A New Diels-Alder Type Adduct and a New Flavone from the Stem and Root Bark of Morus mongolica

A new Diels-Alder type adduct mongolicin G （1） and a new flavone 5＇-（1＂, 1＂-dimethylallyl）-5,7,2＇,4＇-tetrahydroxyflavone （2） were isolated from the stem and root bark of Morus mongolica. Their structures were determined by spectroscopic analysis and chiroptical methods.

单倍体川桑(M.notablis Schneid)愈伤组织诱导及丛生芽分化培养

川桑(M.notabilis Schneid.)是分布在四川、云南等山区的珍稀濒危单种桑树,资源稀少,单倍体,是桑树研究的重要材料.实验的目的是通过植物组织培养手段培养川桑离体再生植株,保存川桑种质资源及展开桑树的基础研究.实验内容包括了选择外植体、优化培养基成分和探讨生长调节物质对川桑离体再生的影响.结果表明:茎段容易被污染、叶片只能诱导出愈伤组织、以腋芽作为外植体大大降低了外植体的污染率,并且较好地诱导出愈伤组织和丛生芽;植物生长调节剂TDZ、6-BA都能诱导出愈伤组织,但是只有6-BA的培养基中没有丛生芽的发生;最适培养基为改良MS+6-BA2.0 mg/L+IAA0.02 mg/L+TDZ 0.1 mg/L+AgNO35.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.8g/L.其愈伤组织诱导率为90%,丛生芽诱导率为85.7%.这为后续生根研究奠定了基础.

2份蒙桑和长穗桑野生种质资源的染色体数目观察

染色体基数的确定对于桑树种质材料的倍性认定和阐明桑属植物种群的演化路线具有十分重要的作用。以来自云南省的野生蒙桑(Morus mongolica Schneid)种质资源6号和野生长穗桑(Morus wittiorum Hand-Mazz)种质资源7号的种子萌发幼苗(分别命名为云6号与云7号)叶片为材料,采用去壁低渗法制备染色体标本,对其染色体数目进行观察,发现云6号与云7号桑树幼苗的体细胞的染色体数目分别为35条和49条,即:2n=5x=35和2n=7x=49。该研究结果以蒙桑和长穗桑2个桑种的野生种质资源再次证实了桑树的染色体基数为7(x=7)的推论。

蒙桑茎皮中Diels-Alder型加合物化学成分的研究

目的 研究蒙桑Morus mongolica茎皮中的Diels-A1der型加合物化学成分。方法 利用硅胶柱色谱、RP-18及Sephadex LH-20进行分离纯化，根据各种光谱技术进行结构鉴定。结果 分离得到6个Diels-A1der型加合物，分别为阿尔本F（albanin F，Ⅰ）、桑酮L（kuwanon L，Ⅱ）、双桑辛素（dimoracin，Ⅲ）、桑酮J（kuwanon J，Ⅳ）、桑呋哺J（mulberrofuran J，Ⅴ）、桑呋哺Q（mulberrofuran Q，Ⅵ）。结论 化合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ为首次从该种植物分得。抗氧化筛选结果表明，化合物Ⅳ～Ⅵ具有抗氧化活性。

4种分布于浙江石灰岩山地的新记录植物

报道了4种分布于浙江石灰岩山地的新记录植物,分别为中国蕨科Sinopteridaceae的平羽碎米蕨Cheilosoriapatula(Baker)P.S.Wang&X.Y.Wang(华东新记录),壳斗科Fagaceae的橿子栎Quercus baronii Skan(华东新记录),桑科Moraceae的蒙桑Morus mongolica(Bur.)Schneid.(浙江新记录)和芸香科Rutaceae的小花花椒Zanthoxylum micranthum Hemsl.(华东新记录)。

桑树低温诱导基因Wap25的序列分析及表达产物的亚细胞定位

Wap25是从桑树幼茎克隆的低温诱导蛋白基因,为胚胎后期富集蛋白(LEA)基因的成员之一,与其它物种低温诱导基因的同源性很低。生物信息学分析表明,桑树低温诱导基因Wap25编码蛋白由226个氨基酸组成,分子质量25.3kD,等电点5.52;蛋白N端1-30位氨基酸表现出强烈的疏水性,其后是亲水性高的区域,平均亲水值达-1.020,而蛋白1-29位氨基酸为典型的真核生物蛋白质的信号肽序列,表明WAP25蛋白属于分泌型蛋白。用SubLocv1.0软件预测WAP25的亚细胞定位,将该蛋白定位于细胞质中。Tmpred软件预测WAP25不存在跨膜结构。构建Wap25与绿色荧光蛋白(GFP)的重组质粒,用基因枪法将其转入洋葱表皮细胞,在激光扫描共聚焦显微镜下发现GFP分散于洋葱表皮的细胞质中,而在细胞核未发现GFP的表达,此结果与WAP25的亚细胞定位预测结果相符。

河北桑属二新变种

河北桑属二新变种武玉壁，张进献，庞玉兰（河北省农林科学院蚕桑研究所，承德０６７０００）关键词桑属，圆叶蒙桑，裂叶桑ＴＷＯＮＥＷＶＡＲＩＥＴＹＯＦＭＯＲＵＳＦＲＯＭＨＥＢＥＩ￥ＷＵＹｕ─Ｂｉ，ＺＨＡＮＧＪｉｎ─Ｘｈｎ，ＰＡＮＣＹｕ─Ｌａｎ（Ｉｎｓｔｉｔ...

