发酵黄芪对肉鸡小肠黏膜上皮杯状细胞数量及MUC2基因表达的影响

为了研究发酵黄芪对肉鸡小肠黏膜上皮杯状细胞数量及MUC2基因表达的影响,随机选择1日龄且初始体重相近的健康肉鸡60羽,分为4组,分别为未发酵黄芪组、发酵黄芪组、乳酸菌组和空白对照组,试验周期为42 d,于21日龄和42日龄屠宰取样。分别利用石蜡切片-PAS染色和RT-PCR方法,计数各试验组小肠黏膜上皮杯状细胞数量及其分泌的黏蛋白MUC2基因表达的差异性变化。结果显示:与空白对照组相比,发酵黄芪组21日龄肉鸡十二指肠、空肠和回肠黏膜中杯状细胞数量分别增加了61.30%、77.63%、61.75%(P<0.01),其分泌的黏蛋白MUC2基因的相对表达分别提高了67.89%、64.35%、67.14%(P<0.01);发酵黄芪组42日龄肉鸡十二指肠、空肠和回肠黏膜中杯状细胞数量分别增加了70.89%、56.38%、40.18%(P<0.01),其分泌的黏蛋白MUC2基因的相对表达量分别提高了58.21%、54.61%、56.06%(P<0.01);未发酵黄芪组也有所提高(P<0.05),而乳酸菌组略有差异。结果表明:在肉鸡生长过程中,发酵黄芪能够提高各段小肠黏膜上皮内杯状细胞数量以及黏蛋白MUC2基因的相对表达量,且其效果优于乳酸菌和未发酵黄芪。

清肠温中方含药血清调控NLRP6途径对Caco-2/HT29-MTX细胞共培养模型MUC2表达的影响

目的:研究清肠温中方含药血清调控NLRP6途径影响Caco-2/HT29-MTX细胞共培养模型MUC2分泌的作用机制。方法:使用SD大鼠制备清肠温中方含药血清;Caco-2/HT29-MTX细胞共培养构建单层肠上皮细胞模型;IL-1β刺激共培养细胞模拟体外肠道炎症模型;si-NLRP6质粒转染干扰NLRP6,研究清肠温中方作用机制。qPCR检测NLRP6、IL-18的mRNA表达水平;Western blot检测NLRP6、IL-18蛋白表达水平;免疫荧光染色观察MUC2表达。结果:正常培养的Caco-2/HT29-MTX细胞中,NLRP6敲除后,MUC2表达明显减少。清肠温中方含药血清增加IL-1β诱导的细胞炎症模型中NLRP6和IL-18 mRNA及蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01),且一定程度上抵消si-NLRP6的抑制作用。与模型组相比,清肠温中方含药血清干预后,促进MUC2蛋白表达恢复,si-NLRP6后一定程度上削弱了清肠温中方的作用。结论:清肠温中方含药血清通过调控NLRP6信号途径,进一步调节MUC2分泌,修复UC黏液屏障损伤。

