,目测检测限为0.5μg/L;其敏感性与竞争ELISA试剂盒和GC/MS相当,符合率为100%。CL-Strip具有具有敏感、特异、快速、简便的特点,可推广应用于CL残留的快速检测。 展开更多
关键词 克伦特罗 细胞融合 单克隆抗体 胶体金免疫层析试验 快速检测试纸
下载PDF
抗体依赖细胞介导的细胞毒性抗肿瘤研究进展 被引量:7
16
作者 屈钰华 黎阳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第5期1370-1375,共6页
近年来,随着单克隆抗体临床应用的逐渐增加,抗体依赖细胞介导的细胞毒性(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)的抗肿瘤效果日益受到重视。自然杀伤细胞(NK细胞)是介导ADCC特异性抗肿瘤最主要的效应细胞,而吞噬细胞、T... 近年来,随着单克隆抗体临床应用的逐渐增加,抗体依赖细胞介导的细胞毒性(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)的抗肿瘤效果日益受到重视。自然杀伤细胞(NK细胞)是介导ADCC特异性抗肿瘤最主要的效应细胞,而吞噬细胞、T细胞及粒细胞对ADCC抗肿瘤效应也有一定作用。ADCC被证明是单克隆抗体临床治疗肿瘤的重要机制和手段,IgG型抗体首先通过抗原结合部位与靶细胞(肿瘤细胞)结合,再由效应细胞上的FcγR识别其Fc段,介导ADCC。已投入临床应用的单克隆抗体有:利妥昔单克隆抗体及新型的抗CD20单克隆抗体、曲妥珠单克隆抗体、西妥昔单克隆抗体、依决洛单克隆抗体、尼妥珠单克隆抗体及吉妥单克隆抗体,这些单克隆抗体均具有ADCC抗肿瘤作用。单克隆抗体介导的ADCC抗肿瘤疗效受多方面因素影响,包括:IgGFc受体的基因多态、肿瘤细胞抗原、血清抗体水平、细胞因子及药物等。FcγRIIIa-158V/V基因型和FcγRIIa-131H/H基因型比其他基因型的外周血单个核细胞的ADCC作用更强。提高肿瘤抗原水平,降低血清抗体水平或增加某些细胞因子(如IL-2,IL-21,IL-15等)均可提高单克隆抗体的ADCC作用,而避免使用某些药物(如地塞米松、肿瘤坏死因子拮抗剂)或适当使用昂丹司琼和氯马斯汀也可增强单克隆抗体的ADCC抗肿瘤作用。总之,ADCC抗肿瘤的临床应用十分重要,但效果会受多方面因素的影响。本文就ADCC杀伤机理、临床常用的和已投入临床使用的具有ADCC抗肿瘤效应的单克隆抗体,影响ADCC抗肿瘤效率的因素及其他细胞ADCC的抗肿瘤作用进行了综述。 展开更多
关键词 抗体依赖细胞介导的细胞毒性 肿瘤 单克隆抗体 免疫治疗
下载PDF
重组人纤维连接片段联合抗CD3单抗包被对急性白血病CIK增殖和杀伤活性的影响 被引量:2
17
作者 李青 邓琦 +3 位作者 刘鹏江 白雪 穆娟 李玉明 《天津医药》 CAS 北大核心 2013年第7期632-635,共4页
目的探讨重组人纤维连接片段(RetroNectin)与抗CD3单抗(CD3Ab)联合包被培养对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)增殖和杀伤活性的影响。方法取完全缓解期急性白血病(AL)患者外周血单个核细胞,采用RetroNectin包被(RN组)、CD3Ab包被(CD3Ab组)... 目的探讨重组人纤维连接片段(RetroNectin)与抗CD3单抗(CD3Ab)联合包被培养对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)增殖和杀伤活性的影响。方法取完全缓解期急性白血病(AL)患者外周血单个核细胞,采用RetroNectin包被(RN组)、CD3Ab包被(CD3Ab组)及RetroNectin联合CD3Ab包被(RN+CD3Ab组)与传统方法培养(对照组)获得CIK细胞,比较各组增殖、表达及杀伤活性。结果 CIK扩增:各实验组CIK扩增倍数高于对照组,且RN+CD3Ab组高于RN组和CD3Ab组(P<0.05)。收获细胞CD25+表达:RN组和RN+CD3Ab组高于对照组和CD3Ab组(P<0.05)。各期细胞比例:RN组和RN+CD3Ab组的G1期细胞比例低于CD3Ab组和对照组,而S期细胞高于CD3Ab组和对照组(P<0.05)。CIK对自体AL细胞的杀伤活性:效靶比10∶1、20∶1和40∶1时,RN组和RN+CD3Ab组高于对照组和CD3Ab组(P<0.05)。收获细胞凋亡率:RN组和RN+CD3Ab组较CD3Ab组和对照组下降(P<0.05)。结论 RetroNectin联合CD3Ab包被用于CIK体外培养可获得增殖率和活性更高的免疫活性细胞,是一种值得推荐的方法。 展开更多
关键词 重组融合蛋白质类 纤连蛋白类 抗原 抗体单克隆 细胞因子类 杀伤细胞
下载PDF
1-芘丁酸单克隆抗体的制备及免疫学性能鉴定 被引量:2
18
作者 胡骁飞 孔蒙蒙 +3 位作者 邢广旭 邢云瑞 孙亚宁 张改平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1114-1118,共5页
