癫痫发作对小鼠海马内Munc-18蛋白分布的影响

目的 Munc-18在中枢神经系统递质释放过程中具有重要作用,其控制着突触囊泡释放步骤的每一个环节。Munc-18功能异常与癫痫发病相关。本文主要探讨癫痫发作是否对小鼠海马内Munc-18蛋白的分布产生影响。方法将18只雄性成年昆明鼠分为三组,生理盐水组和癫痫组分别向腹腔注射生理盐水和海人藻酸(10mg/kg)溶液,对照组不做处理,观察小鼠的行为变化。观察结束后小鼠全部处死取脑,冰冻切片行免疫组织化学染色后观察Munc-18蛋白和c-Fos蛋白的表达情况。结果注射海人藻酸30min后小鼠癫痫样发作,首先出现胡须和嘴部抽动,接着翘尾、甩尾、点头、单侧上肢抽搐,达到4级标准。与对照组和生理盐水组比较,癫痫组小鼠海马区域的Munc-18蛋白分布减少同时伴有c-Fos蛋白的表达增加,以CA3和齿状回区域更加明显,差别具有统计学差异。结论癫痫能够导致Munc-18蛋白在海马区域分布减少,同时使该区域的神经兴奋性增高。

β-淀粉样蛋白寡聚体对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞Munc-18表达的调节

为了观察阿尔茨海默病(AD)起始因素β-淀粉样蛋白(Aβ)对Munc-18表达的调节作用,采用Zn2+诱导制备Aβ寡聚体,分化的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞经纳摩尔浓度Aβ寡聚体作用后用免疫印迹和流式细胞术的方法检测SH-SY5Y细胞的Munc-18蛋白水平,用MTT法分析纳摩尔浓度Aβ寡聚体的细胞毒性。结果发现,1nmol/L Aβ寡聚体作用1天后,SH-SY5Y细胞的Munc-18蛋白水平明显下调,随后逐渐增加。高浓度的Aβ寡聚体也有相似的作用效应,但抑制Munc-18蛋白表达的效应更明显。另外,相同浓度Aβ单体对Munc-18表达没有明显的影响,纳摩尔浓度的Aβ寡聚体也没有对细胞代谢产生显著的抑制。结果表明,纳摩尔水平Aβ寡聚体对Munc-18的表达有调节作用。