瘤组织中黏蛋白CD10、MUC2、MUC5AC、MUC6表达与进展期胃癌临床病理参数及预后的关系

目的分析进展期胃癌患者肿瘤组织中黏蛋白CD10、MUC2、MUC5AC、MUC6表达与胃癌临床病理参数及预后的相关性。方法进展期胃癌患者762例,采用免疫组化法检测胃癌组织中的黏蛋白CD10、MUC2、MUC5AC、MUC6。分析黏蛋白表达与胃癌临床病理参数及预后的相关性。根据胃癌预后影响因素建立胃癌预后预测的列线图模型并验证其效能。结果胃癌组织中CD10、MUC2、MUC5AC、MUC6表达阳性分别为244例(32.02%)、282例(37.01%)、484例(63.52%)、502例(65.88%)。CD10在肠型胃癌中表达高于混合型和弥漫型,MUC5AC和MUC6在混合型胃癌中表达高于肠型和弥漫型(P均<0.05)。MUC2、MUC5AC在黏液腺癌中表达高于低分化和中高分化胃癌(P均<0.05)。MUC2、MUC5AC、MUC6在脉管侵犯阳性胃癌中表达高于阴性组织(P均<0.05)。MUC6在神经侵犯阳性胃癌中表达高于阴性组织(P均<0.05)。MUC2在Ⅲ期胃癌中表达高于Ⅱ期胃癌(P<0.05)。单因素Kaplan-Meier生存分析结果显示,脉管侵犯、分化程度、TNM分期、辅助化疗是进展期胃癌患者总生存期(OS)的影响因素,MUC5AC阳性患者OS低于阴性患者(P<0.05)。多因素Cox分析结果显示,MUC5AC表达、术后辅助化疗、分化程度、Lauren分型及肿瘤TNM分期是进展期胃癌患者OS的独立影响因素(P均<0.05)。将MUC5AC表达、术后辅助化疗、分化程度、Lauren分型及肿瘤TNM分期建立胃癌患者预后预测的列线图模型,校正图提示预测值与实际观察值具有良好的一致性。结论黏蛋白CD10、MUC2、MUC5AC、MUC6表达变化与进展期胃癌Lauren分型、分化程度、肿瘤侵犯程度和分期等相关;MUC5AC对于进展期胃癌预后评估有一定价值。

MUC2基因沉默对脂多糖干扰Caco-2/HT-29细胞紧密连接蛋白表达的影响

肠道黏膜屏障阻碍病原物质入侵的第一道防线是由黏蛋白-2(MUC2)组成的肠道黏液层,覆盖于上皮细胞表面,由杯状细胞分泌而成。脂多糖(lipopolysaccharides, LPS)可通过损伤肠黏膜从而干扰屏障功能的正常发挥。论文对Caco-2/HT-29(3∶1)共培养模拟肠道上皮细胞,通过沉默黏蛋白-2(siMUC2)分析脂多糖对肠道黏液层屏障及其上皮紧密连接结构的影响。结果显示,与对照组相比,LPS组E-钙黏素(E-cadherin)、闭合蛋白mRNA表达量均明显降低。与LPS组相比,LPS+siMUC2组中连接蛋白(claudin)、连接附着分子(JAMA)、E-cadherin以及桥粒(desmosome) mRNA水平显著降低,细胞连接蛋白mRNA水平的下调可能影响细胞通透性进而导致屏障功能紊乱。说明黏蛋白-2作为黏液层骨架蛋白成分可以保护细胞紧密连接蛋白免受LPS的干扰。LPS可诱导Caco-2/HT-29细胞模型黏蛋白-2表达增多以及E-cadherin、闭合蛋白mRNA表达下调。当黏蛋白-2基因被沉默后,LPS可导致细胞紧密连接蛋白mRNA表达量的显著下降,提示肠道上皮细胞紧密连接的屏障功能可能被破坏。

Characterization,Expression Pattern Analysis,and Cellular Localization of Two Homologous MUC2 Genes in Japanese Flounder(Paralichthys olivaceus)

As a member of mucins family,MUC2 is an important component of mucus,which is characterized by tandem and irregular repeat sequences rich in threonine and serine.It is strongly expressed by goblet cells that are involved in innate immunity.Japanese flounder is an economically important marine flatfish.In this study,two homologous genes of MUC2 were identified,named MUC2-1 and MUC2-2.Depending on phylogenetic and structural analysis,MUC2-1 and MUC2-2 were clustered in two clades,respectively.Paralichthys olivaceus MUC2-1 showed a closer relationship with MUC2 in the higher vertebrates.Various healthy tissues were analyzed to determine the expression patterns,and both MUC2 genes showed high expression levels in the gills and intestines.Following Edwardsiella tarda challenge,P.olivaceus MUC2-1 and MUC2-2 both showed significant up-regulated expression in intestine and kidney.Moreover,MUC2-1 was significantly up-regulated in gill cell lines following PGN and polyI:C stimulation,and MUC2-2 was significantly up-regulated in gill cell lines following LPS stimulation.In addition,ISH results revealed that MUC2-1 and MUC2-2 showed the same tissue localization in intestine tissues,but displayed different localization in gill.The siRNA-mediated knockdown of MUC2-1 and MUC2-2 genes in the gill cell lines of Japanese flounder affected the expressions of galnt family genes and smad pathway members that are related to mucosal immunity.The results provided a valuable insight into understanding the functions of MUC2 on mucosal immune system in response to the invasion of bacterial pathogen.

