不同温度和盐胁迫下紫花苜蓿MsNAC2和MsNAC3基因提高毕赤酵母耐受性分析

NAC蛋白是植物特异性转录因子,具有多种生物学功能,紫花苜蓿是多年生的豆科苜蓿属优质牧草。为了探究紫花苜蓿NAC的抗逆性功能,克隆两个紫花苜蓿转录因子基因MsNAC2和MsNAC3,构建其真核表达载体pPIC9-His-MsNAC2和pPIC9-His-MsNAC3,并转入野生毕赤酵母GS115中。通过营养缺失筛选、PCR、SDS-PAGE和West bolt技术鉴定阳性酵母转化子,最终获得MsNAC2和MsNAC3的转基因酵母菌,分别命名为A2和A3。对A2、A3和对照株系(CK)进行37℃、16℃温度胁迫和100mmol·L^(-1)、200mmol·L^(-1)盐胁迫。试验结果表明:在不同温度和盐胁迫处理下,转基因酵母A2、A3的生命力和成活率明显高于CK,A2、A3在非生物胁迫下表现出更好的耐受性。说明MsNAC2和MsNAC3极有可能是优良的抗逆基因,为进一步通过基因工程手段应用于植物抗逆转基因育种提供了理论依据和研究基础。