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MT启动子控制的GFP基因在CHO细胞中的诱导表达
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作者 孙丽翠 祁雅慧 仲峰 《首都医科大学学报》 CAS 2003年第2期118-120,共3页
用羊金属硫蛋白(MT)启动子构建含绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的真核表达载体,经脂质体介导在培养的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中进行诱导性表达。结果:构建的GFP基因表达载体能在CHO细胞中进行表达,用硫酸锌诱导可提高GFP的表达量。
关键词 mt启动子 GFP基因 cho细胞 诱导表达 基因表达 基因转移
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Galsang Cering Climbs Cho Oyu
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作者 XUE WENXIAN 《China's Tibet》 2004年第1期13-14,共2页
关键词 Galsang Cering 登山运动员 生平 cho oyu
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小鼠金属硫蛋白基因-I在CHO细胞中稳定表达及其在医疗方面的应用
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作者 殷慎敏 李令媛 茹炳根 《北京大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 1996年第4期481-487,共7页
将小鼠的MT-Ⅰ基因插入pSV2-dhfr质粒的EcoRI位点,构建了具有SV40和MT双启动子并正向插入MT-Ⅰ基因的表达载体。用改良的磷酸钙/DNA沉淀法将表达载体导入CHO-dhfr-细胞内,用不含次黄嘌呤(H... 将小鼠的MT-Ⅰ基因插入pSV2-dhfr质粒的EcoRI位点,构建了具有SV40和MT双启动子并正向插入MT-Ⅰ基因的表达载体。用改良的磷酸钙/DNA沉淀法将表达载体导入CHO-dhfr-细胞内,用不含次黄嘌呤(H)和胸腺嘧啶(T)的选择培养基筛选出稳定表达MT阳性克隆D-22,经检测106细胞的MT表达量约为1.8μg,D-22细胞对Cd2+浓度抗性较之CHO-dhfr-细胞高14倍。为了研究金属硫蛋白对正常细胞所具有的保护作用,将不同浓度的顺铂分别处理无MT表达的CHO-dhfr-细胞和有MT表达的D-22细胞。实验发现顺铂对D-22细胞和CHO-dhfr-细胞50%生长抑制浓度(IC50)分别是0.145μmol/L和0.04μmol/L。上述研究表明MT对正常细胞有一定的保护作用,因而通过诱导正常细胞提高MT的表达量,同时使用MT阻断剂阻断肿瘤组织的MT合成。 展开更多
关键词 金属硫蛋白 细胞转染 基因表达 cho细胞 医疗
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组织型纤溶酶原激活剂cDNA表达质粒的构建及其在CHO细胞中的表达
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作者 张瑜虹 黄培堂 +1 位作者 徐秀英 李丰生 《生物技术通讯》 CAS 1996年第2期60-65,共6页
人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)cDNA克隆片段。采用两种方式构建成真核表达质粒。第一:切除t-PA3'端非编码区序列后插入SR启动子和SV<sub>40</sub>晚期Poly(A)终止信号之间,形成pMGZ6001质粒;第二:将3'端部分切除并带... 人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)cDNA克隆片段。采用两种方式构建成真核表达质粒。第一:切除t-PA3'端非编码区序列后插入SR启动子和SV<sub>40</sub>晚期Poly(A)终止信号之间,形成pMGZ6001质粒;第二:将3'端部分切除并带有Poly(A)加尾信号的t-PA片段插入由金属硫蛋白MT启动子调控的载体中,分别组建成含大T抗原与不含大T抗原的两个表达质粒pMGZ6002和pMGZ6003。这三种质粒用磷酸钙共沉淀法和电穿孔法转染CHO-dhfr细胞,阳性克隆细胞均能合成并分泌rt-PA。其分子量约68kD,并能与t-PA单克隆抗体特异结合,溶解纤维蛋白。阳性克隆经MTX选择培养扩增基因,培液中rt-PA表达水平可达3000IU/(10<sup>6</sup>细胞·48h)。 展开更多
关键词 组织型纤溶酶原激活剂cDNA SR启动子 mt启动子 大T抗原 中国仓鼠卵巢细胞
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不同类型冰川雪中可培养细菌多样性变化及其与环境因子关系研究 被引量:10
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作者 马晓军 刘炜 +2 位作者 侯书贵 陈拓 秦大河 《冰川冻土》 CSCD 北大核心 2009年第3期483-489,共7页
通过荧光显微计数和恢复培养,分析了东天山和卓奥友峰冰川区雪的细菌数量及可培养细菌多样性.结果表明:不同地点不同深度雪中微生物数量都与可溶性离子Ca2+、Mg2+和NO3-等的浓度显著相关,两种不同类型冰川雪坑中可培养细菌多样性存在明... 通过荧光显微计数和恢复培养,分析了东天山和卓奥友峰冰川区雪的细菌数量及可培养细菌多样性.结果表明:不同地点不同深度雪中微生物数量都与可溶性离子Ca2+、Mg2+和NO3-等的浓度显著相关,两种不同类型冰川雪坑中可培养细菌多样性存在明显差异.从卓奥友样品中培养得到高G+C(67%)、低G+C(22%)、α-Proteobacteria(4%)、β-Proteobacteria(4%)、γ-Proteobacteria(1%)和Cytophaga-Flavobacterium-Bacteroides(CFB)(2%)6种不同类群细菌,但从东天山雪样中仅分离得到β-Proteobacteria(48.5%)、α-Proteobacteria(25.5%)、低G+C(25%)和高G+C(1%)4种不同类群细菌.冰雪微生物的数量及种类与环境密切相关. 展开更多
关键词 卓奥友峰 东天山 雪中细菌 可培养细菌 主要离子
