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小鼠Dnmt1启动子荧光素酶报告基因的构建及活性分析
被引量:
1
1
作者
张远
杨旬旬
+5 位作者
吴风瑞
刘勇
丁彪
王彩红
黄继昌
李文雍
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第10期109-112,共4页
为研究小鼠Dnmt1基因启动子5'端缺失片段活性,以小鼠基因组DNA为模板,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增4条不同长度的小鼠Dnmt1基因启动子5'端系列缺失片段,双酶切后克隆入pGL3-Basic荧光素酶报告基因载体,构建Dnmt1启动子-pGL3-Ba...
为研究小鼠Dnmt1基因启动子5'端缺失片段活性,以小鼠基因组DNA为模板,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增4条不同长度的小鼠Dnmt1基因启动子5'端系列缺失片段,双酶切后克隆入pGL3-Basic荧光素酶报告基因载体,构建Dnmt1启动子-pGL3-Basic重组质粒。随后经脂质体转染入NIH/3T3细胞并检测各缺失片段荧光素酶活性。结果表明,成功构建Dnmt1启动子5'端系列缺失片段-pGL3-Basic荧光报告基因重组质粒。经双荧光素酶报告基因检测后发现,所有的重组质粒均表现出荧光素酶活性,且最长缺失片段Dnmt1-1-pGL3-Basic活性最强,约为其他的3倍左右。结果初步证明小鼠Dnmt1启动子在-1 866-+57 bp区域具有较强转录活性。
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关键词
小鼠
Dnm
t
1启动子
nih/
3
t
3
细胞系
活性分析
下载PDF
职称材料
题名
小鼠Dnmt1启动子荧光素酶报告基因的构建及活性分析
被引量:
1
1
作者
张远
杨旬旬
吴风瑞
刘勇
丁彪
王彩红
黄继昌
李文雍
机构
安徽农业大学生命科学学院
胚胎发育与生殖调节安徽省重点实验室
阜阳师范学院生命科学学院
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第10期109-112,共4页
基金
国家自然科学基金项目(31071310
31201789)
安徽省教育厅高等学校自然科学研究重点项目(KJ2013A202)
文摘
为研究小鼠Dnmt1基因启动子5'端缺失片段活性,以小鼠基因组DNA为模板,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增4条不同长度的小鼠Dnmt1基因启动子5'端系列缺失片段,双酶切后克隆入pGL3-Basic荧光素酶报告基因载体,构建Dnmt1启动子-pGL3-Basic重组质粒。随后经脂质体转染入NIH/3T3细胞并检测各缺失片段荧光素酶活性。结果表明,成功构建Dnmt1启动子5'端系列缺失片段-pGL3-Basic荧光报告基因重组质粒。经双荧光素酶报告基因检测后发现,所有的重组质粒均表现出荧光素酶活性,且最长缺失片段Dnmt1-1-pGL3-Basic活性最强,约为其他的3倍左右。结果初步证明小鼠Dnmt1启动子在-1 866-+57 bp区域具有较强转录活性。
关键词
小鼠
Dnm
t
1启动子
nih/
3
t
3
细胞系
活性分析
Keywords
mouse
,
dnmtl promoter
,
nih/3t3 cell line
,
activity analysis
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
小鼠Dnmt1启动子荧光素酶报告基因的构建及活性分析
张远
杨旬旬
吴风瑞
刘勇
丁彪
王彩红
黄继昌
李文雍
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
1
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