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时间反转OFDM系统中增强安全性能的功率分配与人工噪声设计
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作者 雷维嘉 毕文佳 +1 位作者 雷宏江 唐宏 《电子学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1570-1581,共12页
时间反转技术特有的时空聚焦特性使其具有抗窃听能力.本文对提高时间反转正交频分复用系统安全性能的优化方案进行研究.首先,通过应用时间反转预滤波的时空聚焦特性来提高合法接收端相对于窃听端的信号强度;然后,以最大化保密速率为目... 时间反转技术特有的时空聚焦特性使其具有抗窃听能力.本文对提高时间反转正交频分复用系统安全性能的优化方案进行研究.首先,通过应用时间反转预滤波的时空聚焦特性来提高合法接收端相对于窃听端的信号强度;然后,以最大化保密速率为目标对子载波的功率分配进行优化.为进一步提升系统保密传输能力,利用循环前缀提供的自由度实现零空间人工噪声,在对窃听端形成有效干扰的同时,不对合法接收端造成影响.通过对子载波功率分配和人工噪声协方差阵进行联合优化,最大化系统的保密传输速率.仿真结果表明,所提优化方案能显著提高系统的保密速率. 展开更多
关键词 物理层安全 正交频分复用 时间反转 功率分配 人工噪声
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Multiplex RT-PCR-based detections of CEA, CK20 and EGFR in colorectal cancer patients 被引量:19
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作者 Aikaterini Tsouma Chrysanthi Aggeli +7 位作者 Panagiotis Lembessis George N Zografos Dimitris P Korkolis Dimitrios Pectasides Maria Skondra Nikolaos Pissimissis Anastasia Tzonou Michael Koutsilieris 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2010年第47期5965-5974,共10页
AIM: To develop a multiplex reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) method detecting cir-culating tumor cells in the peripheral blood of colorectal cancer (CRC) patients. METHODS: Peripheral blood sam... AIM: To develop a multiplex reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) method detecting cir-culating tumor cells in the peripheral blood of colorectal cancer (CRC) patients. METHODS: Peripheral blood samples were collected from 88 CRC patients and 40 healthy individuals from the blood donors' clinic and subsequently analyzed by multiplex RT-RCR for the expression of carcinoembryonic antigen (CEA), cytokeratin 20 (CK20) and epidermal growth factor receptor (EGFR) mRNA. The analysis involved determining the detection rates of CEA, CK20 and EGFR transcripts vs disease stage and overall survival. Median follow-up period was 19 mo (range 8-28 mo). RESULTS: Rates of CEA, CK20 and EGFR detection in CRC patients were 95.5%, 78.4% and 19.3%, respectively. CEA