基于“脾开窍于口”探讨口腔微环境改变与大鼠胃幽门螺杆菌感染的相关性

目的:基于“脾开窍于口”探讨口腔微环境改变与大鼠胃幽门螺杆菌感染之间的相关性。方法:将30只雄性SD大鼠随机分为空白组(10只)、模型组(20只),空白组予以灭菌生理盐水灌胃,模型组予以常规标准幽门螺杆菌(Hp)菌液灌胃+口腔黏膜损伤并留少许菌液于口腔中,隔日1次,共6次。通过快速尿素酶检测法及HE染色法观察Hp定植及造模成功情况,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清、胃黏膜、口腔黏膜中TLR4、NLRP3的表达以及口腔黏膜与胃黏膜组织中Hp水平,采用Person相关性分析口腔黏膜和胃黏膜中TLR4、NLRP3、Hp水平的相关性。结果:胃Hp感染大鼠活动迟缓,反应迟钝,毛发疏松粗糙易脱落,食欲下降,精神不振,大便干稀。HE染色可见模型组大鼠口腔黏膜以及胃黏膜损伤明显;ELISA结果显示,模型组血清及口腔黏膜、胃黏膜中TLR4、NLRP3、Hp表达水平明显高于空白组(P<0.01);口腔黏膜与胃黏膜中TLR4、NLRP3、Hp水平呈正相关(P<0.05)。结论:口腔微环境改变是导致幽门螺杆菌反复感染的一个重要的因素,TLR4、NLRP3在大鼠胃幽门螺杆菌感染时表达上调,且口腔黏膜与胃黏膜中TLR4、NLRP3、Hp水平呈正相关。

硬腭游离黏膜移植在种植体周软组织结构重建中的应用

目的：评估硬腭游离黏膜移植在重建种植体周软组织结构中的应用效果及技术特点。方法：126例缺牙患者在北京大学口腔医院种植中心就诊过程中接受腭部游离黏膜移植，以重建种植体周附着软组织，共植入388颗种植体。修复后均追踪1年以上。结果：126例游离黏膜移植患者，3例术后10天出现黏膜瓣坏死脱落，1例黏膜瓣部分坏死，其余122例顺利成活。术后1年再次测量黏膜瓣面积并与术中黏膜瓣面积比较，其平均收缩率为56％（37％～70％）。371颗种植体周的附着软组织〉3mm。388颗种植体未见松动、脱落。8颗（2．06％）种植体在复诊过程中被诊断为种植体周围炎。结论：腭部游离黏膜瓣移植重建种植体周软组织结构方便可行，近期效果好。

显齿蛇葡萄总黄酮对兔口腔黏膜溃疡的作用

目的研究显齿蛇葡萄总黄酮抗口腔黏膜溃疡的作用。方法分别采用表皮葡萄球菌或10%乙酸注射到新西兰兔颊黏膜,或用同种异体口腔黏膜匀浆上清液作为免疫抗原注射于兔背部皮下,制备3种口腔黏膜溃疡模型。显齿蛇葡萄总黄酮剂量为84,266和840mg.kg-1,西地碘为1mg.kg-1,每天分4次口腔局部涂布给药3～4d。观察溃疡发生情况和溃疡愈合时间,检查溃疡直径和局部炎症指数,检测抗口腔黏膜抗体滴度和局部病理改变。结果显齿蛇葡萄总黄酮能使表皮葡萄球菌性、乙酸性口腔黏膜溃疡模型的溃疡直径明显缩小,炎症指数降低,愈合时间缩短,并随药物剂量增加作用增强;对免疫性口腔黏膜溃疡,可使溃疡发生率明显降低,抗体滴度下降,局部病理变化明显减轻。结论显齿蛇葡萄总黄酮有减轻口腔黏膜溃疡炎症、促进溃疡愈合的作用。

