某院不同标本来源的肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的通过比较不同标本来源的肺炎克雷伯菌耐药性特征,使抗菌药物的使用更具特异性。方法分离湘潭市第一人民医院2016-2017年临床不同部位送检标本的肺炎克雷伯菌,采用VITEK2Compact微生物分析仪对细菌进行鉴定和药敏试验,K-B法作为补充。结果 2016-2017年临床送检的各类标本共检出肺炎克雷伯菌758株,其中痰液检出370株(48.8%),尿液172株(22.7%),血液102株(13.5%),其他各类114株(15.0%);产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)阳性菌株284株(37.5%)。与血液标本分离菌株耐药率比较,痰液和尿液的肺炎克雷伯菌对各种抗菌药物的耐药率均较血液高;其中痰液标本的分离菌株对哌拉西林、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、头孢曲松、头孢吡肟、头孢西丁、氨曲南、亚胺培南、阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、复方磺胺甲噁唑的耐药率差异有统计学意义(P<0.05);尿液标本分离菌株对头孢曲松、头孢吡肟、头孢西丁、氨曲南、亚胺培南、庆大霉素、妥布霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、复方磺胺甲噁唑的耐药率差异有统计学意义(P<0.05)。结论按照不同标本类型进行药敏试验,可以更准确反映菌株的耐药性状况,更好地指导临床抗菌药物的选用。

深圳某三甲综合医院7年耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药变迁

目的:分析深圳市南山区人民医院7年来临床分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)临床分布及耐药特点,为临床合理用药提供参考。方法:收集2010年1月至2016年12月本院临床分离的CRKP,分析标本来源、科室分布及耐药变迁。结果:1528株非重复分离的肺炎克雷伯菌中,检出CRKP 86株(5.63%)。2010年至2016年CRKP检出率分别为3.22%、2.22%、2.56%、4.87%、3.14%、12.92%、11.79%,呈逐年上升趋势。86株CRKP产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)率为55.81%(48/86)。CRKP菌株主要来源于痰液(57.65%)及中段尿(20.00%),主要分布于重症监护病房(ICU)、普外科及呼吸内科。2010年至2016年CRKP对抗菌药物总耐药率最高的是氨苄西林(100%),其次是头孢唑林(94.44%)。耐药率最低的是阿米卡星(16.28%),其次是庆大霉素(24.42%)。而美罗培南和亚胺培南总耐药率分别是72.09%和82.56%,并呈逐年上升趋势。结论:CRKP感染呈逐年上升趋势,临床应实施严格的感染控制措施防止CRKP在医院内的快速传播。

佛山南海地区肺炎克雷伯菌分布及耐药特征

目的了解2012年我院肺炎克雷伯菌的分布及耐药特征，为临床抗感染治疗和合理选择抗菌药物提供依据。方法采用纸片扩散法进行抗菌药物敏感实验，药敏结果按美国CLS12012版判断标准，WHONET5．4软件及SPSS13．0软件进行数据分析。结果四个季度该菌的构成比分别为9．6％、12：4％、12．4％、12．8％，ESBLs检出率分别为38．2％、24．7％、36．3％、36．9％，产ESBLs菌株耐药率明显高于非产ESBLs菌株，差异具有统计学意义（P〈0．05）。产ESBLs菌株对β-内酰胺加酶抑制剂的复合抗生素的敏感性下降。结论本地区肺炎克雷伯菌呈高分布状态，产ESBLs株高流行，整体呈上升趋势，经验性治疗可首选碳青霉烯类，β-内酰胺加酶抑制剂的复合抗生素也可优先选择。加强细菌耐药监测对抗菌药物的临床合理应用和控制细菌耐药性传播具有重要意义。

多药耐药肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因及膜孔蛋白基因研究

目的探讨多耐药肺炎克雷伯菌(MDR-KPN)β-内酰胺酶基因存在状况及其膜孔蛋白编码基因ompK36在其耐药中的作用。方法应用PCR检测20种β-内酰胺酶基因及膜孔蛋白编码基因ompK36,并用MEGA4.1对ompK36进行分子进化分析。结果 15株MDR-KPN共检出TEM、SHV、CTX-M-1群、LAP、KPC、DHA等6种β-内酰胺酶基因,阳性率分别为66.7%、60.0%、6.7%、13.3%、13.3%、20.0%;而膜孔蛋白编码基因ompK36均检测到,经测序比对均存在突变。结论 15株MDR-KPN耐β-内酰胺类药物至少与产β-内酰胺酶和同时伴有膜孔蛋白ompK36突变相关。

肺炎克雷伯菌老年患者分离株氨基糖苷类药物耐药相关基因研究

目的了解肺炎克雷伯菌老年患者分离株16SrRNA甲基化酶、氨基糖苷类修饰酶基因的存在状况。方法自2006年1～10月住院患者标本中分离并筛选出20株多药耐药肺炎克雷伯菌，微量肉汤稀释法检测20种抗菌药物的敏感性；PCR法检测16SrRNA甲基化酶、氨基糖苷类修饰酶基因。结果20株多药耐药肺炎克雷伯菌16SrRNA甲基化酶（rmtA、rmtB、rmtC、rmtD、armA和npmA）基因均为阴性；氨基糖苷类修饰酶aac（3）-Ⅱ基因阳性15株、aac（6’）-Ib基因阳性1株、ant（3”）-I基因阳性16株、aph（3’）-I基因阳性3株、ant（2”）-I基因阳性1株。结论研究结果显示，肺炎克雷伯菌老年患者分离株对氨基糖苷类药物耐药的主要原因是aac（3）-Ⅱ、aac（6’）-Ib、ant（3”）-I、aph（3’）-I和ant（2”）-I 5种氨基糖苷类修饰酶基因的存在；从肺炎克雷伯菌中检出aac（6’）-Ib-Cr型和aph（3’）-I均为国内首次。

