人源转录调控因子MRG15(MORF4related gene on chromosome 15)是在胚胎发育,细胞增殖和衰老过程中具有重要作用的蛋白质.在分子水平上,MRG15的chromo结构域能够与组蛋白H3甲基化的肽段H3K36me3相互作用.为了确定二者的作用位点和方式,...人源转录调控因子MRG15(MORF4related gene on chromosome 15)是在胚胎发育,细胞增殖和衰老过程中具有重要作用的蛋白质.在分子水平上,MRG15的chromo结构域能够与组蛋白H3甲基化的肽段H3K36me3相互作用.为了确定二者的作用位点和方式,利用液体核磁共振的方法对MRG15 chromo结构域和H3K36me3多肽进行了研究.对MRG15chromo结构域进行归属,用化学位移扰动的方法研究了其与H3K36me3肽段的相互作用,确定了相互作用位点的关键氨基酸为H21,Y46,W49和W53,并计算了解离常数约为1mmol/L.研究结果对于阐明MRG15与组蛋白H3的结合和相互作用机制提供了重要的线索.展开更多
Mrg(mas related gene)受体家族是新发现的G蛋白偶联受体家族,特异性分布于感觉传入神经元上。研究发现Mrg受体家族参与了痛觉、免疫等生理病理过程;Mrg受体的内源性配体的寻找和构效关系研究对揭示此受体系统的生理学角色有重要意义;...Mrg(mas related gene)受体家族是新发现的G蛋白偶联受体家族,特异性分布于感觉传入神经元上。研究发现Mrg受体家族参与了痛觉、免疫等生理病理过程;Mrg受体的内源性配体的寻找和构效关系研究对揭示此受体系统的生理学角色有重要意义;同时针对Mrg受体及其配体的药理学研究对于相关疾病的治疗提供了一个新靶点。展开更多
目的克隆人MRG15(MORF4-related-gene on chromosome15)的编码基因,构建荧光表达载体,并检测其在培养人晶状体上皮细胞中的表达,为研究MRG15与年龄相关性白内障(age related cataract,ARC)的相关性奠定基础。方法用RT-PCR的方法从人ARC...目的克隆人MRG15(MORF4-related-gene on chromosome15)的编码基因,构建荧光表达载体,并检测其在培养人晶状体上皮细胞中的表达,为研究MRG15与年龄相关性白内障(age related cataract,ARC)的相关性奠定基础。方法用RT-PCR的方法从人ARC的晶状体前囊膜中扩增MRG15的编码基因,克隆至pMD18-T载体并测序,结果正确后亚克隆至荧光真核表达载体pEGP-N2中,酶切鉴定正确后采用脂质体法,瞬时转染培养人晶状体上皮细胞,荧光显微镜下检测MRG15-pEGP-N2的定位。结果测序证实,从人ARC晶状体前囊膜中扩增出的MRG15编码基因的序列及读框全部正确。重组质粒MRG15-pEGP-N2经酶切后产生与理论预期长度相符的片段。脂质体法转染后24h,观察到其主要在培养人晶状体上皮细胞的细胞核中表达。结论克隆了人MRG15的编码基因,成功构建了荧光真核表达载体MRG15-pEGP-N2,并可在培养人晶状体上皮细胞中表达。展开更多
目的研究细胞周期调控蛋白(MRG15)在哺乳动物细胞中的表达与定位。方法以含人MRG15全长cDNA序列的质粒为模板,PCR扩增,构建MRG15真核表达载体,分别利用Western blot法和免疫荧光法检测其在哺乳动物细胞株中的表达与定位。结果 Western b...目的研究细胞周期调控蛋白(MRG15)在哺乳动物细胞中的表达与定位。方法以含人MRG15全长cDNA序列的质粒为模板,PCR扩增,构建MRG15真核表达载体,分别利用Western blot法和免疫荧光法检测其在哺乳动物细胞株中的表达与定位。结果 Western blot法检测结果表明MRG15在哺乳动物细胞中能有效地表达,免疫荧光法结果显示MRG15主要分布在细胞核。结论 MRG15蛋白主要在细胞核中表达,为进一步了解MRG15的功能奠定了一定基础。展开更多
拟南芥MRG2(Morf Related Genes 2)是MRG蛋白家族成员之一,可以识别组蛋白H3K4和H3K36甲基化修饰,但是对于它是否具有其他生物学功能,目前了解还非常有限.我们首先通过免疫共沉淀结合质谱分析获得了MRG2结合蛋白,并对其中一个染色质重塑...拟南芥MRG2(Morf Related Genes 2)是MRG蛋白家族成员之一,可以识别组蛋白H3K4和H3K36甲基化修饰,但是对于它是否具有其他生物学功能,目前了解还非常有限.我们首先通过免疫共沉淀结合质谱分析获得了MRG2结合蛋白,并对其中一个染色质重塑SWI/SNF复合体亚基BAF60蛋白进行了深入研究.体外Pull-down和双荧光互补实验证实了MRG2和BAF60在植物体内体外都能相互作用.已有研究表明:BAF60抑制异戊烯转移酶IPT(ISOPENTENYL TRANSFERASE)基因转录.RNA-seq和RT-qPCR数据都表明在mrg1mrg2双突变拟南芥植株中多个IPT基因转录水平明显升高.ChIP实验结果证明MRG2蛋白富集于IPT3基因编码区.综上所述,在植物细胞中MRG2和BAF60蛋白相互作用共同调控了IPT3基因的转录.这些研究对于理解MRG2在基因表达调控方面的功能具有重要意义.展开更多