金属硫蛋白-1与p53基因在燃煤型砷中毒患者口腔黏膜脱落细胞中的表达

目的观察金属硫蛋白-1(MT-1)、p53基因、雌激素受体(ERa)基因和甲胎蛋白(AFP)基因在燃煤型砷中毒患者口腔黏膜脱落细胞中的表达。方法收集贵州省兴仁县燃煤型砷中毒患者及非病区正常人口腔黏膜脱落细胞,提取mRNA,以荧光实时定量PCR(RT-PCR)方法检测与肝硬化及皮肤癌相关的MT-1及p53基因等表达。结果燃煤型砷中毒患者口腔黏膜脱落细胞MT-1基因表达与对照组比较明显减少(0.83±0.15、3.86±0.37),抑癌基因p53明显增加(4.35±2.79、0.90±0.58),ERa基因和AFP基因无变化。结论砷中毒患者口腔黏膜MT-1基因表达减少,抑癌基因p53表达增加,可作为燃煤型砷中毒患者皮肤及肝脏病变监测的敏感指标之一,RT-PCR技术可广泛用于砷中毒的防治、监测和科研。

吸烟肺癌患者口腔黏膜细胞全线粒体DNA获得性突变分析 吸烟/口腔黏膜获得性突变与康复预防

目的了解肺癌患者口腔黏膜mtDNA获得性突变情况,探讨肺癌外细胞的线粒体基因突变与肺癌的关系和作为对肺癌预测的生物学指标的可能性。方法利用时相温度梯度凝胶电泳法对12例肺癌患者(吸烟者10例,非吸烟者2例)口腔黏膜细胞及匹配的血液细胞线粒体DNA进行突变筛选,然后进行测序分析。结果在大部分吸烟患者中(8/9),发现口腔黏膜具有两个以上的获得性突变,而在两个非吸烟的患者仅发现1个突变。在11例(11/12,92%)患者中共发现有26个获得性突变,15个突变发生在高变的D环区(58%),11个在mRNA区(42%)。除303～309位点具有长度不稳定外,未见其他微卫星不稳定和5kb的大范围缺失突变。结论吸烟的肺癌患者口腔黏膜细胞线粒体DNA具有高发生频率的获得性突变。

不同吸收促进剂及酶抑制剂对胰岛素体内及体外口腔黏膜渗透性的影响

目的 :研究不同的吸收促进剂及酶抑制剂对胰岛素透过口腔黏膜的影响。方法 :体外实验中 ,在不同吸收促进剂及酶抑制剂作用下 ,测定胰岛素透过仓鼠和家兔口腔黏膜的渗透系数 ;体内实验中 ,在胰岛素口腔喷雾剂中加入不同的吸收促进剂及酶抑制剂 ,考察大鼠经口腔喷入胰岛素后的血糖降低情况。结果 :SDCh ,Brij78,SLS以及lecithin可以显著增加胰岛素透过口腔黏膜的渗透系数 ,而aprotinin ,bacitracin ,1 menthol以及 poloxamer的作用相对较小。胰岛素溶液中加入SDCh ,Brij78,SLS以及lecithin后 ,正常大鼠口腔喷雾给药 ,药理生物利用度都有显著的提高 ,而aprotinin ,bacitracin ,1 menthol以及 poloxamer对血糖的影响较小。结论 :对于考察吸收促进剂及酶抑制剂对胰岛素的促进吸收作用来说 ,体外实验与体内实验结果是一致的 ,可以通过体外实验来粗略地筛选吸收促进剂及酶抑制剂 。