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裂变径迹热年代学对西藏卓奥友峰藏南拆离系活动时间的约束 被引量:7
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作者 高成 刘娇 +2 位作者 李德威 汪帆 刘德民 《地学前缘》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第6期372-380,共9页
引入裂变径迹方法研究藏南拆离系(STDS)的活动历史。通过青藏高原喜马拉雅卓奥友峰5个锆石和4个磷灰石样品的裂变径迹实验,分别获得11.2-17.1Ma和12.4-14.3Ma的年龄范围。年龄温度法计算得到中新世时期洛子峰拆离断层在卓奥友峰地区... 引入裂变径迹方法研究藏南拆离系(STDS)的活动历史。通过青藏高原喜马拉雅卓奥友峰5个锆石和4个磷灰石样品的裂变径迹实验,分别获得11.2-17.1Ma和12.4-14.3Ma的年龄范围。年龄温度法计算得到中新世时期洛子峰拆离断层在卓奥友峰地区剥蚀作用逐渐增强的结论:(1)17.1-15.2Ma地壳冷却速率较慢,约为37.8℃/Ma;(2)15.2-13.5Ma地壳冷却速率为82.4℃/Ma,并且在14.3Ma左右构造活动最强烈,达到峰值;(3)13.5-12.4Ma地壳冷却速率可达100℃/Ma。 展开更多
关键词 淡色花岗岩 裂变径迹测年(FT) 藏南拆离系(STDS) 卓奥友峰 青藏高原
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卓奥友峰藏南拆离系的活动历史:来自淡色花岗岩年代学的制约 被引量:3
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作者 杨雷 高成 +4 位作者 刘小驰 王佳敏 周梁杰 刘志超 吴福元 《岩石学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2022年第9期2709-2722,I0001-I0004,共18页
作为喜马拉雅造山过程中的重要产物,藏南拆离系的发展和喜马拉雅山脉的隆升紧密相关。因此,对藏南拆离系的研究可以帮助我们理解喜马拉雅造山带的演化过程和历史。虽然学术界对于藏南拆离系进行了大量的研究,但关于其形成机制仍然存在... 作为喜马拉雅造山过程中的重要产物,藏南拆离系的发展和喜马拉雅山脉的隆升紧密相关。因此,对藏南拆离系的研究可以帮助我们理解喜马拉雅造山带的演化过程和历史。虽然学术界对于藏南拆离系进行了大量的研究,但关于其形成机制仍然存在争议。本次研究选择藏南中部卓奥友峰地区进行研究,对侵入藏南拆离系下部的淡色花岗岩进行独居石和锆石U-(Th)-Pb定年。结果表明,该区域淡色花岗岩的活动时代为18~17Ma。前人分析得到这些淡色花岗岩的锆石和磷灰石裂变径迹年龄分别为~15Ma和~13Ma。结合前人热年代学工作,本文研究表明卓奥友峰淡色花岗岩在很短的时间间隔内(~4Myr)从~700℃冷却到~120℃,平均冷却速度超过100℃/Myr。在13Ma以后,淡色花岗岩经历了较为缓慢的冷却过程(~10℃/Myr)。这些研究结果可能指示了卓奥友峰地区藏南拆离系在17Ma或之前已经开始,一直持续到13Ma左右。结合高喜马拉雅变质作用和淡色花岗岩研究,本文认为藏南拆离系的启动和发展可能主要受到高喜马拉雅结晶岩系在峰期变质作用的影响。 展开更多
关键词 藏南拆离系 卓奥友峰 淡色花岗岩 喜马拉雅 年代学
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Phylogenetic identification and microbial diversity in snow of the summit (8201m) of Cho Oyu Mountain,Tibet 被引量:3
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作者 TONG XiaoMei CHEN Fang +7 位作者 YU Jun HUA Sang ASAN Ciren LUOSANG JiangBai WANG Wei YU Liang ZHENG XiaoGuang WANG Jian 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2008年第21期3317-3323,共7页
The bacterial diversity and abundance in snow of the summit(8201 m) of Cho Oyu mountain,Tibet,were analyzed by 16S rRNA gene sequencing followed by scanning electronic microscopy analysis.Most of bacteria were found t... The bacterial diversity and abundance in snow of the summit(8201 m) of Cho Oyu mountain,Tibet,were analyzed by 16S rRNA gene sequencing followed by scanning electronic microscopy analysis.Most of bacteria were found to be of spherical or oval shape(>95%).Bacterial 16S rDNA sequences were classified into 5 genera(Caulobacter,Ralstonia,Cupriavidus,Pelomonas and Pseudomonas).Gammaproteobacteria were the most abundant(91.25%) among the library that consists of 594 clones.The sequences found in this study are highly similar to those previously retrieved from other cold en-vironments,such as ice core,sea ice,permafrost and snow.The results showed that the cold and barren environments strongly influence the survival of bacteria.The high similarity among sequences retrieved from snow sample and other places,such as ocean,soil and water,suggested that the bacteria in snow,soil and water environments have the same origin. 展开更多