MRG proteins are conserved during evolution in fungi, flies, mammals and plants, and they can exhibit diversified functions. The animal MRGs were found to form various complexes to activate gene expression. Plant MRGI...MRG proteins are conserved during evolution in fungi, flies, mammals and plants, and they can exhibit diversified functions. The animal MRGs were found to form various complexes to activate gene expression. Plant MRGI/2 and MRG702 were reported to be involved in the regulation of flowering time via binding to H3K36me3- marked flowering genes. Herein, we determined the crystal structure of MRG701 chromodomain (MRG701CD). MRG701co forms a novel dimerization fold both in crystal and in solution. Moreover, we found that the dimerization of MRG chromodomains is conserved in green plants. Our findings may provide new insights into the mechanism of MRGs in regulation of gene expression in green plants.展开更多
文摘Mrg(mas related gene)受体家族是新发现的G蛋白偶联受体家族,特异性分布于感觉传入神经元上。研究发现Mrg受体家族参与了痛觉、免疫等生理病理过程;Mrg受体的内源性配体的寻找和构效关系研究对揭示此受体系统的生理学角色有重要意义;同时针对Mrg受体及其配体的药理学研究对于相关疾病的治疗提供了一个新靶点。
文摘目的克隆人MRG15(MORF4-related-gene on chromosome15)的编码基因,构建荧光表达载体,并检测其在培养人晶状体上皮细胞中的表达,为研究MRG15与年龄相关性白内障(age related cataract,ARC)的相关性奠定基础。方法用RT-PCR的方法从人ARC的晶状体前囊膜中扩增MRG15的编码基因,克隆至pMD18-T载体并测序,结果正确后亚克隆至荧光真核表达载体pEGP-N2中,酶切鉴定正确后采用脂质体法,瞬时转染培养人晶状体上皮细胞,荧光显微镜下检测MRG15-pEGP-N2的定位。结果测序证实,从人ARC晶状体前囊膜中扩增出的MRG15编码基因的序列及读框全部正确。重组质粒MRG15-pEGP-N2经酶切后产生与理论预期长度相符的片段。脂质体法转染后24h,观察到其主要在培养人晶状体上皮细胞的细胞核中表达。结论克隆了人MRG15的编码基因,成功构建了荧光真核表达载体MRG15-pEGP-N2,并可在培养人晶状体上皮细胞中表达。
文摘目的研究细胞周期调控蛋白(MRG15)在哺乳动物细胞中的表达与定位。方法以含人MRG15全长cDNA序列的质粒为模板,PCR扩增,构建MRG15真核表达载体,分别利用Western blot法和免疫荧光法检测其在哺乳动物细胞株中的表达与定位。结果 Western blot法检测结果表明MRG15在哺乳动物细胞中能有效地表达,免疫荧光法结果显示MRG15主要分布在细胞核。结论 MRG15蛋白主要在细胞核中表达,为进一步了解MRG15的功能奠定了一定基础。
文摘拟南芥MRG2(Morf Related Genes 2)是MRG蛋白家族成员之一,可以识别组蛋白H3K4和H3K36甲基化修饰,但是对于它是否具有其他生物学功能,目前了解还非常有限.我们首先通过免疫共沉淀结合质谱分析获得了MRG2结合蛋白,并对其中一个染色质重塑SWI/SNF复合体亚基BAF60蛋白进行了深入研究.体外Pull-down和双荧光互补实验证实了MRG2和BAF60在植物体内体外都能相互作用.已有研究表明:BAF60抑制异戊烯转移酶IPT(ISOPENTENYL TRANSFERASE)基因转录.RNA-seq和RT-qPCR数据都表明在mrg1mrg2双突变拟南芥植株中多个IPT基因转录水平明显升高.ChIP实验结果证明MRG2蛋白富集于IPT3基因编码区.综上所述,在植物细胞中MRG2和BAF60蛋白相互作用共同调控了IPT3基因的转录.这些研究对于理解MRG2在基因表达调控方面的功能具有重要意义.
文摘MRG proteins are conserved during evolution in fungi, flies, mammals and plants, and they can exhibit diversified functions. The animal MRGs were found to form various complexes to activate gene expression. Plant MRGI/2 and MRG702 were reported to be involved in the regulation of flowering time via binding to H3K36me3- marked flowering genes. Herein, we determined the crystal structure of MRG701 chromodomain (MRG701CD). MRG701co forms a novel dimerization fold both in crystal and in solution. Moreover, we found that the dimerization of MRG chromodomains is conserved in green plants. Our findings may provide new insights into the mechanism of MRGs in regulation of gene expression in green plants.