微小膜壳绦虫感染仓鼠小肠组织病理学观察及MUC2表达的分析

为了解微小膜壳绦虫感染仓鼠小肠组织的病理学特征及黏蛋白2(MUC2蛋白)的表达情况,试验从贵阳市宠物市场随机选取60只宠物仓鼠,采用饱和盐水浮聚法检测仓鼠粪便中的虫卵并进行鉴定,根据仓鼠感染微小膜壳绦虫的情况将仓鼠分为未感染组、无症状感染组、普通型感染组和重型感染组,解剖所有仓鼠获取肠道内寄生虫及小肠组织,制备小肠组织切片并进行苏木精-伊红(H.E.)染色、阿利新蓝-过碘酸-雪夫(AB-PAS)染色及免疫组织化学染色,通过实时荧光定量PCR(qPCR)扩增分析仓鼠小肠MUC2基因相对表达情况。结果表明:微小膜壳绦虫在宠物仓鼠中的感染率为74.5%,其感染可引起仓鼠小肠绒毛损伤、上皮细胞变性坏死、杯状细胞异常、白细胞浸润等病理改变;与未感染组相比,无症状组杯状细胞数量及MUC2基因相对表达量差异不显著(P>0.05),普通型感染组的杯状细胞数量极显著增加(P<0.01),重型感染组的杯状细胞极显著减少(P<0.01),同时重型感染组的MUC2基因及MUC2蛋白表达水平极显著增高(P<0.01)。说明微小膜壳绦虫感染会导致仓鼠小肠绒毛结构破坏,杯状细胞数量及形态异常,并引起杯状细胞分泌MUC2蛋白增多,且重型感染组杯状细胞数量减少,但其分泌的MUC2蛋白量增加。

清肠温中方对溃疡性结肠炎小鼠NLRP6/IL-18/MUC2轴及肠道黏液屏障的影响

目的研究清肠温中方对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠NLRP6/IL-18/MUC2轴及肠道黏液屏障的影响及作用机制。方法24只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、清肠温中方组和美沙拉嗪组,每组6只。空白组自由饮用去离子水,模型组、清肠温中方组和美沙拉嗪组自由饮用3%DSS溶液制备UC模型。造模7 d后,清肠温中方组、美沙拉嗪组予相应药液灌胃,空白组、模型组予去离子水灌胃,连续7 d。每日称量小鼠体质量,记录小鼠疾病活动指数(DAI)评分,HE染色观察结肠组织病理变化,AB-PAS染色观察结肠组织杯状细胞情况,Western blot检测结肠组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白6(NLRP6)、白细胞介素(IL)-18蛋白表达,免疫荧光染色检测结肠组织黏蛋白2(MUC2)蛋白表达。结果与空白组比较,模型组小鼠体质量下降,DAI评分显著升高(P<0.01),结肠长度显著缩短(P<0.01),结肠组织黏膜屏障破坏,杯状细胞数量减少,黏液分泌减少;结肠组织NLRP6、MUC2蛋白表达显著降低(P<0.01),IL-18蛋白表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,清肠温中方组小鼠体质量增加,DAI评分显著降低(P<0.01),结肠长度显著增加(P<0.05);结肠黏膜损伤减轻,炎性细胞浸润减少,杯状细胞数量增多;结肠组织NLRP6、MUC2蛋白表达显著升高(P<0.01),IL-18蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论清肠温中方能明显缓解UC小鼠疾病活动度,降低DAI评分,修复结肠组织病理损伤,增加杯状细胞数量,促进黏液分泌,其作用机制可能与调节NLRP6/IL-18/MUC2轴,修复肠道黏液屏障有关。