口腔黏膜微核细胞数与上皮异常增生病损癌变的关系

目的:探讨微核细胞计数与上皮异常增生病损(oral epithelial dysplasia,OED)癌变的关系。方法:收集30例健康对照者口腔黏膜、46例口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)病损、78例口腔黏膜白斑(oral leukoplakia,OLK)伴上皮单纯增生病损、30例OLK伴轻度OED病损、29例OLK伴中度OED病损、15例OLK伴重度OED病损和22例口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)病损的口腔脱落细胞进行Feulgen及fast green染色,计数微核细胞数。结果:微核细胞率依OSCC、OLK伴重度OED、OLK伴中度OED、OLK伴轻度OED、OLK上皮单纯增生、OLP、健康对照者口腔黏膜的顺序逐渐降低(P<0.001)。结论:口腔黏膜微核细胞计数可反映口腔上皮癌变的进程,可作为患者定期随访的监测指标。

一氧化氮在结肠黏膜上皮细胞氧化损伤中的作用观察

目的探讨一氧化氮(NO)在结肠黏膜上皮细胞氧化损伤中的作用及褪黑素的影响。方法利用FeSO4+H2O2产生羟自由基损伤结肠黏膜上皮细胞,观察L-精氨酸、L-NAME对模型中NO合成的影响及相应细胞损伤程度的改变,并观察褪黑素对该过程的影响。实验检测指标包括乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、NO和黏液含量。结果模型组大鼠结肠黏膜上皮细胞MDA和LDH水平增高,CAT、GSHPX、SOD和黏液含量减少,NO水平增高与结肠黏膜上皮细胞氧化损伤相关,L-精氨酸和L-NAME通过促进或抑制NO合成,显著加重或减轻这种氧化损伤。褪黑素可逆转羟自由基及NO引起的氧化损伤。结论NO直接参与羟自由基对结肠黏膜上皮细胞的氧化损伤,褪黑素通过直接清除羟自由基和NO及可能形成的过氧化亚硝基阴离子,对大鼠结肠黏膜氧化损伤具有保护作用。

纯中药口腔含漱液对皮肤黏膜的刺激性及杀菌作用

目的:观察纯中药口腔含漱液对皮肤、黏膜的刺激反应及对口腔常见细菌的杀菌效果。方法 :分别用自制纯中药含漱液和生理盐水对14只5个月龄家兔滴左、右眼7 d;并涂抹10只7个月龄豚鼠左、右侧臀部、腹部、背部(涂药前脱毛),左右对照,分别于涂抹后第3、7天各处死5只,制作病理切片。分别将金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、白念菌、铜绿假单胞菌、乙型链球菌制取的菌悬液加入含不同浓度纯中药含漱液或复方硼砂含漱液(朵贝尔液)的营养液中,观察细菌的生长情况。分别将黏性放线菌、消化链球菌、核梭杆菌制取的菌液加入等2倍稀释的复方硼砂溶液和纯中药含漱液中,观察有无细菌生长。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果:家兔右眼结膜与对照组相比,无明显充血、发红等变化;豚鼠右侧臀部、腹部、背部皮肤与对照组相比,无明显红肿、皮炎等变化。纯中药含漱液对上述需氧菌和厌氧菌的杀菌效果均显著高于对照组。结论:纯中药含漱液对皮肤、黏膜无刺激反应,对口腔常见细菌有杀菌效果。

颊粘膜鳞癌手术安全切缘临床及病理学观察

２０例颊粘膜鳞癌患者分为单纯手术组和化疗加手术组。在手术标本上自肿瘤的肉眼边界向手术切缘行放射状取材，作ＨＥ及Ａｇ－ＮＯＲｓ染色。１０例正常颊粘膜作对照。结果提示：癌细胞自癌灶肉眼边界向周围粘膜下组织浸润的宽度可达９．９９ｍｍ，明显大于粘膜浸润的长度；对诱导化疗有效的颊粘膜鳞癌，侵润能力降低；颊鳞癌浸润基底的深度为０．３１～２．３２ｍｍ；正常人颊粘膜与鳞癌组织、癌旁０．５ｃｍ处粘膜上皮的Ａｇ－ＮＯＲｓ颗粒数目及大小有显著差异，而与单纯手术组癌旁１．５ｃｍ、化疗加手术组癌旁１．０ｃｍ处粘膜上皮无明显差异，可考虑作为手术的安全切缘。