transcripts were detected in 3 healthy volunteer samples (7.5%), whereas all control samples were tested negative for CK20 and EGFR transcripts. The increasing number of positive detections for CEA, CK20 and EGFR transcripts in each blood sample was positively correlated with Astler-Coller disease stage (P< 0.001) and preoperative serum levels of CEA (P=0.029) in CRC patients. Data analysis using Kaplan-Meier estimator documented signif icant differences in the overall survival of the different CRC patient groups as formed according to the increasing number of positivity for CEA, CK20 and EGFR transcripts. CONCLUSION: These data suggest that multiplex RTPCR assay can provide useful information concerning disease stage and overall survival of CRC patients. 展开更多
关键词 Peripheral blood Carcinoembryonic antigen Cytokeratin 20 Epidermal growth factor receptor multiplex reverse transcription polymerase chain reaction
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用两种聚合酶链反应方法检测流感病毒 被引量:4
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作者 张严峻 卢亦愚 +3 位作者 严菊英 周敏 姚亚萍 魏尔清 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期279-281,共3页
目的 建立特异敏感的快速检测流感病毒的分子生物学方法。方法 用多重逆转录聚合酶链反应和半巢式多重聚合酶链反应扩增甲1、甲3 和乙型流感病毒的HA基因的HA1片段。根据扩增产物的大小检测流感病毒。结果 以流感病毒的HA基因为模板... 目的 建立特异敏感的快速检测流感病毒的分子生物学方法。方法 用多重逆转录聚合酶链反应和半巢式多重聚合酶链反应扩增甲1、甲3 和乙型流感病毒的HA基因的HA1片段。根据扩增产物的大小检测流感病毒。结果 以流感病毒的HA基因为模板设计的 3对引物能特异性地扩增出 94 2bp、1117bp和 75 1bp的核酸片段 ,它们分别和甲1,甲3 和乙型流感病毒有稳定对应关系。根据扩增产物的大小可以检测流感病毒。用这个方法能检测病毒浓度为0 1TCID50 的样品。结论 多重逆转录聚合酶链反应和半巢式多重聚合酶链反应是检测流感病毒的特异敏感的方法。 展开更多
关键词 流感病毒 血凝素基因 多重逆转录聚合酶链反应 半巢式多重聚合酶链反应 流行性感冒
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多重RT-PCR快速检测鉴别H7亚型禽流感病毒方法的建立 被引量:10
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作者 庞耀珊 谢芝勋 +2 位作者 邓显文 唐小飞 刘加波 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第7期595-597,共3页
目的参考AIVM基因和HA基因序列,设计了两对引物。其中XZ145-2和XZ146为通用引物,可以检测所有亚型AIV,跨幅244bp;XZH7-1和XZH7-2为H7亚型特异性引物,跨幅634bp。利用这两对引物,通过对多重RT-PCR扩增条件的优化,成功建立了快速检测鉴别H... 目的参考AIVM基因和HA基因序列,设计了两对引物。其中XZ145-2和XZ146为通用引物,可以检测所有亚型AIV,跨幅244bp;XZH7-1和XZH7-2为H7亚型特异性引物,跨幅634bp。利用这两对引物,通过对多重RT-PCR扩增条件的优化,成功建立了快速检测鉴别H7亚型AIV的多重RT-PCR技术。特异性和敏感性试验结果表明,该技术对H7亚型AIV同时扩增出两条大小分别为244bp和634bp的cDNA片段,对其他亚型AIV只扩增出244bp的cDNA片段,对其他常见禽病病原无特异性扩增,结果为阴性;该多重RT-PCR对AIVRNA的最低检出量为1pg,对H7亚型AIVRNA的最低检出量为10pg。 展开更多