泽漆化痰方对慢性阻塞性肺疾病气道黏液高分泌大鼠肠道EGFR-MUC2信号通路相关因子的影响

目的基于肠道EGFR-MUC2信号通路研究泽漆化痰方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道黏液高分泌大鼠的影响及作用机制。方法将48只大鼠随机分为空白组、模型组、AG1478组和泽漆化痰方低、中、高剂量组,每组8只。除空白组外,其余各组制备COPD气道黏液高分泌大鼠模型,造模第14日开始,泽漆化痰方低、中、高剂量组予泽漆化痰方汤剂灌胃,AG1478组予AG1478灌胃,空白组和模型组灌胃生理盐水2 mL,连续14 d。PAS染色观察大鼠气道杯状细胞增生情况;ELISA检测肠黏液肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-13、IL-10含量;Western blot检测结肠组织表皮生长因子受体(EGFR)、p-EGFR、黏蛋白(MUC)2蛋白表达;免疫荧光检测结肠组织p-EGFR、MUC2表达。结果与空白组比较,模型组大鼠气道杯状细胞增生,肠黏液TNF-α、IL-13含量增加,IL-10含量减少,结肠组织p-EGFR、MUC2蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,泽漆化痰方各剂量组大鼠气道杯状细胞增生减少,肠黏液TNF-α、IL-13含量减少,IL-10含量增加,结肠组织p-EGFR、MUC2蛋白表达降低,其中以泽漆化痰方高剂量组效果最显著(P<0.05)。结论泽漆化痰方可抑制COPD大鼠气道黏液分泌,其机制与减少肠道炎症因子TNF-α、IL-13分泌,促进IL-10分泌,抑制肠道EGFR-MUC2信号通路有关。

生物信息数据库分析黏蛋白MUC2在结直肠癌中的表达及临床意义

目的:分析黏蛋白MUC2在结直肠癌中的表达水平,探究黏蛋白MUC2的表达与结直肠癌患者预后之间的关系。方法:利用TIMER2.0数据库探究黏蛋白MUC2在结直肠癌中的表达以及与免疫细胞浸润水平之间的相关性。通过GEPIA和Kaplan-Meier Plotter数据库分析黏蛋白MUC2对结直肠癌患者预后的影响。利用TISIDB数据库分析黏蛋白MUC2在结直肠癌不同免疫及分子亚型中的表达。结果:与配对正常结直肠组织相比,黏蛋白MUC2在结直肠癌组织中的表达明显降低,其表达与CD4^(+)T细胞呈正相关。黏蛋白MUC2高表达与结直肠癌患者较好的预后相关,且MUC2的表达与结直肠癌分子分型相关。结论:在结直肠癌中,黏蛋白MUC2具有潜在的抑癌作用,其表达减少参与肿瘤微环境中的免疫抑制。MUC2是一种潜在的结直肠癌预后分子标志物并有望成为结直肠癌靶向治疗的新靶点。

结肠直肠癌组织中粘蛋白MUC1和MUC2的表达及临床意义

背景与目的:粘蛋白MUC1的表达上调或MUC2的表达下调可能参与了肿瘤的发生,而MUC1和MUC2的表达中国人结肠直肠癌发生发展的关系未见报道。本研究的目的是探讨结肠直肠癌组织中粘蛋白MUC1和MUC2的表达与不同的临床病理参数间的关系及其临床意义。方法:采用免疫组化方法检测126例结肠直肠癌和20例正常结肠直肠粘膜中粘蛋白MUC1和MUC2的表达。结果:20例正常结肠直肠粘膜中粘蛋白MUC1和MUC2的表达阳性率分别为0和100%,而126例结肠直肠癌中粘蛋白MUC1和MUC2的阳性表达率分别为42.1%和36.5%(P<0.01);结肠直肠癌中粘蛋白MUC1的表达与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移和Dukes分期呈正相关(P<0.05),与肿瘤的分化程度呈负相关(P<0.05);粘蛋白MUC2在结肠直肠癌中的表达与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移和Dukes分期密切相关(P<0.05),而与肿瘤的分化程度无关(P>0.05)。结论:粘蛋白MUC1表达上调或MUC2表达下调可能参与了结肠直肠癌的发生发展,检测结肠直肠癌中粘蛋白MUC1和MUC2的表达可间接反映肿瘤的预后。