蒙桑肌动蛋白基因的克隆与序列测定

为蒙桑基因表达与调控模式的研究以及蒙桑资源的利用提供参考,进行了蒙桑肌动蛋白(actin)基因的克隆与序列测定。结果表明:蒙桑actin基因mRNA序列大小为1 699bp,其中基因编码区1 134bp(GenBank登录号:KF031062),编码的377个氨基酸残基与其他植物的一致性在98%以上。该基因和川桑基因组中其他4个actin基因外显子数量和长度相同,但内含子差异极大,其CDS与桑树Morus010751(EXC30503)的一致性达到98%,氨基酸一致性为100%。聚类分析将其归为Class II类,与来自桑属和毛果杨的actin基因最先聚合在同一分支。

川桑的种子萌发及染色体核型鉴定

野生桑树种质资源川桑(Morus notabilis Schneid)作为桑树基因组测序的桑种,是研究桑树染色体和功能基因的重要材料。将从四川省雅安市采集的野生川桑种子人工去皮后在MS培养基上进行培养,实现了野生川桑种子室内培养条件下的萌发,种子萌发率高达85.7%。分别以萌发幼苗的叶片和根尖为材料,采用去壁低渗法制备染色体标本进行核型鉴定,结果显示川桑幼苗组织体细胞有14条染色体,并组成7对,即2n=2x=14。川桑种子的室内萌发解决了进行川桑功能基因组研究时受材料限制的难题;染色体核型鉴定的结果验证了桑树染色体基数为7(x=7)的推论。

蒙桑叶化学成分研究

运用大孔吸附树脂、离子交换树脂、硅胶和Sephadex LH-20等色谱方法对蒙桑Morus mongolica叶的化学成分进行分离纯化,分离得到了10个化合物。通过NMR等波谱技术确定化合物的结构,分别鉴定为l-脱氧野尻霉素(1)、Fagomine(2)、肌醇c(3)、moracin M(4)、moracin M3-O-β-D-glucopyranoside(5)、umbelliferone(6)、scopoletin(7)、syringaresinol(8)、2,4,2′,4′-tetrahydroxychalcone(9)和胡萝卜苷(10)。其中化合物2、3、5～10为首次从该植物中分离得到的,化合物9为一新天然产物。

三种桑生理特性对盐胁迫的响应

以龙桑(Morus alba cv.Tortuosa)、鸡桑(Morus australis Poir.var.Australis)、蒙桑(Morus mongolica Schneid.)为研究对象,探究了不同浓度盐胁迫(0、100、200、300、400 mmol·L^-1)对3种桑的丙二醛(malondialdehyde,MDA)、叶绿素、可溶性糖(soluble sugar,SS)、过氧化物酶(peroxidase,POD)、超氧化物歧化酶(superoxide,SOD)等生理指标的影响。结果表明:在盐胁迫过程中,3种桑科植物中MDA含量随盐浓度的升高而增加,蒙桑MDA含量均高于其他桑品种;叶绿素含量随盐浓度的升高逐渐下降,在盐浓度为400 mmol·L^-1时,龙桑、鸡桑、蒙桑叶绿素含量达到最小值,分别为6.75、12.61、8.93 mg·g-1;随着盐浓度的升高,SOD活性、POD活性、SS含量均呈现先增加后降低的趋势。研究结果可为西部盐渍化地区栽植不同桑品种的耐盐性能评价提供理论依据。

蒙桑枝化学成分的研究(Ⅰ)

自桑科桑属植物蒙桑(Morus monglica Schneid.)的干燥枝中分离得到10个化合物,经理化性质测定、标准品对照层析及光谱UV,IR,MS,~1H-NMR,^(13)C-NMR分析等方法,分别鉴定为β-香树脂醇乙酸酯(B-Amyrine acetate,1),齐墩果-12-烯-3β,28-二醇(Olean-12-ene-3β,28-diol,2),桦皮酸(Betulinic acid,3),β-谷甾醇(β-Sitosterol,4),胡萝卜甙(Daucosterine,5),伞形花内酯(Umbelliferon,6),桑素(Morusin,7),槲皮素(Quereetin,8),3-甲基瓣皮素(Quercetin-3-methyl ether,9)及丁香脂素-4,4′-O-β-D-二葡萄糖甙(Syringaresinol-4,4′-di-O-β-D-glucopyranoside,10)。其中化合物2,9,10为首次自该属中分离得到。