口腔冷疗联合大量康复新液含服在异基因造血干细胞移植并发口腔黏膜炎中的效果观察

目的探讨口腔冷疗联合大量康复新液含服在异基因造血干细胞移植并发口腔黏膜炎患者中的应用效果。方法采用回顾性病例资料分析,选取2014年3月至2017年4月在山西医科大学第二医院血液科接受异基因造血干细胞移植的40例患者作为研究对象,分为观察组与对照组,每组20例患者。对照组患者单纯采用口腔冷疗法防治口腔黏膜炎,观察组在此基础上联合大量康复新液含服。结果①对照组与观察组患者口腔黏膜炎发生率分别为100%、90%;②对照组患者口腔黏膜炎持续时间高于观察组(16±5)d与(11+7)d,差异有统计学意义(t=3.76,P<0.05);③对照组患者发生口腔黏膜炎0级0例(0)、Ⅰ级1例(5%)、Ⅱ级5例(25%)、Ⅲ级11例(55%)、Ⅳ级3例(15%);观察组分别为0级2例(10%)、Ⅰ级0例(0)、Ⅱ级10例(50%)、Ⅲ级6例(30%)、Ⅳ级2例(10%),2组比较差异有统计学意义(χ^2=7.91,P<0.05)。结论采用口腔冷疗联合大量康复新液含服能够缩短口腔黏膜炎的持续时间,降低患者口腔黏膜炎严重程度,减少口腔感染机会,减轻患者的痛苦与不适感。

牙刷刷毛黏附口腔黏膜脱落细胞DNA的检验方法

目的探索牙刷刷毛黏附口腔黏膜脱落细胞DNA提取有效方法。方法采用牙刷刷毛拔出法和直接涮洗法收集口腔黏膜脱落细胞,分别用Chelex-100法和DNAIQ试剂盒提取DNA进行PCR扩增及STR分型。结果牙刷刷毛拔下后收集口腔黏膜脱落细胞检测STR9个以上基因座成功率明显高于直接涮洗法,差异具统计学意义(P<0.05)。Chelex-100法和DNAIQ试剂盒提取法之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论牙刷刷毛拔出法较直接涮洗法收集口腔黏膜脱落细胞更有效。

Hp^+消化性溃疡患者胃粘膜上皮细胞凋亡/增殖与Fas/FasL表达的关系

目的探讨幽门螺旋杆菌(Hp)感染对胃粘膜上皮细胞的凋亡/增殖与死亡受体(Fas)和死亡配体(FasL)表达的关系。方法采用原位末端标记(TUNEL)技术和免疫组化,对30例Hp感染的消化性溃疡患者和20例Hp阴性消化性溃疡患者胃粘膜上皮细胞凋亡/增殖情况和Fas/FasL的表达进行了检测和比较。结果 Hp感染的消化性溃疡患者胃粘膜上皮凋亡指数和增殖指数均明显高于Hp阴性消化性溃疡患者(凋亡指数和增殖指数分别为78.9±5.8vs9.0±1.8和46.5±7.7vs7.9±3.5P<0.01)。Fas主要在胃粘膜表面上皮细胞、固有层细胞、幽门腺细胞的表达,FasL主要在固有层细胞浸润的淋巴细胞表达,Hp感染的消化性溃疡患者胃粘膜上皮细胞Fas/FasL表达的阳性率显著高于Hp阴性消化性溃疡患者(分别为67.3±23.8％vs12.6±9.8％和47.3±27.2％vs2.4±1.7％P<0.01)。而且Fas/FasL 的表达与胃粘膜上皮凋亡和增殖呈正相关(0<r<1)。结论 Hp感染能促进胃粘膜上皮细胞和浸润的淋巴细胞Fas/FasL的表达,FasL与Fas结合后诱导胃粘膜上皮细胞凋亡,过度的凋亡代偿性引起增殖的增加。推测Hp感染诱导胃粘膜上皮细胞凋亡和增殖可能是由Fas/FasL途径介导的。

