猪SIgA分泌片的表达及其多克隆抗体的制备

SIgA是评价黏膜免疫的重要指标,分泌片(SC)是SIgA的特有成分,为了更方便的获得大量的SIgA的分泌片,本研究应用RT-PCR方法扩增出SC基因片段,将SC基因片段克隆到pGEX-4T-1原核表达载体上,经酶切和测序验证获得pGEX-4T-1-SC重组质粒;将获得的pGEX-4T-1-SC转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达重组蛋白rSC.重组蛋白rSC经鉴定和纯化后,按常规免疫程序制备多克隆抗体;利用Western blot对抗重组蛋白rSC的多克隆抗体进行鉴定.结果显示,该抗体能特异性识别猪初乳中的SIgA免疫球蛋白,而与猪初乳中的IgG不发生反应.因此,抗SC重组蛋白的多克隆抗体可以作为抗SIgA免疫球蛋白的特异性抗体,为进一步建立SIgA的检测方法及黏膜免疫的研究奠定基础.

深圳市健康人群麻疹抗体水平监测和疫苗效果分析

目的 了解深圳市人群麻疹免疫状况，为制定麻疹预防控制措施提供科学依据。方法 对8～12月龄和4岁儿童进行免疫成功率监测，对刚出生婴儿于0、3、6月龄时进行母传抗体水平监测；对1～40岁人群，分5个年龄组进行人群麻疹抗体水平监测。结果 初免组（8～12月龄婴儿）和加强组（4岁儿童）免疫成功率分别为88．81％和100％；0、3、6月龄婴幼儿母传麻疹抗体阳性率分别为73．08％、4231％和3．85％，GMT分别为1：1543、1：907、1：800；人群麻疹抗体阳性率、保护率和GMT分别为86．10％、64．44％和1：975。结论 为有效控制麻疹流行，建议提高麻疹免疫接种覆盖率和接种质量，加快成人免疫步伐，减少免疫空白人群。

黏膜抗体在疫苗免疫效力评价中的前景

简单介绍目前疫苗效力检验的方法、黏膜抗体的功能及其在实验室疫苗效果效力评价中的应用,提出了黏膜抗体作为疫苗免疫效力试验的替代指标或免疫监测的主要抗体的建议。

以α甘露聚糖肽为佐剂的EV71全病毒灭活抗原黏膜免疫小鼠的抗体应答

目的肠道71型全病毒灭活抗原（EV71Ag）联合α-甘露聚糖肽（PA）佐剂滴鼻免疫，观察全身免疫应答及持续时间。方法5—6周龄BALB／c雌性小鼠随机分为阴性对照组，阳性对照组，高剂量疫苗组，低剂量疫苗佐剂组和高剂量疫苗佐剂组，每组10只。阴性对照组以PBS滴鼻，阳性对照组以EV71Ag肌注给药，免疫组以EV71Ag单独和不同剂量分别配伍PA滴鼻给药。首次给药后第0、2、3、4、5和6周采集血清及鼻肺灌洗液，ELISA法检测血清特异性IgG抗体水平及鼻肺灌洗液sIgA抗体水平，MTr法检测淋巴细胞增殖，中和抗体实验检测小鼠血清中和抗体水平。结果各滴鼻组小鼠血清中均产生一定水平的特异性IgG抗体，高剂量疫苗佐剂组第三次免疫后其血清IgG（2．477±0．500）可达到阳性对照组（3．040±0．120）的80％，佐剂组体外淋巴细胞增殖率较阳性对照组有显著增高（P〈0．05），各滴鼻组血清中和抗体滴度均〉8。结论EV71全病毒灭活联合仪．甘露聚糖肽佐剂免疫小鼠可诱导全身免疫应答，且α-甘露聚糖肽佐剂可增强其作用。

接种人用狂犬病疫苗后的抗体水平分析

599例犬咬伤患者常规接种狂犬病疫苗后，用ELISA方法检测抗体阳性515人，阳性率为85．98％，未检出抗体84人，其中69人又加强接种2针疫苗，有57人抗体阳转，阳转率为82．60％。在抗体阳性的515人中，不同性别间的抗体水平无显著差异，但20岁以下年龄组抗体阳性率高于21岁以上年龄组（P＜0．01）。

肠黏膜免疫：刚地弓形虫感染中抗体分泌细胞及sIgA的地位

病原体经口感染机体后，肠相关淋巴组织受刺激，促进肠黏膜内IgA抗体分泌细胞（IgAASC）的形成，并向肠腔分泌大量的分泌型免疫球蛋白A（sIgA），IgA ASC和sIgA在肠黏膜免疫应答中起了重要作用。BALB／c小鼠经口感染弓形虫RH速殖子后，小鼠小肠黏膜固有层IgA ASC大量增殖，小肠冲洗液sIgA水平持续增高，发挥抗虫效应。小肠冲洗液sIgA水平与十二指肠黏膜IgA ASC数量呈正相关（r=0．732，P〈0．01）。用可溶性速殖子抗原（STAg）鼻内免疫小鼠可诱导十二指肠黏膜固有层IgA ASC高表达，小肠液和血清sIgA水平升高，表明在抗弓形虫感染中STAg鼻内免疫发挥了作用。