关键词 多重 反转录聚合酶链反应 禽流感病毒 H7亚型
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应用多重反转录PCR技术检测病毒性呼吸道感染 被引量:6
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作者 冯东举 周锋 +3 位作者 周世新 孙华 马春玲 姚堃 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期452-454,525,共4页
目的为了寻求呼吸道感染病毒的快速诊断并指导治疗,建立一种多重反转录PCR体系。方法分别设计针对肠病毒、腺病毒、乙型流感病毒和甲型流感病毒标准株的特异性引物,采用多重反转录PCR检测4种病毒。结果应用此多重反转录PCR系统可以特异... 目的为了寻求呼吸道感染病毒的快速诊断并指导治疗,建立一种多重反转录PCR体系。方法分别设计针对肠病毒、腺病毒、乙型流感病毒和甲型流感病毒标准株的特异性引物,采用多重反转录PCR检测4种病毒。结果应用此多重反转录PCR系统可以特异的同时检测到同一模板中的肠病毒、腺病毒、甲型流感病毒和乙型流感病毒。通过用多重反转录PCR和单一PCR对36份临床标本的检测相比较,结果表明多重反转录PCR的检测与单一PCR的检测结果是一致的。结论通过与单一的PCR对比,证明该多重反转录PCR系统可替代单一的PCR用于肠病毒、腺病毒、甲型流感病毒和乙型流感病毒引起的呼吸道感染的快速诊断。 展开更多
关键词 多重反转录聚合酶链式反应 肠病毒 腺病毒 甲型流感病毒 乙型流感病毒
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鉴别猪瘟强毒和弱毒的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)检测方法的建立 被引量:26
6
作者 李艳 仇华吉 +5 位作者 王秀荣 张守发 朱庆虎 李娜 李国新 童光志 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1907-1914,共8页
【目的】建立一种能区分猪瘟病毒(classicalswinefever,CSFV)强毒和弱毒的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)检测方法。【方法】根据GenBank上登录的现有CSFV基因组全序列,选择高度保守区设计了一对CSFV通用引物,并在该对引物跨... 【目的】建立一种能区分猪瘟病毒(classicalswinefever,CSFV)强毒和弱毒的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)检测方法。【方法】根据GenBank上登录的现有CSFV基因组全序列,选择高度保守区设计了一对CSFV通用引物,并在该对引物跨越区域的内部设计了猪瘟兔化弱毒疫苗和强毒特异性引物,建立了一种能区分猪瘟强毒和弱毒的RT-nPCR鉴别诊断方法。【结果】应用该方法从猪瘟兔化弱毒疫苗和石门强毒株基因组中扩增出了大小分别为447和343bp的一条特异性片段,从两种病毒基因组混合物中扩增出了大小为447和343bp的两条特异性片段,但对牛病毒性腹泻病毒和其它常见猪源病毒细胞培养物以及正常细胞基因组进行检测时均为阴性。该方法可以检测出0.04pg的CSFVRNA。对从黑龙江省采集的15份疑似猪瘟病料进行了检测,结果表明,有14份类似猪瘟强毒,1份类似弱毒疫苗。限制性片段长度多态性和种系发生分析证实了RT-nPCR的检测结果。【结论】本研究建立的RT-nPCR可以有效区分猪瘟强毒和弱毒,减少了未感染的免疫猪被误杀的可能性。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 反转录-复合套式聚合酶链式反应 限制性片段长度多态性分析
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上海市儿童下呼吸道感染常见病毒诊断方法比较 被引量:24
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作者 王春 赵百慧 +1 位作者 张泓 张曦 《检验医学》 CAS 北大核心 2011年第9期589-592,共4页
