基于实时荧光定量监测逆转录病毒MuLV/Friend感染方法的建立与评价

目的建立基于实时荧光定量PCR的病毒复制检测方法,监测MuLV/Friend急性感染小鼠病毒复制动力学。方法提取MuLV/Friend病毒基因组RNA,逆转录为cDNA,扩增病毒gag片段,连接入PMD-19T载体,构建标准品,并合成特异性荧光探针,建立病毒复制定量的标准曲线;BALB/c小鼠腹腔接种MuLV/Friend病毒,在急性感染不同时期,实时监测小鼠组织内病毒复制动力学。结果 成功构建基于实时荧光定量PCR的MuLV/Friend复制检测方法,可分析小鼠各组织内病毒复制动力学,为利用MuLV/Friend小鼠感染模型研究抗病毒策略或宿主免疫等,提供了一种有效、快速、灵敏的实时监测病毒复制的手段。结论该实时荧光定量PCR的病毒复制检测方法具有较高的灵敏度,改善了之前利用脾肿大指数检测病毒体内复制的传统方法。

Fr. MuLV小鼠红白血病模型的建立及叠氮胸苷抗病毒作用的研究

目的应用Friend鼠白血病病毒(Friend murine leuke-mia virus,Fr. MuLV)建立小鼠红白血病模型,并在此模型上观察抗逆转录病毒药物叠氮胸苷(Zidovudine,AZT)的治疗作用。方法用Fr.MuLV感染BALB/c小鼠。以RT-PCR法测定脾脏病毒载量;血常规分析白细胞(WBC)、血红蛋白(Hbg)及血小板(PLT)变化;镜检计数外周血及骨髓有核细胞。结果与正常对照组相比,模型组小鼠脾脏病毒载量、WBC和Hbg明显升高;外周血及骨髓中红系和非红系均出现大量原始和幼稚细胞,骨髓中非红系原始细胞(NEC)计数≥0.30,有核红细胞≥0.50;AZT治疗组上述指标明显改善。结论用Fr.MuLV感染BALB/c小鼠成功建立小鼠红白血病模型,AZT在此模型上显示出良好的抗病毒作用。

Friend鼠白血病病毒对BALB/c小鼠和KM小鼠的影响

目的:探讨Friend鼠白血病病毒(FLV)对BALB/c和KM小鼠体质量、胸腺和脾脏的影响。方法:以齐多夫定片(AZT)作为阳性药物,用FLV攻击BALB/c和KM小鼠,观察各鼠系的体质量、胸腺和脾脏变化情况。结果:FLV能引起BALB/c和KM小鼠脾肿大,各鼠系脾指数与正常鼠脾指数差异有统计学意义(P<0.01)。AZT对BALB/c和KM小鼠具有明显的抑制脾肿大作用(P<0.05)。各鼠系小鼠的体质量和胸腺变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论:FLV对KM小鼠体质量、胸腺和脾脏的影响程度相当于BALB/c小鼠。

水芹总酚酸对Fr.MuLV感染小鼠的抗病毒作用

目的观察水芹总酚酸对Friend鼠白血病病毒(Fr. MuLV)感染小鼠模型的作用。方法 Fr. MuLV病毒感染BALB/c小鼠造模,水芹总酚酸125、250、500mg·kg-1灌胃给药,每天1次,连续28d。末次给药后眼球取血,取脏器。计算小鼠脾指数和胸腺指数,ELISA试剂盒检测外周血CD_4^+、CD_8^+分子含量,RT-PCR方法检测脾脏病毒载量。结果水芹总酚酸250、500mg·kg-1组CD_4^+分子含量及CD_4^+/CD_8^+值明显提高,小鼠脾内Fr. MuLV降低,抑制率分别为46.95%和71.80%(P <0.05)。结论水芹总酚酸可改善小鼠的免疫抑制,降低脾内病毒载量。

复方火炭星胶囊抗鼠白血病病毒作用实验研究

目的观察复方火炭星胶囊体内抗鼠白血病病毒作用。方法BALB/C小鼠60只,随机分成正常组、模型组、复方火炭星胶囊大、中、小剂量组(剂量分别为1000/500/100mg·kg-1·d-1),叠氮脱氧胸苷(AZT)组(剂量为150mg·kg-1·d-1);除正常组外,其他组小鼠均腹腔接种Friend型鼠白血病病毒(FLV),复制小鼠艾滋病模型;病毒攻击后4h,各组均按设计剂量给药,连续给药21d,剖杀小鼠,观察火炭星对模型小鼠的脾指数(质量比)及脾指数抑制率、外周血白细胞、红细胞和淋巴细胞计数的影响。结果复方火炭星胶囊高剂量组能抑制模型小鼠的睥肿大(P<0.05),改善病毒引起的外周血白细胞、红细胞异常升高和淋巴细胞异常降低等血象指标变化(P<0.05或P<0.01),与模型组比较差异均具有显著性意义。结论复方火炭星胶囊对小鼠体内感染鼠白血病病毒具有显著抑制作用。