关键词 雪化干扰 16S RRNA 基因表达 微生物
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喜马拉雅山脉中段土地覆被的垂直分异特征 被引量:2
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作者 张镱锂 吴雪 郑度 《Journal of Geographical Sciences》 SCIE CSCD 2020年第6期969-987,共19页
Characterized by obvious altitudinal variation,habitat complexity,and diversity in land cover,the Mt.Qomolangma region within the central Himalayas is one of the most sensitive areas to climate change in the world.At ... Characterized by obvious altitudinal variation,habitat complexity,and diversity in land cover,the Mt.Qomolangma region within the central Himalayas is one of the most sensitive areas to climate change in the world.At the same time,because the Mt.Qomolangma region possesses the most complete natural vertical spectrum in the world,it is also an ideal place to study the vertical structure of alpine land cover.In this study,land cover data for 2010 along with digital elevation model data were used to define three methods for dividing the northern and southern slopes in the Mt.Qomolangma region,i.e.,the ridgeline method,the sample transect method,and the sector method.The altitudinal distributions of different land cover types were then investigated for both the northern and southern slopes of the Mt.Qomolangma region by using the above three division methods along with ArcGIS and MATLAB tools.The results indicate that the land cover in the study region was characterized by obviously vertical zonation with the south-six and north-four pattern of vertical spectrum that reflected both the natural vertical structure of vegetation and the effects of human activities.From low to high elevation,the main land cover types were forests,grasslands,sparse vegetation,bare land,and glacler/snow cover.The compositions and distributions of land cover types differed significantly between the northern and southern slopes;the southern slope exhibited more complex land cover distributions with wider elevation ranges than the northern slope.The area proportion of each land cover type also varied with elevation.Accordingly,the vertical distribution patterns of different land cover types on the southern and northern slopes could be divided into four categories,with glaciers/snow cover,sparse vegetation,and grasslands conforming to unimodal distributions.The distribution of bare land followed a unimodal pattern on the southern slope but a bimodal pattern on the northern slope.Finally,the use of different slope division methods produced similar vertical belt structures on the southern slope but different ones on the northern slope.Among the three division methods,the sector method was better to reflect the natural distribution pattern of land cover. 展开更多
关键词 land cover altitudinal zonation central Himalayas mt.Qomolangma mt.Makalu mt.cho oyu
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