2006-2009年重症监护病房医院感染大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的探讨医院重症监护病房(ICU)医院感染大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌现状及耐药特点,为预防和控制ICU的医院感染提供依据。方法收集ICU 2006年1月-2009年12月医院感染大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌菌株,使用K-B法进行药敏试验。结果 2006-2009年ICU共检出大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌409株,其中大肠埃希菌233株,产ESBLs大肠埃希菌61株,占26.2%,肺炎克雷伯菌176株,产ESBLs肺炎克雷伯菌38株,占21.6%;大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类美罗培南与亚胺培南的耐药率在所测14种抗菌药物中最低。结论经验性使用碳青霉烯类抗菌药物治疗ICU的医院感染是可行的。

产ESBL肺炎克雷伯菌中16SrRNA甲基化酶的分布与相关耐药性的研究

目的调查我院产ESBL肺炎克雷伯菌临床分离株16SrRNA甲基化酶基因的分布以及与耐药谱的关系，并初步探讨其在分子流行病学分析中的作用。方法收集我院临床2010年3月至9月分离出69株非重复产ESBL肺炎克雷伯菌，采用PCR法检测16SrRNA甲基化酶基因，并对阳性菌株进行ESBL基因及整合子基因分析，通过DNA直接测序确定。质粒接合试验和质粒消除试验确定16SrRNA甲基化酶基因的传播途径，利用ERIC-PCR技术进行基因分型。结果69株产ESBL肺炎克雷伯菌中有rmtB阳性菌株20株（28．9％），其中2株同时携带有rmtB和armA。在20株产16SrRNA甲基化酶菌株中，均携带有CTX—M基因，测序显示14株CTX—M-14基因，6株CTX—M-15基因；14株携带有TEM-1基因；8株携带有SHV基因，测序显示5株SHV-12基因，3株SHV-11基因；3株携带有OXA-10基因；3株携带有VBE-1基因。另有12株携带有intl阳性，含有5种不同的耐药基因盒，分别携带d（fA25、drfa1、drfA12、aadA1、aadA2、sat和blaVEB-1基因。ERIC—PCR法显示20株16SrRNA甲基化酶基因阳性的肺炎克雷伯菌主要分为5型，A型为优势流行克隆株。质粒接合和消除试验发现A型克隆株KP5和KPl6rmtB均位于一质粒上并通过接合传播。结论本院产ESBL肺炎克雷伯菌临床分离株中存在16SrRNA甲基化酶基因rmtB的普遍流行，导致对多种氨基糖苷类抗生素高水平耐药。rmtB可通过水平基因传播和克隆传播的两种方式进行播散，并且存在同时产ESBLs、16SrRNA甲基化酶和I类整合子的肺炎克雷伯菌的传播。

新生儿感染肺炎克雷伯菌的喹诺酮类耐药株gyrA基因研究

目的了解湖南地区新生儿感染肺炎克雷伯菌染色体介导喹诺酮类耐药基因gyrA基因的流行情况。方法采用PCR法对20株肺炎克雷伯菌进行gyrA基因检测,采用法国生物梅里埃公司生产的VITEK2-COMPACT全自动细菌鉴定检测16种抗菌药物的体外抗菌活性,PCR扩增产物经纯化后测序并进行序列分析。结果 gyrA基因耐药决定区的突变,其中17株都有第83位的改变,3株发现有第87位的改变。结论本省儿童感染肺炎克雷伯菌染色体介导喹诺酮类耐药基因gyrA基因突变情况十分普遍,监测其突变频率、位点对指导临床用药及耐药机制研究十分重要。

湖北地区三级医院儿童感染克雷伯菌属的耐药性监测

目的调查2003～2007年湖北地区三级医院儿童感染克雷伯菌属细菌的耐药性变迁，为儿科临床医师合理使用抗菌药物提供科学依据。方法采用WHONET4—5软件对2454株克雷伯菌属细菌的耐药率进行统计分析。结果湖北地区儿童组克雷伯菌属细菌的耐药率低于成人组，对常用抗菌药物的耐药率多呈上升趋势；对氨苄西林耐药率最高，达93．0％～97．0％；对亚胺培南和美罗培南敏感率最高，为100．0％；耐药率较高的抗菌药物有哌拉西林、头孢唑林、头孢呋辛、头孢噻肟（41．0％～66．0％）；耐药率较低的抗菌药物有阿米卡星、左氧氟沙星、环丙沙星、哌拉西林／他唑巴坦、头孢哌酮／舒巴坦、头孢西丁（5．0％～20．0％）。结论结合儿童的生理特点，应采取有效措施，合理使用抗菌药物，控制耐药菌的产生与暴发流行。