目的:拟制备灵敏、特异的1-芘丁酸(PBA)单克隆抗体并对其免疫学性能进行鉴定。方法:碳二亚胺法(EDC)制备人工抗原PBA-BSA和PBA-OVA。PBA-BSA免疫BALB/c小鼠,选择血清效价高、灵敏度良好的小鼠进行细胞融合并筛选出分泌抗PBA单克隆抗体... 目的:拟制备灵敏、特异的1-芘丁酸(PBA)单克隆抗体并对其免疫学性能进行鉴定。方法:碳二亚胺法(EDC)制备人工抗原PBA-BSA和PBA-OVA。PBA-BSA免疫BALB/c小鼠,选择血清效价高、灵敏度良好的小鼠进行细胞融合并筛选出分泌抗PBA单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法批量制备抗体并对其免疫学性能进行鉴定。结果:筛选出能稳定分泌PBA单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株10C2A6,单克隆抗体效价为1∶2.56×10^5,IC50为0.86 ng/ml,亚型为IgG2b型,亲和常数为1.96×10^9 L/mol,与芘、1-芘甲醛和1-芘甲醇的交叉反应率分别为1.74%、1.42%和0.63%,与其他物质交叉反应率均小于0.05%。结论:本实验成功制备出了灵敏、特异的PBA单克隆抗体,并为其免疫学检测方法的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 1-芘丁酸 人工抗原 细胞融合 杂交瘤细胞 单克隆抗体
下载PDF
抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株的制备及筛选 被引量:2
19
作者 林月霞 董斌 +2 位作者 袁茵 段涛 田素娟 《广东药学院学报》 CAS 2009年第5期526-529,共4页
目的获得稳定、高效分泌抗氯霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。方法以CAP-HS-BSA免疫BALB/c小鼠,用细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞,体内诱生腹水法大量制备单抗。捕获ELISA法测定小鼠免疫球蛋白亚型,间接ELISA法测定腹水效... 目的获得稳定、高效分泌抗氯霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。方法以CAP-HS-BSA免疫BALB/c小鼠,用细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞,体内诱生腹水法大量制备单抗。捕获ELISA法测定小鼠免疫球蛋白亚型,间接ELISA法测定腹水效价;用两步硫酸铵法和G蛋白亲和层析法来纯化腹水。结果成功建立了一株分泌抗CAP单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞4D10。经检测,其分泌的抗体亚类为IgG1,杂交瘤染色体数目90-110条,间接ELISA检测诱生小鼠腹水的抗体效价达1∶2.56×105,纯度达95%,该细胞连续培养生物学性状稳定。结论成功制备的抗氯霉素单克隆抗体4D10效价高、纯度高,为利用该单抗研制检测氯霉素残留试剂盒提供原材料。 展开更多
关键词 氯霉素 细胞融合 单克隆抗体 间接ELISA
下载PDF
群特异性蓝舌病病毒单克隆抗体的制备和鉴定 被引量:4
20
作者 杨姝 李文超 +4 位作者 吕茂民 尹惠琼 马玉媛 刘明 章金刚 《生物技术通讯》 CAS 2008年第6期866-869,共4页
目的:制备群特异性抗蓝舌病病毒(BTV)单克隆抗体,并对其特性进行鉴定,为建立检测BTV抗原及抗体的ELISA方法奠定基础。方法:用纯化的BTV颗粒为免疫抗原免疫BALB/c鼠,以大肠杆菌表达的VP7蛋白作为筛选抗原,用间接ELISA法筛选杂交瘤细胞株... 目的:制备群特异性抗蓝舌病病毒(BTV)单克隆抗体,并对其特性进行鉴定,为建立检测BTV抗原及抗体的ELISA方法奠定基础。方法:用纯化的BTV颗粒为免疫抗原免疫BALB/c鼠,以大肠杆菌表达的VP7蛋白作为筛选抗原,用间接ELISA法筛选杂交瘤细胞株;选取抗体效价最高的一株制备BTV单克隆抗体,以该抗体为捕获抗体与8种不同血清型BTV进行ELISA反应,结果与细胞病变反应进行比对;以该抗体为竞争抗体,与12种不同血清型绵羊BTV抗血清进行竞争ELISA反应,并将结果与参比c-ELISA试剂盒结果进行比对。结果:筛选出5株稳定分泌BTV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并选其中一株(3E2)制备了高纯度的单克隆抗体;该单抗用于检测不同血清型BTV,与细胞病变反应结果完全相符;用于检测不同血清型绵羊BTV抗血清,其结果与参比c-ELISA试剂盒符合率为100%,与鹿流行性出血热病毒抗原和抗体均无交叉反应。结论:制备的BTV单克隆抗体具有良好的群特异性,可用于检测不同血清型BTV抗原及BTV抗体。 展开更多
关键词 蓝舌病病毒 单克隆抗体 细胞融合
下载PDF
上一页 1 2 5 下一页 到第
使用帮助 返回顶部