白藜芦醇通过Mst1/Sirt3信号通路介导的细胞自噬改善糖尿病心肌损伤的机制研究

目的:观察白藜芦醇(Resveratrol)对2型糖尿病模型小鼠心肌细胞损伤及其对Mst1/Sirt3信号通路介导的细胞自噬的影响。方法:C57BL/KSJ db/db小鼠随机分为小鼠模型组、Resveratrol组及西药组,C57BL/KSJ db/m为空白对照组,每组10只。Resveratrol组和西药组分别给予白藜芦醇和二甲双胍灌胃治疗,空白组和模型组给予等体积的生理盐水灌胃治疗,连续8周。分别采用H&E染色、透射电镜和免疫荧光法观察心肌组织病理形态、超微结构和细胞凋亡水平,RT-qPCR法检测心肌组织凋亡基因Bax和Bcl-2的表达水平,Western-blot法检测心肌组织中自噬蛋白(LC3和p62)、Mst1和Sirt3蛋白的表达水平。结果:与模型组相比,Resveratrol能够显著降低db/db小鼠体重、血糖和血清CK和LDH的水平,差异均具有统计学意义(P<0.05;P<0.01)。同时,Resveratrol治疗后心肌炎症评分、凋亡率及心肌组织中Bax mRNA的表达水平及Bax/Bcl-2的比值显著降低,Bcl-2 mRNA的表达水平显著增加,差异均有统计学意义(P<0.01)。此外,与模型组相比,Resveratrol组心肌组织中p62和p-Mst1蛋白的表达水平显著降低,Sirt3蛋白的表达水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值水平显著增加,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:Resveratrol通过激活Mst1/Sirt3信号通路促进心肌细胞自噬水平,抑制心肌细胞凋亡对糖尿病心肌病发挥保护作用。

基于Mst1通路探讨通络熄风汤治疗糖尿病心肌损伤的机制研究

目的 明确通络熄风汤改善糖尿病心肌损伤大鼠的治疗效果及机制。方法 本实验将大鼠分为正常组、模型组以及治疗组,利用STZ注射法将大鼠统一构建为糖尿病模型。治疗组予以中药配方颗粒通络熄风汤悬浮液灌胃治疗。采用Western blotting方法检测心肌细胞中P62、Mst1、Sirt3蛋白的含量,运用HE染色观察大鼠心肌组织结构变化,以评价通络熄风汤对糖尿病心肌损伤改善效果及机制。结果 与模型组相比,治疗组显著改善糖尿病大鼠的体重及血糖指标,差异有统计学意义(P<0.01)。同时与模型组相比,通络熄风汤治疗后大鼠心肌细胞的排列情况与坏死状态均有明显改善。与模型组相比,治疗组大鼠心肌组织中的Mst1、P62蛋白含量明显减少,Sirt3蛋白含量明显提高,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论 通络熄风汤可以对心肌组织细胞自噬水平进行调整,并保护心脏功能,上述机制通过Mst1通路发挥作用。