中药溃结方对难治性溃疡性结肠炎患者肠黏膜EGFR、MUC2表达的影响

目的:观察溃结方对难治性溃疡性结肠炎患者临床活动指数、内镜指数及肠黏膜EGFR、MUC2表达的影响。方法:观察溃结方治疗难治性溃疡性结肠炎有效患者21例,治疗前后记录临床症状,检查电子肠镜钳取肠黏膜,同时以10例健康体检者肠黏膜为对照组,观察临床活动指数及肠黏膜内镜指数,应用免疫组化法检测肠黏膜EGFR、MUC2表达。结果:难治性溃疡性结肠炎患者经过中药治疗后,临床活动指数与内镜指数均明显下降(P<0.01),EGFR表达水平治疗前后与正常组比较均明显上升(P<0.05,P<0.01),其中治疗后表达水平比治疗前上升更明显(P<0.05)。MUC2表达水平治疗前与正常组比较明显下降(P<0.01),治疗后表达水平上升(P<0.05)。结论:中药溃结方能明显降低难治性溃疡性结肠炎患者临床活动指数及内镜指数,增加肠黏膜组织EGFR、MUC2的表达,促进黏膜损伤的修复。

MUC2基因表达对益生菌调节肠屏障作用的影响

目的观察益生菌诱导的乳鼠结肠MUC2基因的表达及其对益生菌抑制E.coli K1株E44黏附侵袭肠屏障作用的影响。方法 SD乳鼠分别用益生菌、E44株和益生菌+E44株三组灌胃7 d后,RT-PCR法观察益生菌和E44株诱导结肠MUC2基因的表达;靶向MUC2基因的shRNA真核质粒表达载体(shRNA MUC2)和阴性对照shRNA NC转染人结肠癌Lovo细胞,荧光定量PCR法检测其表达水平,并通过竞争性排斥方法检测MUC2基因对益生菌拮抗致病菌E44粘附侵袭的影响。结果灌胃益生菌组SD乳鼠肠道MUC2基因明显上调,而E44组则显著降低。用shRNA MUC2转染Lovo细胞后,与阴性对照组和空白对照组相比,其表达水平明显降低,干扰率为66.7%;益生菌对E44株粘附侵袭抑制作用明显低于未处理组,与对照组相比,E44相对粘附率为56.64%,相对侵袭率为66.64%。结论益生菌诱导的MUC2基因表达上调可能成为拮抗致病菌易位的保护机制之一;MUC2基因沉默后,益生菌对E44粘附侵袭肠上皮细胞的抑制作用明显降低。

MUC2、CDX2在大肠肿瘤中联合表达的意义

目的探讨粘蛋白MUC2、CDX2在大肠腺癌中的分型及其与临床各个病理因素之间的关系。方法应用免疫组织化学方法对30例大肠腺瘤、60例大肠腺癌及相应正常大肠黏膜30例进行粘蛋白MUC2、CDX2检测。结果在大肠正常黏膜、腺瘤、腺癌中,MUC2阳性率分别为100%、93.3%、58.3%;CDX2为90.0%、76.7%、31.7%。根据MUC2和CDX2在大肠腺癌中的表达把大肠腺癌分为四型:MUC2+CDX2+、MUC2+CDX2-、MUC2-CDX2+、MUC2-CDX2-,MUC2+CDX2+型与分化程度、浸润深度、Dukes分期以及生存期相关;MUC2+CDX2-型与淋巴结转移相关;MUC2-CDX2+与临床病理因素不相关;MUC2-CDX2-型与分化程度、浸润深度、淋巴结转移、Dukes分期以及生存期具有明显的相关性。结论MUC2、CDX2的下调表达可能参与了大肠腺癌的发生,MUC2+CDX2+、MUC2-CDX2-型大肠腺癌与肿瘤的发生、发展、浸润及转移相关,对临床上判断预后具有较大的意义。