Ｆｒｉｅｎｄ病毒诱发小鼠红白血病生物学特性的进一步研究

本文报道了F-MuLV诱发小鼠红白血病生物学特性的进一步研究结果。发现中国昆明小鼠和615小鼠对F-MuLV有明显抵抗。脾脏的原红细胞是该病毒的靶细胞,但切脾后仍可发病,这时骨髓成为该病毒的靶器官。因而提出,在正常动物中F-MuLV对脾红系细胞比骨髓更具有亲和性。

Fv-4基因杂合子小鼠对Fr.MuLV感染的敏感性差异的分析

目的 :探讨新生和成年的Fv 4基因杂合子小鼠 (BALB/C小鼠×G小鼠 )对Friend小鼠白血病病毒 (Fr.MuLV)感染的敏感性差异及其与小鼠淋巴细胞表面Fv 4基因产物的表达量的关系。方法 :经腹腔接种Fr.MuLV分别感染新生和成年的杂合子小鼠 ,观察小鼠对Fr.MuLV感染的敏感性差异 ;并用间接免疫荧光标记 FACS测定法 ,分别对小鼠脾脏淋巴细胞表面的Fv 4基因产物进行定量检测与分析。结果 :接种病毒后 ,新生杂合子小鼠可被病毒感染并出现脾脏肿大等症状 ,而成年杂合子小鼠则不发病 ;但是 ,在新生和成年的杂合子小鼠脾脏淋巴细胞表面均可以检测出Fv 4基因产物 ,其表达量基本相同。结论 :新生和成年的Fv 4基因杂合子小鼠对Friend小鼠白血病病毒感染的敏感性不同 ,但该敏感性差异与小鼠细胞表面Fv 4基因产物的表达量无关。提示Fv 4基因杂合子的抗Fr.MuLV感染可能还有其他机制或因素的参与。

灵芝孢子油体内抗Friend鼠白血病病毒的实验研究

目的探讨灵芝孢子油体内抗Friend鼠白血病病毒(Friend murine leukemia virus,Fr.MuLV)感染的疗效和作用机制。方法用Fr.MuLV感染BALB/C雌性小鼠,造模小鼠ig给药21d,比较各组动物的体质量、脾指数、胸腺指数,CD4+、CD8+、CD4+/CD8+等指标变化情况。结果小鼠感染Fr.MuLV后体质量严重减轻,脾明显肿大,胸腺萎缩,CD4+、CD8+、CD4+/CD8+值均显著降低。灵芝孢子油50、100、200mg/kg剂量均可显著改善体质量增长抑制、脾肿大及胸腺萎缩(P<0.01),100、200mg/kg剂量组CD4+、CD8+、CD4+/CD8+值均有明显升高(P<0.01、0.05)。结论灵芝孢子油对Fr.MuLV感染小鼠有保护作用,能够改善体质量增长抑制,抑制脾肿大及胸腺萎缩,升高感染小鼠的T淋巴细胞。

白藜芦醇在联合治疗鼠艾滋病中可能的增效作用研究

白藜芦醇(resveratrol,Res.)是一种潜在的抗HIV药物,在体外与AZT、3Tc、ddI等核苷类抗病毒药物联用时表现出很强的协同增强作用。在本篇论文中我们在Friend-MuLV病毒感染的BALB/c鼠艾滋病模型(MAIDS)上研究了用白藜芦醇、AZT、3Tc不同组方及白藜芦醇单独使用治疗后的抗逆转录病毒作用,分析白藜芦醇在联合治疗中可能的潜在协同增强作用。72只BALB/c小鼠随机分成9组(每组8只):正常对照组(未感染和未治疗),病毒对照组(感染但未治疗)和7个其他药物治疗组(感染病毒后并用白藜芦醇、AZT、3Tc不同组方治疗)。药物通过口服给药方式在病毒感染4 h后给药,每天一次,每周7 d,持续3周。感染后3周,所有实验组处死,对表现疾病病理特征的一些指标进行检测评价。结果表明:在体内鼠艾滋病模型上,单独运用白藜芦醇仅仅只有部分能够减少疾病的进展,未表现出所预期的显著的抗逆转录病毒作用(只有20.78%的脾肿抑制率)。白藜芦醇和AZT3、Tc的联合用药有较好的抗病毒效果(减少白细胞数83.34%,脾肿抑制率91.79%,升高CD4+/CD8+比值等)。然而,这些结果与AZT和3Tc联合给药的结果是重叠的,AZT和3Tc联合给药有类似的结果(脾肿抑制率87.65%和白细胞数减少82.25%),排除了AZT3、Tc和白藜芦醇可能的协同增效作用。因此在MAIDS模型中白藜芦醇和AZT3、Tc之间没有协同作用,AZT、3Tc并不会因为和白藜芦醇的联用而提高抗病毒效果。

