出生后小鼠睾丸不同发育期TIMP-4的表达

金属蛋白酶组织抑制因子-4(TIMP-4)是TIMP家族的最新成员。已有研究表明,TIMP-4mRNA大量表达于成年小鼠的睾丸中。为了证实TIMP-4基因在出生后小鼠睾丸中的表达是否具有发育依赖性,本实验利用RT-PCR、Western blotting和间接免疫荧光染色三种方法,分别检测了TIMP-4mRNA和蛋白在出生后小鼠睾丸不同发育期中的时空表达方式。RT-PCR和Western blotting结果分别显示,TIMP-4mRNA和蛋白均只在成年小鼠睾丸中表达,而在出生后的其它各阶段都不表达;间接免疫荧光染色进一步证实TIMP-4蛋白只定位在成年小鼠睾丸的Leydig细胞中。结果提示,TIMP-4在出生后小鼠睾丸中的表达具有显著的发育依赖性.

小鼠后肾集合管水通道蛋白表达及其上皮细胞超微结构研究

目的观察小鼠后肾集合管水通道蛋白(AQP)-4的表达及其上皮细胞超微结构变化。方法应用透射电镜、免疫组织化学及图像分析技术观察并检测小鼠后肾不同发育阶段集合管的超微结构及AQP-4表达。结果小鼠胚龄18 d见发育早期集合管主细胞,生后7 d～21 d,其形态结构发育基本完善。A型闰细胞于胚胎18 d出现,B型闰细胞生后21天出现。AQP-4于胚龄14 d始见表达,分布于集合管管壁上皮细胞侧基底细胞膜,随胚龄增加表达逐渐增强,生后1 d达高峰。结论集合管管壁上皮细胞于胚胎时出现,但其形态结构在生后才逐渐完善。AQP-4对小鼠胚胎时期肾水平衡调节可能起重要的作用。

c-型钠钛对小鼠胚胎体外发育的影响

为了探讨c-型钠钛(CNP)对小鼠2细胞/4细胞胚胎转变及囊胚腔形成的影响,收集了小鼠原核期胚胎进行体外培养,随后在不同发育时期的培养体系中添加0,100,200μg/L CNP,分别为对照组、1组和2组。当胚胎发育至2-细胞阶段添加CNP,统计4细胞率和囊胚率;当胚胎发育至致密桑葚胚阶段添加CNP,统计囊胚成腔率、囊胚腔扩张率及囊胚孵化率,并测定扩张囊胚直径、囊胚腔面积占比及囊胚细胞数。结果表明:(1)2细胞阶段添加CNP后,与对照组相比,2组的4细胞发育率和囊胚率显著降低(P<0.05);(2)致密桑葚胚阶段添加CNP,与对照组相比,1组的囊胚成腔率、囊胚腔扩张率、囊胚腔直径、囊胚腔面积占比及孵化率无显著变化(P>0.05),但囊胚总细胞数显著降低(P<0.05);(3)致密桑葚胚阶段添加CNP,与对照组相比,2组的囊胚成腔率、囊胚腔扩张率、孵化率、囊胚腔直径、囊胚腔面积占及囊胚总细胞数均显著降低(P<0.05)。说明外源添加CNP抑制了小鼠2细胞/4细胞胚胎的转变、囊胚腔的形成与扩张,并降低了囊胚细胞数。