胃癌及癌前病变组织中MUC2基因的表达

目的 揭示MUC2基因在正常胃肠道粘膜、癌前病变和胃癌组织中的表达规律及其临床病理意义。 方法 应用免疫组织化学SP法检测组织中MUC2核粘蛋白的表达,应用原位杂交方法检测组织中MUC2 mRNA的表达。 结果 MUC2核粘蛋白及其mRNA主要在十二指肠内表达,正常胃粘膜内不表达;肠上皮化生(n=27)和胃癌组织(n=46)的表达率分别为85％,32％和67％,58％;肠化内MUC2基因表达与肠化分型之间无关(P>0.05);胃癌组织中MUC2基因表达与肿瘤浸润、淋巴结转移、临床分期和胃癌的分型之间无关(P>0.05),而MUC2核粘蛋白阳性组与阴性组之间的肿瘤分化存在明显的差别(P<0.05)。 结论 MUC2基因在胃粘膜的癌变过程中是明显上调表达的,胃癌内MUC2核粘蛋白的表达与胃癌的分化有关。

MUC2、CDX2在大肠肿瘤中的表达及临床意义

目的探讨黏蛋白MUC2、CDX2在正常大肠黏膜、大肠腺瘤及大肠腺癌组织中的表达及其与临床各个病理因素之间的关系,并且研究MUC2与CDX2表达之间的相关性。方法应用免疫组织化学方法对30例大肠腺瘤、60例大肠腺癌及相应正常大肠黏膜30例进行黏蛋白MUC2、CDX2检测,并进行Kaplan-meier生存分析。采用Spearman等级相关分析MUC2与CDX2之间的相关性。结果在大肠正常黏膜、腺瘤、腺癌中MUC2阳性率分别为100%、93.3%、58.3%;CDX2为90.0%、76.7%、31.7%。在大肠腺癌中,MUC2的表达与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移、Dukes分期有关(P<0.05);CDX2的表达与分化程度有关(P<0.01)。Kaplan-meier生存曲线及LogRank显著性检验发现,MUC2阳性表达组5年生存率明显增高(P<0.01)。通过Spearman等级相关分析表明,MUC2与CDX2呈正相关(r=0.285,P=0.028)。结论在大肠腺癌中,MUC2与CDX2具有明显相关性,MUC2、CDX2的下调表达与大肠肿瘤的发生有关,可作为鉴别大肠良恶性肿瘤的指标。MUC2与大肠癌的生物学行为有关,并且可作为判断预后的生物学标志物之一。

MUC1和MUC2 mRNA在不同肿瘤组织的表达及其意义

目的 :检测MUC1和MUC2mRNA在不同组织的表达差异 ,研究MUC1和MUC2在肿瘤诊断和免疫治疗中的意义。方法 :采用了DotBlot方法检测了 6 0例不同肿瘤组织和正常组织的mRNA水平。结果 :MUC1和MUC2在腺癌 ,特别是乳腺癌和胃癌中表达明显增强 ,在正常组织和腺癌低度表达。MUC1与乳腺癌的病理分级及病理类型明显相关 ,MUC2与胃癌的病理类型明显相关。结论 :MUC1和MUC2对乳腺癌和胃癌诊断和治疗有重要意义。

基于大肠主津理论下助阳通便膏对便秘模型小鼠结肠组织中MUC2、AQP3的影响

目的通过观察助阳通便膏对便秘模型小鼠结肠黏膜蛋白2(MUC2)、水通道蛋白3(AQP3)的影响,探讨助阳通便膏改善功能性便秘的作用机制。方法将120只雄性巴比西小鼠随机分成5组,每组24只。即正常组、模型组、助阳通便汤组、助阳通便膏组、麻仁软胶囊组。除正常组外,其余各组造模便秘小鼠模型,采用复方地芬诺酯灌胃的方法造模。造模成功后各组分别给予相应的药物,连续灌胃给药14 d后取材,应用免疫组化、Wester Blot的方法观察各组小鼠结肠黏膜蛋白2(MUC2)和水通道蛋白3(AQP3)的含量。结果通过免疫组化的方法发现,与模型组比较,各组MUC2、AQP3平均光密度值均有不同程度增高,且助阳通便膏组与汤剂组比较MUC2平均光密度值差异有统计学意义(P<0.05)。通过Wester Blot的方法发现,与模型组比较,各组MUC2、AQP3蛋白相对表达水平灰度值均有不同程度增高。且AQP3助阳通便膏剂组与汤剂组比较(P<0.05)。结论助阳通便膏可提高MUC2、AQP3含量,改善便秘。助阳通便膏剂增加便秘小鼠结肠AQP3蛋白表达水平的作用及增加便秘小鼠结肠MUC2阳性细胞数量的作用明显优于助阳通便汤。