目的应用直接免疫荧光法(DFA)和多重逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对呼吸道感染患儿鼻咽分泌物的常见病毒进行检测,比较2种方法的符合率并评估其临床应用价值。方法选取急性呼吸道感染患儿鼻咽分泌物540例,分别用DFA和多重RT-PCR进行检测... 目的应用直接免疫荧光法(DFA)和多重逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对呼吸道感染患儿鼻咽分泌物的常见病毒进行检测,比较2种方法的符合率并评估其临床应用价值。方法选取急性呼吸道感染患儿鼻咽分泌物540例,分别用DFA和多重RT-PCR进行检测,分析其结果。结果 DFA检测阳性率为43.9%(237/540),多重RT-PCR检测阳性率为55.7%(301/540),多重RT-PCR阳性检出率显著高于DFA的阳性检出率(χ2=29.093,P<0.01)。DFA和多重RT-PCR同时阳性163例,DFA阳性而多重RT-PCR阴性74例,多重RT-PCR阳性而DFA阴性138例,DFA和多重RT-PCR同时阴性165例。DFA和多重RT-PCR同时为阳性的163例标本中,有15例标本两者检测结果不一致,符合率为91.0%。结论 DFA快速、简便、特异性及敏感性高,适用于临床检测。多重RT-PCR的敏感性高,检测病毒谱广,且可以做亚型鉴定,适用于呼吸道病毒流行病学的调查。 展开更多
关键词 呼吸道病毒感染 直接免疫荧光法 多重逆转录聚合酶链反应 儿童
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流感病毒快速检测方法特异性和敏感性研究 被引量:8
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作者 尤凤兴 居丽雯 +5 位作者 张敬平 施强 马广源 吉杏生 吴家林 凌霞 《检验医学》 CAS 北大核心 2009年第8期598-601,共4页
目的比较多重逆转录聚合酶链反应(mRT—PCR)和胶体金法检测流感病毒的敏感性和特异性。方法采用mRT—PCR和胶体金法检测经细胞培养和红细胞凝集抑制试验(HI)鉴定为A/H1、A/H3、B型流感病毒的鼻咽拭标本78份,阴性鼻咽拭标本40份... 目的比较多重逆转录聚合酶链反应(mRT—PCR)和胶体金法检测流感病毒的敏感性和特异性。方法采用mRT—PCR和胶体金法检测经细胞培养和红细胞凝集抑制试验(HI)鉴定为A/H1、A/H3、B型流感病毒的鼻咽拭标本78份,阴性鼻咽拭标本40份,并对已稀释成10^1~10^5病毒半数感染量(TCID50)/0.1mL的3株H1、H3、B型流感病毒进行敏感性试验。结果toRT—PCR对A型流感病毒的检测敏感性为44.8%,特异性为97.5%;对B型流感病毒检测敏感性为20.0%,特异性为100.0%。胶体金法对A型流感病毒检测敏感性为44.8%,特异性为100.0%;对B型流感病毒检测敏感性为5.0%,特异性为97.5%。对经20代内狗肾细胞(MDCK)分离培养阳性的4份A/H1、4份A/H3和3份B型流感培养液,mRT—PCR和胶体金法检测的阳性符合率与型别符合率均为100.0%。mRT—PCR检测流感病毒敏感性为10^3TCID50/0.1mL;胶体金法检测的敏感性为10^3TCID50/0.1mL。结论toRT—PCR和胶体金法的敏感性与特异性无差异;mRT—PCR和胶体金法均可用于人群流感鼻咽拭标本流感病毒快速检测,特别是聚集性暴发流感患者,建议采样时标本数要适当放大2~3倍。mRT—PCR可进一步确定流感病毒的H1和H3亚型。 展开更多
关键词 流感病毒 分离 多重逆转录聚合酶链反应 胶体金法
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基于Nginx的负载均衡技术研究与优化 被引量:30
9
作者 戴伟 马明栋 王得玉 《计算机技术与发展》 2019年第3期77-80,共4页
随着互联网的普及和智能上网设备的高速发展,网络用户和业务量呈指数增长,热点事件的到来更是会引发网络节点的波动。传统的单一的网络服务器根本无法承担大量并发业务请求,因此服务器集群技术应运而生。为了能在服务器集群中合理分配业... 随着互联网的普及和智能上网设备的高速发展,网络用户和业务量呈指数增长,热点事件的到来更是会引发网络节点的波动。传统的单一的网络服务器根本无法承担大量并发业务请求,因此服务器集群技术应运而生。为了能在服务器集群中合理分配业务,使各个服务器都发挥应有的性能,负载均衡机制及均衡算法成为了关键。Nginx作为一款轻量级高并发的Web服务器,单机可以承受十万级的并发请求,而其模块化的设计,更是可以方便地配置为反向代理服务器,将请求分配给上游服务器。文中将分析Nginx的反向代理优势,通过对其自带的负载均衡算法进行分析,并优化出一种具有实时反馈能力的负载均衡算法。通过测试,改进后的算法分配更加合理,处理连接的速度也更加快速,满足了设计要求。 展开更多
