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小鼠IFN-γ基因的克隆及其分子佐剂作用的研究 被引量:1
1
作者 刘勇 王海燕 +2 位作者 张甲 王雨舟 张冰 《实验动物与比较医学》 CAS 2008年第6期367-371,共5页
目的通过融合表达小鼠IFN-γ(MuIFN-γ)与猪脑心肌炎病毒(EMCV)结构蛋白VP1研究MuIFN-γ的分子佐剂作用。方法通过RT-PCR克隆IFN-γ的成熟肽基因,从pGEX-6p-1/vp1中亚克隆猪脑心肌炎病毒(EMCV)抗原基因VP1,分别构建原核表达菌株pET32-a/... 目的通过融合表达小鼠IFN-γ(MuIFN-γ)与猪脑心肌炎病毒(EMCV)结构蛋白VP1研究MuIFN-γ的分子佐剂作用。方法通过RT-PCR克隆IFN-γ的成熟肽基因,从pGEX-6p-1/vp1中亚克隆猪脑心肌炎病毒(EMCV)抗原基因VP1,分别构建原核表达菌株pET32-a/VP1/Rosetta(DE3)和pET32-a/VP1/MuIFN-γ,将VP1及VP1与MuIFN-γ在宿主菌Rosetta(DE3)中进行表达与共表达。将表达的VP1及MuIFN-γ/VP1蛋白分别免疫BALB/c小鼠,每次免疫2周后采血,分离血清,利用ELISA测定抗体效价。结果表达的VP1蛋白分子量为60kD,共表达蛋白MuIFN-γ/VP1分子量为73kD,VP1及MuIFN-γ/VP1蛋白免疫小鼠测定的抗体效价分别为1:32000和1:128000。结论表达的VP1蛋白具有良好的免疫原性,可刺激免疫小鼠产生明显的体液免疫反应。MuIFN-γ/VP1免疫小鼠后产生的佐剂效果要强于弗氏佐剂。MuIFN-γ/VP1蛋白能增强小鼠的体液免疫水平,MuIFN-γ具有一定的分子佐剂效应。 展开更多
关键词 muifn—γ EMCV VP1 原核表达 免疫佐剂
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