薯蓣丸对Friend白血病病毒感染小鼠免疫功能的影响

目的:探讨薯蓣丸对Friend病毒模型小鼠免疫功能的影响。方法:Friend病毒攻击小鼠,同时施用不同剂量的薯蓣丸进行干预,连续用药3周。取血,处死动物,称取脾脏,酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血浆中白细胞介素-2(IL-2),γ-干扰素(IFN-γ),IL-6含量;流式细胞术检测CD4+T,CD8+T细胞百分率。另外,复制环磷酰胺小鼠模型,连续用药5 d。观察薯蓣丸对小鼠血液中红细胞数量、白细胞数量、血红蛋白含量的影响。结果:与Friend模型组比较,给药后动物的体重、脾脏质量、脾指数及IL-2,IFN-γ,IL-6含量和CD4+T,CD8+T细胞百分率均没有显著性差异。与环磷酰胺模型组比较,薯蓣丸能够增加血液中红细胞数量、白细胞数量、血红蛋白含量(P<0.05)。结论:薯蓣丸对Friend病毒感染小鼠的免疫功能没有明显的影响。薯蓣丸的刺激红细胞、白细胞生成作用对HIV感染患者有益但促进Friend病毒感染小鼠的病理进程。提示,具有红细胞、白细胞生成作用的中药复方抗HIV的研究,不适宜选择Friend病毒感染模型。

Fli-1在肿瘤发生及发展中的作用

Friend白血病病毒插入位点1(Fli-1)是属于E26转化特异性因子(ETS)家族的转录因子,在造血干细胞、血管内皮细胞、淋巴细胞和恶性肿瘤细胞中表达,在血管内皮细胞生成和肿瘤细胞增殖过程中具有重要调节作用。血管内皮细胞不仅是正常血管生成的关键因素,而且在肿瘤的生长和转移中均需要新生血管的形成作为肿瘤进展的驱动因素。以Fli-1为治疗靶点,既可抑制肿瘤细胞的增殖,又可阻断肿瘤血管的形成,将成为治疗肿瘤的优秀靶点。因此,详细研究Fli-1结构与功能及其在恶性肿瘤中的表达情况,有助于进一步明确Fli-1在恶性肿瘤发生及发展中的作用。本文作者就Fli-1与肿瘤关系的研究进行综述。

高中二册(上)Units 6—7教材语句研习

1.What happened to the people on the earth?地球上的人出什么事了?[词汇研习]happen用法归纳:1)happen to sb./sth.意为"某人/物出事或发生了……情况"。如:

艾可康胶囊对白血病小鼠免疫功能的影响

目的:观察艾可康胶囊对Friend型白血病鼠的治疗作用。方法:BALB/c小鼠70只,分为正常对照组、模型对照组、齐多夫定对照组(0.1 g.kg-1)、唐草片对照组(3.2 g.kg-1)、艾可康高、中、低剂量组(5,2.5,1.25 g.kg-1);除正常组外,每只小鼠ip 0.5 mL FLV病毒稀释液,正常组给予0.5 mL生理盐水。24 h后开始给药,正常对照组和模型对照组给予生理盐水,连续给药21 d。末次给药后取血,摘取脾脏。称取脾脏质量,计算脾指数,流式细胞仪测定CD4+,CD8+及CD4+,CD8+T淋巴细胞的幼稚细胞和记忆细胞。结果:与模型组相比较,艾可康高、中剂量组的脾指数、CD4+T淋巴细胞的记忆细胞均显著降低,CD4+,CD4+/CD8+,CD4+T淋巴细胞的幼稚细胞百分率,CD8+T淋巴细胞的幼稚细胞百分率均显著升高(P<0.05),艾可康高剂量组CD8+均显著升高,CD8+T淋巴细胞的记忆细胞百分率均显著降低(P<0.05)。结论:艾可康胶囊可提高Friend型白血病鼠的免疫功能。