关键词 NGINX 负载均衡 反向代理 IO复用 动态反馈 服务器集群
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多重聚合酶链反应和反向线性点杂交技术在常见呼吸道病毒检测中的应用 被引量:3
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作者 邵芳 王亚娟 +2 位作者 林影 谢正德 申昆玲 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第52期22-25,共4页
目的应用多重聚合酶链反应(mPCR)扩增基因技术和反向线性点杂交技术(RLB)相结合的方法从基因水平建立常见呼吸道病毒的检测方法。方法根据常见的7种呼吸道病毒包括流感病毒A,副流感病毒1、2、3型,腺病毒1型,呼吸道合胞病毒A、B型的特点... 目的应用多重聚合酶链反应(mPCR)扩增基因技术和反向线性点杂交技术(RLB)相结合的方法从基因水平建立常见呼吸道病毒的检测方法。方法根据常见的7种呼吸道病毒包括流感病毒A,副流感病毒1、2、3型,腺病毒1型,呼吸道合胞病毒A、B型的特点设计特异性的引物和探针,应用mPCR/RLB技术对常见的7种病毒株进行检测,建立研究方法。结果使用特异性引物对7种病毒株的基因进行mPCR,均得到相应的目标扩增产物,扩增条带清晰,与目标片段一致。7种病毒株的PCR产物与特异性探针杂交,均可得到清晰的杂交模式,并且彼此之间没有交叉反应,与作为阳性对照的细菌标准菌株亦没有交叉反应。结论 mPCR和RLB相结合是从基因水平检测常见呼吸道病毒的方法 。 展开更多
关键词 呼吸道病毒 反向线性点杂交 多重聚合酶链反应
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基于虚拟时间反转镜的水声OFDM信道均衡 被引量:12
11
作者 尹艳玲 乔钢 刘凇佐 《通信学报》 EI CSCD 北大核心 2015年第1期90-99,共10页
针对水声信道对正交频分复用(OFDM)系统带来的符号间干扰(ISI)问题,提出了虚拟时间反转镜(VTRM)信道均衡算法,该算法具有时间压缩特性和频域相位共轭特性,可以有效缩短信道长度,减小多途信道带来的相位畸变,采用匹配追踪(MP)算法估计信... 针对水声信道对正交频分复用(OFDM)系统带来的符号间干扰(ISI)问题,提出了虚拟时间反转镜(VTRM)信道均衡算法,该算法具有时间压缩特性和频域相位共轭特性,可以有效缩短信道长度,减小多途信道带来的相位畸变,采用匹配追踪(MP)算法估计信道冲激响应,可以精确地估计出水声信道的幅度、时延和相位信息,为虚拟时反信道均衡提供准确的信道信息,改进了传统匹配相关信道估计方法估计精度低、无法估计信道相位信息的缺点。仿真、水池和湖上实验结果表明,OFDM水声通信系统中,VTRM信道均衡技术性能优于被动时反镜(PTRM)信道均衡和最小平方(LS)信道均衡。 展开更多
关键词 虚拟时间反转镜 信道均衡 匹配追踪 正交频分复用
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PCR方法检测食品中沙门氏菌研究进展 被引量:16
12
作者 汪月霞 赵会杰 赵一丹 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第24期11435-11436,11445,共3页
对目前出现的一些具有代表性的食品中沙门氏菌的PCR检测方法做一综述,由此可以得出,目前开发出的检测食品中沙门氏菌的PCR方法正逐渐以多种PCR方法相结合、多重PCR技术以及食品样品预处理方法等为主,以开发出更快速、灵敏、简便、实时... 对目前出现的一些具有代表性的食品中沙门氏菌的PCR检测方法做一综述,由此可以得出,目前开发出的检测食品中沙门氏菌的PCR方法正逐渐以多种PCR方法相结合、多重PCR技术以及食品样品预处理方法等为主,以开发出更快速、灵敏、简便、实时、低廉的食源性沙门氏菌PCR检测方法。 展开更多
关键词 沙门氏菌 多重逆转录PCR 毛细管PCR 荧光定量PCR DNA环介导的恒温扩增法
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不同原理的PCR方法用于地中海贫血产前诊断的验证应用 被引量:9
13
作者 肖奇志 王格 +3 位作者 李恋湘 李磊 谢建红 周玉球 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第6期994-996,共3页