应用激光多普勒血流仪监测口腔黏膜血流

目的：测量中国汉族人与高加索人的健康成年人口腔黏膜血流参数,比较口腔黏膜血流灌注情况在不同人种间的异同,比较口腔黏膜在上颌与下颌、男性与女性之间的差异性,为口腔种植临床中软组织处理提供参考依据。方法：从德国波恩大学在读学生中招募20名高加索人种学生（男性10例,女性10例,平均年龄25.3岁）和20名中国汉族留学生（男性10例,女性10例,平均年龄28岁）,口腔内设计8个测量点M1~M8,其中于上颌中切牙唇侧黏膜、下颌中切牙唇侧黏膜、上颌腭侧黏膜和颊黏膜各2个点。使用O2C激光多普勒血流仪进行血流参数测量,包括血氧饱和度（saturation oxygen,Sp O2）、平均血红蛋白量（relative amount of hemoglobin,r HB）、单位时间内血流量（flow）、血流速度（velocity）。结果：高加索人种和中国汉族两组之间比较,上颌中切牙血氧饱和度平均值分别为75.6%±8.2%和70.4%±7.6%;颊黏膜血红蛋白量平均值分别为79.9±5.8和83.5±6.6,差异有统计学意义,其余各位点血流参数差异无统计学意义。将测量位点各组之间进行比较：上腭黏膜的血氧饱和度为77.1%±10.9%,平均血红蛋白量为67.8±11.1,单位时间血流量194.1±63.7,相比较其他测量部位差异有统计学意义。男性多个测量位点血氧饱和度普遍低于女性,差异均有统计学意义。结论：口腔中不同解剖部位的黏膜血流灌注情况存在差别,性别之间血红蛋白氧结合能力可能存在差别,并且可能对于软组织愈合能力有一定影响;口腔黏膜血流灌注情况在小样本青年人群中的高加索人种与中国汉族人之间差异无统计学意义。

维生素C碳点对口腔鳞状细胞癌KB细胞增殖、自噬和凋亡的影响

目的:研究维生素C碳点对口腔黏膜鳞状细胞癌(口腔鳞癌)KB细胞的杀伤作用,探讨其相关作用机制。方法:以不同浓度(5、10、20、40和80mg·L^(-1))维生素C碳点体外处理口腔鳞癌KB细胞作为实验组,以0mg·L^(-1)维生素C碳点组作为空白对照组。MTT法检测各组细胞增殖率,克隆形成实验检测各组细胞克隆形成能力,Western blotting法检测各组细胞中自噬相关蛋白LC3蛋白表达水平,流式细胞术检测KB细胞的凋亡率。结果:与空白对照组比较,20、40和80mg·L^(-1)维生素C碳点组KB细胞的增殖率及克隆形成能力均明显降低(P<0.01),40mg·L^(-1)维生素C碳点组KB细胞中LC3Ⅱ蛋白表达水平和细胞凋亡率明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论:维生素C碳点能够有效地杀伤口腔鳞癌KB细胞,抑制KB细胞的增殖并减弱其克隆形成能力,其杀伤作用可能与KB细胞自噬和凋亡的发生有关。

