黄鳝AK1基因序列特征及在性腺中的表达模式分析

【目的】探究腺苷酸激酶1(adenylate kinase 1, AK1)序列特征及其在黄鳝性腺发育过程中的功能。【方法】克隆黄鳝AK1基因序列,对其进行生物信息学分析;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测AK1在黄鳝各组织、不同发育时期性腺以及H2O2孵育后卵巢中的表达情况,并利用免疫组化技术定位AK1在黄鳝性腺中的表达位置。【结果】黄鳝AK1编码区序列为630 bp,编码209个氨基酸残基,具有AK家族保守的NMP和LID结构域,与其他鲤科鱼类的同源基因具有较高的序列相似性;黄鳝AK1在垂体、眼睛、心、肝、肾、肠、脾、肌肉、血液、卵巢和精巢中均有表达,在肌肉组织中的表达量最高,在血液中表达量最低。AK1在卵巢发育周期的卵黄生成早期性腺和性逆转周期的间性晚期性腺表达量最高,而在卵黄生成中晚期性腺和间性早期性腺表达最低。H2O2孵育后各浓度组AK活性的表达均呈现先下降后上升的趋势(P<0.05),浓度越高变化的趋势越明显(P<0.05);而AK1的表达均受到抑制。AK1主要定位于卵黄生成早期性腺的颗粒细胞中。【结论】AK1参与了黄鳝性腺的发育,这为揭示黄鳝性腺发育过程中的能量代谢等生物学过程奠定了一定的基础。

黄鳝不同发育阶段血清蛋白含量及电泳分析

为研究黄鳝性逆转机理，对黄鳝不同发育阶段进行了血清蛋白含量的测定及血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳分析，结果表明，雌雄黄鳝血清蛋白含量基本相同，而雌雄间体黄鳝的血清蛋白含量则有所增加。从电泳分析结果来看，黄鳝的雌、雄和雌雄间体三个不同发育阶段的各组分血清蛋白百分含量基本相似，都是α１球蛋白含量较高，其次是γ球蛋白，再次是α２球蛋白，白蛋白和β球蛋白较低。