肝动脉重建在小鼠原位肝移植中的作用研究

目的探索肝动脉重建在小鼠原位肝移植中的作用。方法以"双袖套法"小鼠肝移植为基础,将带腹主动脉的供肝肝动脉与受体腹主动脉行端侧吻合进行肝动脉重建(实验组),并设立非重建组对照(对照组),分别完成小鼠原位肝移植70例,比较术后48h、1周、1月存活率,肝功能及肝组织病理变化,肝细胞再生、凋亡,炎性介质的表达差异。结果实验组术后1月存活率(88.3%)较对照组(73.3%)明显增加(P<0.05),术后1周实验组血清ALT值[(926.8±36.458)U/L]明显高于对照组[(546.8±74.58)U/L](P<0.01),但术后2周、1月实验组血清ALT值[(88.4±8.336)U/L,66.2±20.512)U/L]较对照组[(179.6±7.536)U/L,156.4±16.041)U/L]明显降低(P<0.01),肝组织病理检查对照组见肝细胞片状坏死、小胆管增生,而实验组肝细胞以变性为主,且术后1月肝组织结构恢复正常;术后对照组肝细胞再生明显增加。结论小鼠原位肝移植中肝动脉重建可明显提高受体长期存活率,促进肝功能恢复,保护肝细胞,明显减少胆道并发症,但对受体移植术后炎性反应无明显影响。

小鼠肝移植中两种肝动脉重建方法的比较

目的比较小鼠肝移植中两种不同肝动脉重建方法的效果。方法应用雄性C57BL/6小鼠建立小鼠肝脏移植模型,随机分为肠系膜上动脉重建组(14对)和腹主动脉重建组(16对)。手术采用异氟醚吸入麻醉。供肝经门静脉灌注4℃威斯康星大学保存液(UW液)。两组小鼠的肝动脉重建分别采用供体肠系膜上动脉或供体肾下腹主动脉与受体腹主动脉端侧吻合两种方法。移植肝血流恢复后重建肝动脉。胆管采用内支架管的方法重建。观察术后2周移植物的存活情况和肝动脉通畅与否。用组织病理学方法检查移植肝的组织形态变化,用免疫组织化学法观察肝脏再生功能。结果术中无小鼠死亡,手术成功率为100%。肠系膜上动脉重建组供体肝动脉游离时间为(12.1±2.5)min,腹主动脉重建组为(17.3±3.1)min,比较差异有统计学意义(P<0.05)。腹主动脉重建组肝动脉吻合时间为(14.5±2.9)min,肠系膜上动脉重建组相应为(12.4±3.3)min,比较差异无统计学意义(P>0.05)。肠系膜上动脉重建组移植物术后2周存活率为93%(1只死于吻合口血栓形成),腹主动脉重建组为100%。肠系膜上动脉重建组术后2周肝动脉通畅率为86%,腹主动脉重建组为100%。组织病理学检查示两组的移植肝组织正常,肝脏再生反应不明显。结论小鼠肝移植中,与应用肠系膜上动脉重建比较,应用腹主动脉吻合重建肝动脉的效果更好且安全,建议首选供受体腹主动脉吻合重建小鼠肝动脉的方法。

小鼠肝动脉重建对长时间冷保存移植肝存活率的影响

目的研究小鼠肝动脉重建(hepatic arterial reconstruction,HAR)对长时间冷保存移植肝存活率的影响。方法同系雄性C57BL/6小鼠68只,分为冷保存时间(cold preservation time,CPT)1 h组、CPT4 h组、CPT8 h组、CPT16 h组、CPT16 h+HAR组(供、受体小鼠各一半)。小鼠供肝经门静脉灌注4℃UW液后保存。肝脏移植采用缝合法(肝上下腔静脉)和袖套法(门静脉、肝下下腔静脉)吻合,胆管采用内支架管重建法。小鼠HAR采用含供体肝动脉的腹主动脉与受体腹主动脉端侧吻合的方法。观察术后5组受体小鼠移植肝的存活时间,用组织学检查肝细胞损伤情况,用免疫组织化学法观察肝细胞再生功能。结果 CPT1 h、4 h、8 h组受体术后12 d移植物的存活率分别为7/7、10/10、9/9。CPT16 h组除1例小鼠存活外,其余均在移植术后36 h内死亡,存活率为10%(1/10),CPT16 h+HAR组受体90%(9/10)存活,两组存活率相比,差异有统计学意义(P<0.01)。CPT1 h、4 h组的移植物组织损伤程度轻,CPT8 h组的移植物组织损伤程度较前两组严重,但肝细胞再生活跃。CRT16 h组的移植肝组织表现为广泛肝细胞空泡变性、坏死,肝细胞再生不明显。CPT16 h+HAR组仅有轻度的肝窦淤血,肝细胞空泡变性、坏死改变,肝细胞再生活跃。结论 HAR可提高长时间冷保存移植肝的存活率。