目的:评估两种不同技术原理的PCR方法用于地中海贫血(下称"地贫")产前诊断的必要性和可行性。方法 :采用双盲法,对509份产前诊断标本分别采用单管多重PCR法(single-tube multiplex PCR,STMP)+反向点杂交法(reverse dot blot,R... 目的:评估两种不同技术原理的PCR方法用于地中海贫血(下称"地贫")产前诊断的必要性和可行性。方法 :采用双盲法,对509份产前诊断标本分别采用单管多重PCR法(single-tube multiplex PCR,STMP)+反向点杂交法(reverse dot blot,RDB)、探针熔解曲线法(probe melting curve assay,PMCA)检测常见α-地贫和β-地贫基因突变。两种方法所得结果不一致或少见类型地贫突变时,采用DNA测序分析法确诊。所有产前诊断结果均进行验证或随访。结果 :经STMP+RDB、PMCA检测突变谱不同,α-地贫和β-地贫各有1例结果不同。另STMP+RDB检测灵敏度高于PMCA,其差异性在标本受母血污染时有提示作用。结论:两种不同技术原理的PCR方法进行地贫产前诊断,是必要和可行的,两者具有互补性,可确保结果的可靠性和减少单一技术的缺陷。 展开更多
关键词 地中海贫血 多重PCR 反向点杂交 探针熔解曲线 产前诊断
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GeXP多重RT-PCR技术在呼吸道病毒检测中的应用 被引量:3
14
作者 张允奇 王琼 +2 位作者 张银辉 何涛君 陆学东 《现代检验医学杂志》 CAS 2016年第2期94-98,102,共6页
目的应用GeXP多重基因表达遗传分析系统多重RT-PCR技术检测急性呼吸道感染儿童呼吸道样本中的呼吸道病毒并探讨其在儿童呼吸道感染病毒检测中的价值。方法回顾性检测2010年7月~2012年6月期间因疑似急性呼吸道感染就诊的1800名儿科患者... 目的应用GeXP多重基因表达遗传分析系统多重RT-PCR技术检测急性呼吸道感染儿童呼吸道样本中的呼吸道病毒并探讨其在儿童呼吸道感染病毒检测中的价值。方法回顾性检测2010年7月~2012年6月期间因疑似急性呼吸道感染就诊的1800名儿科患者的呼吸道样本,应用GeXP多重基因表达遗传分析系统多重RT-PCR技术对呼吸道合胞病毒、鼻病毒等多种呼吸道病毒进行检测。采用SPSS13.0统计软件进行统计学分析。结果GeXP多重RT—PCR方法检测到样本中的10种呼吸道病毒。样本中共有67.33%(1212/1800)的样本至少有一种病毒检测结果为阳性。这1212份病毒阳性标本中,人类鼻病毒(HRV)阳性最多,为375份,阳性率20.83%;其次为呼吸道合胞病毒(RSV)249份,阳性率13.83%;其他依次为人类腺病毒(HADV)、人类副流感病毒3(HPIV-3)、人类博卡病毒(HBoV)、甲型流感(InfA)、人类副流感病毒4(HPIV-4)、流感C(InfC)、人类偏肺病毒(hMPV)和乙型流感病毒(InfB);阳性率分别为8.89%,6.5%,5.3%,5.3%,3.3%,1.5%,1.11%和0.67%。不同性别间患儿呼吸道病毒阳性率差异无统计学意义(P〉0.05)。研究中观察到13.5%(243/1800)的病例同时感染两种或两种以上的病毒,其中两种病毒的混合感染为210例(11.67%),3种病毒混合感染为33例(1.83%)。呼吸道病毒的感染率存在季节差异,RSV大多在春季和冬季流行,HBoV,hMPV,InfA,InfB和HPIV-3大多是在春季流行,而HADV和HPIV-4主要在夏季流行,InfC大多是在秋季流行。结论GeXP分析系统多重RT-PCR方法是一个快速、高通量、高灵敏度且特异度强的检测分析方法,可用于急性呼吸道感染临床分子诊断和流行病学研究。 展开更多
关键词 GeXP系统 多重RT-PCR 呼吸道病毒 流行病学
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多重反转录聚合酶链反应快速检测鉴别H9亚型禽流感病毒方法的建立 被引量:3
15
作者 庞耀珊 谢芝勋 +2 位作者 邓显文 唐小飞 刘加波 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期858-860,共3页
目的参考AIV M基因和HA基因序列,设计了两对引物。其中XZ145-2和XZ146为通用引物,可以检测所有亚型AIV,跨幅244 bp;XZ H9-1和XZ H9-2为H9亚型特异性引物,跨幅488 bp。方法利用这两对引物,通过对多重RT-PCR扩增条件的优化,成功建立了快... 目的参考AIV M基因和HA基因序列,设计了两对引物。其中XZ145-2和XZ146为通用引物,可以检测所有亚型AIV,跨幅244 bp;XZ H9-1和XZ H9-2为H9亚型特异性引物,跨幅488 bp。方法利用这两对引物,通过对多重RT-PCR扩增条件的优化,成功建立了快速检测鉴别H9亚型AIV的多重RT-PCR技术。结果与结论特异性和敏感性试验结果表明,该技术对H9亚型AIV同时扩增出两条大小分别为244 bp和488 bp的cDNA片段,对其他亚型AIV只扩增出244bp的cDNA片段,对其他常见禽病病原无特异性扩增,结果为阴性;该多重RT-PCR的通用引物对AIV RNA的最低检出量为1pg,对H9亚型RNA的最低检出量为10 pg。 展开更多