青黛颗粒对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜MUC2和iNOS基因表达的影响

目的:观察青黛颗粒对TNBS诱导的溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠黏膜黏蛋白(MUC2)及诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)基因表达的影响,探讨其治疗UC的可能作用机制.方法:将54只SD实验大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、阳性药物治疗组(SASP,500mg/kg)、青黛颗粒600、900、1200mg/kg治疗组.造模后第3天开始灌胃给药,共给药10d.实验第14天,处死大鼠,剖取其病变结肠组织,比较各组大鼠的DAI积分和CMDI评分,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测MUC2及iNOS基因的表达.结果:较模型组青黛颗粒900、1200mg/kg治疗组能显著降低实验大鼠DAI积分和CMDI评分,上调结肠组织中MUC2的基因表达(2.06±0.70vs1.24±0.47;2.34±0.86vs1.24±0.47,均P<0.01),且青黛颗粒1200mg/kg治疗组能下调iNOS的基因表达(0.35±0.12vs0.62±0.31,P<0.05).结论:青黛颗粒可能通过上调结肠黏膜MUC2的基因表达并下调iNOS的基因表达而起到抗TNBS诱导的大鼠溃疡性结肠炎的作用.

消化道癌患者胃肠道粘膜中MUC2和MUC3基因的表达

应用免疫组织化学和原位杂交方法检测人消化道癌患者胃肠道粘膜中的MUC2 和MUC3 基因蛋白产物和mRMA 的表达，以提示MUC2 和MUC3 基因在人消化道癌患者胃肠道粘膜中的表达规律。结果发现，胃粘膜中无MUC2 和MUC3 基因产物的表达，MUC2 核粘蛋白及mRNA 主要存在十二指肠和结肠杯状细胞周及核上，柱状细胞中无表达。MUC3 核粘蛋白及其mRNA 主要存在十二指肠和结肠的杯状细胞和柱状细胞胞浆内，而杯状细胞的粘液滴内无MUC2、MUC3；基因产物的阳性反应信号。提示，MUC2 和MUC3 基因主要在肠道粘膜中表达，而胃粘膜中不表达，是合成肠道粘液的主要粘蛋白基因。

润肠通便合剂对便秘模型小鼠结肠MUC2、AQP3的影响

目的:研究润肠通便合剂对便秘模型小鼠的治疗作用及对结肠黏蛋白(MUC2)、水通道蛋白(AQP3)表达的影响。方法:将小鼠分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组及润肠通便合剂高、中、低剂量组(40、20、10 ml/kg)(n=10),通过复方地芬诺酯(30 mg/kg灌胃1次或20 mg/kg灌胃14 d)来复制便秘动物模型,观测润肠通便合剂给药3 d对便秘小鼠排便、小肠推进的影响,给药14 d对便秘小鼠结肠病理学、含水量、结肠灌洗液(CLAF)中Muc2以及结肠AQP3基因表达水平,观测润肠通便合剂给药3 d或14 d对便秘小鼠排便、小肠推进、结肠病理学、含水量、结肠灌洗液(CLAF)中Muc2以及结肠AQP3基因表达水平的影响。结果:与空白对照组比较,模型对照组小鼠给予30 mg/kg复方地芬诺酯1次后,小肠推进长度及推进率显著降低,首便时间延长,6 h排便粒数减少;给予20 mg/kg复方地芬诺酯14 d后,小鼠结肠出现明显病理学变化,CLAF中Muc2的含量降低,近端结肠AQP3的基因表达水平升高,结肠湿干重比值降低(P<0.01)。与模型对照组比较,给予润肠通便合剂能明显增加小肠推进长度及推进率,缩短首便时间,增加6 h排便粒数,改善便秘小鼠结肠病理学,提高CLAF中Muc2的含量,抑制近端结肠AQP3的基因表达,提高结肠湿干重比值(P<0.05, 0.01)。结论:润肠通便合剂可加速排便,改善结肠病理学,其中促进Muc2分泌、下调AQP3 mRMA表达而改善结肠水代谢是其通便的机制之一。