毛乌素沙地三种植被下苔藓结皮的土壤理化效应

分析了沙蒿、沙柳、樟子松三种植被下有苔藓结皮、无苔藓结皮（对照）样地0-2，2-5，5-10cm剖面土壤的理化指标，探讨毛乌素沙地苔藓结皮对土壤理化性状的影响及其与植被类型的关系。结果表明：（1）三种植被下苔藓结皮均能够明显提高土壤稳定性，增加细砂粒（0．02～0．2mm）含量、降低粗砂粒（0．2～2mm）含量。（2）沙柳及沙蒿植被下苔藓结皮均能够显著提高各层土壤的有机质、全氮、速效钾、全磷含量（P〉0．05），降低全钾、速效磷含量；樟子松下苔藓结皮0-2cm剖面的理化效应同沙柳、沙蒿类似，但2-5，5-10cm剖面内，有机质含量显著降低（P〉0．05），全氮、全钾、全磷、速效磷含量则无显著变化（P〈0．05）。（3）荒漠生态恢复过程中，苔藓结皮对土壤理化性状的改善作用主要集中在表层土壤，改善程度同植被类型的关系密切。

盐胁迫对蒙桑种子萌发及幼苗生长的影响

为研究盐胁迫对蒙桑种子萌发及幼苗生长的影响,共设置0、20、30、50、70、100 mmol·L-1六个NaCl浓度梯度,对蒙桑种子及幼苗进行胁迫处理,测定蒙桑种子的萌发指标和蒙桑幼苗的生理指标,阐述其应对盐胁迫的响应变化特征。结果表明:①随着NaCl浓度的升高,蒙桑种子的萌发率、发芽指数均显著下降;胚根长度、胚芽长度在20 mmol·L-1时受到抑制,胚根生长速度在30 mmol·L-1时受到抑制;在盐胁迫条件下,活力指数与耐盐指数均呈下降趋势,且在NaCl浓度为20 mmol·L-1时,二者均下降至对照的50%左右。②对种子萌发指标、活力指数指标及幼苗生长指标与盐浓度进行相关性和回归分析,发现蒙桑种子发芽率、活力指数、胚根长度、胚根生长速度的耐盐临界值分别为2.55、59.71、2.42、0.67 mmol·L-1。③随着NaCl溶液浓度的增加,蒙桑幼苗丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、可溶性蛋白质(soluble protein,SP)含量、游离脯氨酸(free proline,Pro)含量、相对电导率均显著上升;超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性在50 mmol·L-1 NaCl浓度时显著下降;可溶性糖(soluble sugar,SS)含量呈现震荡上升的趋势。因此,盐胁迫下蒙桑种子萌发和幼苗生长均受到一定程度的抑制,但幼苗可通过调节自身有机渗透物质及提高保护酶活性主动适应逆境,表现出较强抗盐能力。研究结果为蒙桑在盐碱地区的育苗推广提供理论基础,并对培育和保护抗盐植物资源以及盐碱地带植物种群的重建和植被恢复提供科学依据。

川桑中桑皮素的提取工艺优化

目的:探讨川桑中桑皮素的最佳提取工艺。方法:以桑皮素含量为指标,利用4因素3水平L9(34)正交试验,分析乙醇浓度、提取时间、溶媒倍数、提取次数对桑皮素提取效率的影响。HPLC法测定桑皮素含量:YMCPack ODS-A色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm);流动相为甲醇-水(80:20);柱温25℃;流速1.0 mL·min-1;检测波长268 nm。结果:最佳提取工艺:提取前提取溶剂浸泡3 h,回流提取3次,每次提取时间均为0.5 h,提取溶媒倍数均为20倍。最优提取条件下测得川桑中桑皮素含量为1.510 mg·g-1。结论:乙醇浓度、溶媒倍数、提取次数对桑皮素提取效率均有显著影响,提取时间无显著影响。

紫外法测定华桑、鸡桑、桑、蒙桑中芦丁的含量

目的:建立华桑、鸡桑、桑、蒙桑中芦丁的含量测定方法。方法:采用紫外分光光度法,在检测波长510nm处对芦丁含量进行测定。结果:芦丁的含量在0～0.09725mg/ml范围内呈良好的线性关系(r=0.9997),平均回收率为97.35%,RSD为0.63%。结论:所用的方法简便、灵敏、准确、专属性强,重现性好,可作为四种桑药材的含量测定。

基于16SrRNA测序研究蒙桑根际细菌多样性

根际细菌丰富多样,对植物的生长发育有重要影响。为更好的了解野生蒙桑和移植栽培蒙桑根际细菌的多样性组成和差异,本研究提取了两样本的宏基因组DNA,利用Roche 454 GS FLX测序技术对样本菌群的16S r RNA基因的V1~V3区域进行测序。测序结果表明:野生蒙桑根际细菌的主导类群为变形菌门(31.62%)和酸酐菌门(19.8%);栽培蒙桑的主导类群为厚壁菌门(89.07%),两样本的沙浓指数分别为5.8和1.33。栽培蒙桑样本OTU498的基因序列数占总样本的78.9%,其最相近菌属为苏云金芽孢杆菌;野生蒙桑OTU656、OTU556、OTU568和OTU665占总样本的8.17%,最相近菌属是丝状共生菌。进化分析发现两样本菌群具有各自的特异性,大都来源于同一菌门的不同菌属,分别聚类。本研究表明移栽后蒙桑根际细菌的多样性降低,主导类群也发生了变化,基于16S r RNA测序可以揭示根际细菌的组成结构。