结核分枝杆菌特异性CD4^＋α／βT细胞受体四聚体筛选细胞系的构建及检测

目的构建及应用结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis，Mtb）特异性CD4^＋α／βT细胞受体（TCR）四聚体筛选细胞系。方法从Mtb多肽阳性反应结核患者中，PCR扩增HLA-DRβ链，构建HLA—DRα链和加载有结核抗原肽的HLA—DR仅链全长基因的表达载体pMT—HLA—DRB及pMT-HLA—DRA—P，磷酸钙转染法转入果蝇S2（Schneider2）细胞中进行表达配对，细胞免疫组化法初步鉴定表达情况，并应用所建立细胞系以流式细胞术筛选Mtb特异性CD4^＋α／βTCR四聚体。结果细胞免疫组化法及流式细胞术鉴定显示获得细胞膜上表达结核抗原肽／HLA—DR复合物的稳定S2细胞株，并筛选出2种Mtb特异性CD4^＋α／βTCR四聚体。结论成功构建Mtb特异性CD4^＋α／βTCR四聚体筛选细胞系，为分析鉴定Mtb特异反应性TCR四聚体，探索开发结核诊断新方法及新型结核疫苗的研制提供了工具。