关键词 多重反转录聚合酶链反应 禽流感病毒 H9亚型
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多重PCR/反向线点杂交(RLB)检测细菌性脑膜炎病原体的研究 被引量:7
16
作者 严冰 陈婷 赵晶 《实验与检验医学》 CAS 2011年第4期347-349,共3页
目的建立快速、高通量的多重PCR/反向线点杂交(RLB)的方法检测3种细菌性脑膜炎病原体--肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和脑膜炎奈瑟菌。方法针对肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和脑膜炎奈瑟菌的特异性基因序列设计引物和相应的特异性探针,优化多重... 目的建立快速、高通量的多重PCR/反向线点杂交(RLB)的方法检测3种细菌性脑膜炎病原体--肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和脑膜炎奈瑟菌。方法针对肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和脑膜炎奈瑟菌的特异性基因序列设计引物和相应的特异性探针,优化多重PCR/RLB检测中的引物浓度、dNTP浓度、探针的浓度等的条件。结果多重PCR/RLB检测对肺炎链球菌DNA最低检测极限可达6.2×10-1ng/μl,对流感嗜血杆菌DNA最低检测极限可达8.5×10-8ng/μl,对脑膜炎奈瑟菌DNA最低检测极限可达8.3×10-8ng/μl。结论多重PCR/RLB检测体系能够正确的鉴定3种细菌性脑膜炎病原体,用于临床样本的高通量筛查细菌性脑膜炎病原体,特异性好,灵敏度高。 展开更多
关键词 多重PCR 反向线点杂交 细菌性脑膜炎 检测
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检测和鉴别犬瘟热病毒强、弱毒株的复合反转录-套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)的建立及初步应用 被引量:5
17
作者 司微 崔尚金 +1 位作者 张洪英 刘立奎 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期222-226,共5页
根据GenBank上登录的犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)基因组全序列,选择CDV强、弱毒株间有区别保守区设计了一对通用引物P1和P4,并在该对引物跨越区域的内部设计了CDV强毒株特异性引物P2及弱毒株特异性引物P3,用引物P1/P4进行RT... 根据GenBank上登录的犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)基因组全序列,选择CDV强、弱毒株间有区别保守区设计了一对通用引物P1和P4,并在该对引物跨越区域的内部设计了CDV强毒株特异性引物P2及弱毒株特异性引物P3,用引物P1/P4进行RT-PCR,然后用引物P2/P3/P4进行复合套式PCR,建立了一种能区分CDV强、弱毒株的复合反转录-套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)的鉴别诊断方法。应用该方法从CDV强、弱毒株的基因组中分别扩增出了大小为247bp和177bp的特异性片段,从两种病毒基因组混合物中扩增出了大小为247bp和177bp的两条特异性片段,与犬细小病毒、犬腺病毒、犬冠状病毒、狂犬病病毒、新城疫病毒的细胞培养物以及正常细胞对照组进行复合RT-nPCR扩增时均为阴性。对从黑龙江省和吉林省采集的20份疑似CDV病料进行的检测结果表明,有15份类似CDV强毒,5份类似CDV弱毒。本研究建立的复合RT-nPCR可以有效检测CDV感染,能够将强、弱毒株区分开,可用于临床快速检测、流行病学监测以及追踪疫苗免疫效果等。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 复合反转录-套式聚合酶链式反应 鉴别诊断
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猪瘟病毒3种检测方法的比较 被引量:7