放置时间对烟蒂上DNA含量及STR分型的影响

目的探讨不同放置时间对烟蒂上DNA含量及STR分型的影响。方法以10名志愿者的40枚"红双喜"烟蒂为检材(每人4枚),用chelex-100法分别在第1、4、7和10周时提取烟蒂样本外层烟纸和海绵上的DNA,用Quantifiler人类DNA定量试剂盒进行DNA定量,并同时用AmpFL STR Profiler和IdentifilerTM试剂盒(AB公司)进行PCR扩增及STR分型。结果放置第1、4、7和10周的烟蒂烟纸DNA质量浓度范围分别为0.104～2.52、0.110～2.41、0.0960～2.32和0.0850～2.28ng/μL,16个基因座检出率分别为100%、90%、75%和62.5%。海绵DNA质量浓度范围分别为0.0180～2.40、0.0171～2.25、0.0165～2.15和0.0160～2.15ng/μL,16个基因座检出率分别为97.5%、82.5%、50%和12.5%。结论放置时间对烟纸和海绵上的DNA含量影响不大,对STR分型影响显著,STR分型受海绵的影响比烟纸明显。放置时间越久,检出率越低。

兔口腔黏膜上皮细胞与PCL电纺纤维的复合尿道支架的制备及可行性分析

目的探讨兔口腔黏膜上皮细胞与聚己内酯(PCL)电纺纤维的复合支架用于尿道修复的可行性。方法用三氯甲烷和无水甲醇体积比5∶1的混合液配制25%PCL混合液,通过静电纺丝得到PCL纤维管状支架,在其管腔内种植1.5×105个兔口腔黏膜上皮细胞,然后埋入裸鼠皮下,2周后取出,通过HE和细胞角蛋白抗体免疫荧光染色对该复合尿道支架进行生物学评价。未种植兔口腔黏膜上皮细胞的PCL管为对照组,其评价方法同上。结果与对照组比较,种植兔口腔黏膜上皮细胞的PCL管展现出良好的细胞化,并且兔口腔黏膜上皮细胞在PCL管腔表面形成了一层致密的细胞层,兔口腔黏膜上皮细胞能够在PCL管腔表面存活增殖。结论兔口腔黏膜上皮细胞可以作为组织工程化尿道支架的种子细胞来源之一,其与PCL电纺纤维相结合,可以构建适合于尿道修复需要的组织工程替代材料。

ADOPT护理模式联合团体干预在鼻咽癌患者中的应用效果

目的观察ADOPT护理模式联合团体干预在鼻咽癌患者中的应用效果。方法选取120例鼻咽癌放疗患者作为研究对象,随机分为观察组和对照组,每组60例。对照组采用常规护理模式,观察组在此基础上采用ADOPT护理模式联合团体干预,2组护理干预时间均为7周。比较2组患者放射性口腔黏膜损伤发生率、张口困难程度以及癌症患者生活质量测定量表(FACT)评分。结果护理后,2组日常活动、家庭生活、情绪、活动能力评分均高于护理前,且观察组各评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组放射性口腔黏膜损伤程度低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);护理后,2组门齿距均大于护理前,但观察组门齿距大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);护理后,2组张口困难程度均低于护理前,且观察组张口困难程度低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论将ADOPT护理模式联合团体干预应用于鼻咽癌患者中,可降低放射性口腔黏膜损伤程度和张口困难程度,提升患者生活质量。

口腔组织补片修复颊黏膜缺损

临床上多种因素可以引起颊黏膜的缺损，修复的方法多种，如局部邻近转移黏膜瓣、颊脂垫瓣、游离皮肤移植等，但这些方法存在许多不足，随着组织工程学的发展，一种新型的真皮替代物一脱细胞异体真皮基质（组织补片）已经在烧伤和整形领域中皮肤的移植上成功应用。我科应用同种异体脱细胞真皮基质修复因手术造成的颊黏膜缺损21例，取得了较为较好的效果，现报道如下。

120例手足口病患者的脑脊液细胞学观察

目的探讨脑脊液细胞学检查对手足口病并发中枢神经系统感染的诊断价值。方法将脑脊液标本放入离心涂片机涂片后进行瑞氏染色和细胞学计数。结果送检的120例标本中83例有中枢神经系统感染,各个病程有不同的细胞学特点。结论脑脊液细胞学检查对手足口病并发中枢神经系统感染的诊断及治疗有重要价值。