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作者 张艳英 高桂生 +4 位作者 高光平 史秋梅 张贵贤 田和杰 李秋艳 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第3期205-209,共5页
本研究旨在比较3种检测猪瘟病毒方法的优缺点。应用反转录—复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)、荧光抗体法、胶体金免疫层析试纸条3种方法,分别对30份疑似猪瘟病料中的猪瘟病毒进行检测。试验结果显示,RT-nPCR方法检出阳性样品数为11份... 本研究旨在比较3种检测猪瘟病毒方法的优缺点。应用反转录—复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)、荧光抗体法、胶体金免疫层析试纸条3种方法,分别对30份疑似猪瘟病料中的猪瘟病毒进行检测。试验结果显示,RT-nPCR方法检出阳性样品数为11份,荧光抗体法为13份,胶体金免疫层析试纸条为8份;3种方法检测全为阳性8份,全为阴性17份。试验结果表明,荧光抗体检测法所需时间较短,但需要经验比较丰富人员来判定结果,且存在假阳性结果,敏感性比较差;胶体金免疫层析试纸条诊断方法最大的优点就是简便快速,且适合基层的应用,该方法的不足之处就是敏感性较低;RT-nPCR检测法具有快速、敏感等优点,但需一定仪器设备及成熟的技术方法。RT-nPCR还能区分待检样品为疫苗毒株(弱毒)还是野毒株感染(强毒),这是其他2种方法所不可比拟的。 展开更多
关键词 猪瘟 荧光抗体法 反转录—复合套式聚合酶链式反应 胶体金免疫层析试纸条
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多重逆转录聚合酶链反应和半巢式多重聚合酶链反应快速检出含漱液中的乙型流感病毒 被引量:4
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作者 张严峻 卢亦愚 +1 位作者 严菊英 周敏 《中国卫生检验杂志》 CAS 2001年第1期6-8,共3页
目的建立特异敏感的快速检测含漱液中的流感病毒的分子生物学方法。方法用多重逆转录聚合酶链反应和半巢式多重聚合酶链反应扩增甲1、甲3和乙型流感病毒HA基因的HA1片段,得到各病毒与特异性大小的扩增产物的对应关系。用同样的... 目的建立特异敏感的快速检测含漱液中的流感病毒的分子生物学方法。方法用多重逆转录聚合酶链反应和半巢式多重聚合酶链反应扩增甲1、甲3和乙型流感病毒HA基因的HA1片段,得到各病毒与特异性大小的扩增产物的对应关系。用同样的方法扩增含漱液中流感病毒的HA基因的HA1片段。根据这对应关系检测含漱液中的流感病毒。结果以流感病毒的HA基因为模板设计的三对引物,用多重逆转录聚合酶链反应能特异性地扩增出942bp、1117bp和 751bp的核酸片段,它们分别和甲1、甲3和乙型流感病毒有稳定对应关系。用多重逆转录聚合酶链反应和半巢式多重聚合酶链反应扩增含漱液中流感病毒HA基因的HA1片段,根据扩增产物的大小检出含漱液中的乙型流感病毒。结论 多重逆转录聚合酶链反应和半巢式多重聚合酶链反应能特异敏感地检出含漱液中的乙型流感病毒。 展开更多
关键词 含嗽液 乙型流感病毒 血凝素基因 多重逆转录聚合酶链反应 半巢式多重聚合酶链反应
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面向FPGA的低功耗多路选择器设计方法 被引量:3
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作者 李列文 桂卫华 +1 位作者 阳春华 胡小龙 《中南大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1496-1502,共7页
针对现场可编程门阵列(FPGA)因集成度与速度提高引起的功耗问题,提出一种适合于FPGA的低功耗多路选择器设计方法。该方法基于FPGA中被使用的多路选择器内存在大量闲置晶体管这一现象,采用反向衬底偏置技术对被使用多路选择器中闲置晶体... 针对现场可编程门阵列(FPGA)因集成度与速度提高引起的功耗问题,提出一种适合于FPGA的低功耗多路选择器设计方法。该方法基于FPGA中被使用的多路选择器内存在大量闲置晶体管这一现象,采用反向衬底偏置技术对被使用多路选择器中闲置晶体管的泄漏电流进行优化。仿真结果表明:与传统结构多路选择器相比,在保证其他性能的前提下,采用该方法设计的多路选择器泄漏功耗可降低约28.97%。此外,该方法也可应用于FPGA中未被使用多路选择器泄漏电流的优化,可以进一步大幅度降低FPGA的静态功耗。 展开更多
关键词 低功耗 多路选择器 反向衬底偏置技术 现场可编程门阵列
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