WIF-1在COPD合并骨骼肌萎缩大鼠中的表达及其与血清炎症因子、Atrogin-1/MuRF-1蛋白水平的关系

目的探讨WIF-1在慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并骨骼肌萎缩大鼠中的表达及其与血清炎症因子、Atrogin-1/MuRF-1蛋白水平的关系。方法将30只SD大鼠按照随机数字表法分为COPD组(仅建立COPD成功的大鼠,n=11)、COPD合并骨骼肌萎缩组(COPD合并营养不良骨骼肌萎缩大鼠,n=9)和对照组(未建立动物模型的健康大鼠,n=10),分别给予相应的处理。采用酶联免疫吸附试验法检测3组大鼠的血清白细胞介素(IL)-6、IL-8及肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;苏木精-伊红染色观察肺组织及骨骼肌腓肠肌组织形态;免疫组织化学检测骨骼肌组织中WIF-1细胞阳性表达率;采用蛋白质印迹法检测骨骼肌组织中Atrogin-1、MuRF-1蛋白表达;Pearson法分析WIF-1与Atrogin-1、MuRF-1相关性。结果与对照组相比,COPD组大鼠IL-6、IL-8及TNF-α水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与COPD组相比,COPD合并骨骼肌萎缩组大鼠IL-6、IL-8及TNF-α水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,COPD组大鼠WIF-1细胞阳性表达率较高,但差异无统计学意义(P>0.05);与COPD组相比,COPD合并骨骼肌萎缩组大鼠WIF-1细胞阳性表达率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,COPD组大鼠Atrogin-1、MuRF-1蛋白水平增加,但差异无统计学意义(P>0.05);与COPD组相比,COPD合并骨骼肌萎缩组大鼠Atrogin-1、MuRF-1蛋白水平均明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。WIF-1与Atrogin-1呈正相关(r=0.760,P<0.001),WIF-1与MuRF-1无相关性(r=0.149,P=0.433)。结论WIF-1基因在COPD合并骨骼肌萎缩大鼠中阳性表达显著升高,具有促炎症因子反应的作用,同时可影响肌肉萎缩相关蛋白而促进疾病进展。

外源性肿瘤坏死因子-α刺激大鼠心脏MuRF-1表达

目的:研究外源性肿瘤坏死因子-α(Tumornecrosis factoralpha,TNF-α)对大鼠心脏肌肉环指蛋白-1(Musclering finger-1,MuRF-1)表达的影响。方法:将造模成功且24 h后仍存活的40只大鼠随机分为:①心肌梗死(Myocardial infarction,MI)+TNF-α组:结扎左冠状动脉前降支(Left anterior desending,LAD),腹腔内注射TNF-α100 ng/(g.d)(溶于2 ml生理盐水);②MI组:结扎LAD,腹腔内注射2 ml/d生理盐水;③假手术(Sham)+TNF-α组:假手术后,腹腔内注射TNF-α100 ng/(g.d)(溶于2 ml生理盐水);④Sham组:手术过程同心肌梗死组,但只穿线通过LAD支不打结,腹腔内注射2 ml/d生理盐水。所有腹腔内注射持续7周后,取心肌组织进行HE染色及电镜观察心脏结构变化,荧光定量PCR及Western blot检测各组大鼠左心室心肌MuRF-1的mRNA及蛋白质表达。结果:与MI组及TNF-α组相比,MI+TNF-α组心肌组织学结构及超微结构明显受损,大量炎症细胞浸润,心肌纤维断裂,疤痕组织形成,细胞核裂解,线粒体增生、空泡化。MI组MuRF-1的mRNA及蛋白质水平分别为1.81±0.8和0.9±0.25,Sham+TNF-α组为1.534±0.96和1.12±0.76,较Sham组明显升高(0.84±0.2和0.27±0.15),P<0.05;与MI组相比,MI+TNF-α组则进一步升高(分别为3.6±1.5和1.71±0.23),P<0.05和P<0.01。结论:外源性炎症因子TNF-α能够诱导心脏E3泛素连接酶MuRF-1表达,在心肌损伤中起了重要作用。

脑缺血再灌注损伤大鼠患侧骨骼肌早期形态及atrogin-1、 MuRF-1 mRNA表达的变化

目的:观察大鼠脑缺血再灌注损伤后患侧骨骼肌早期形态学变化及肌萎缩素1(atrogin-1)和肌环指蛋白1(MuRF-1)mRNA表达水平的变化。方法:60只雄性Wistar大鼠,10只为假手术对照组(A组),其余50只采用Longa线栓法建立大鼠左侧大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,其中30只造模成功大鼠随机分为B、C、D组,每组10只。B组为造模成功后1d组,C组为造模成功后4d组,D组为造模成功后7d组。应用Bederson评分评价大鼠的神经损伤后的恢复情况;分别获取A、B、C、D四组右侧肱二头肌,对各组通过HE染色检测肌纤维横截面积;通过荧光定量RT-PCR观察大鼠患侧骨骼肌中atrogin-1和MuRF-1 mRNA表达的变化。结果:B、C、D组大鼠Bederson评分明显高于对照组A组(P<0.05);B、C、D组大鼠间Bederson评分差异无显著性(P>0.05)。患侧骨骼肌HE染色显示A、B、C组肌纤维横截面积两两比较,差异无显著性意义(P>0.05);D组大鼠患侧骨骼肌肌纤维横截面积分别与其余3组相比,差异均有显著性意义(P<0.05)。B、C、D组大鼠患侧atrogin-1和MuRF-1 mRNA的表达水平分别与对照组相比,差异均有显著性意义(P<0.05);B组与C组相比较差异无显著(P>0.05);D组大鼠分别与B、C组相比,差异均有显著性意义(P<0.05)。结论:脑缺血再灌注损伤大鼠早期患侧骨骼肌形态学即发生变化,其机制可能与Atrogin-1和MuRF-1 mRNA在骨骼肌中高表达,泛素连接酶蛋白降解通路被激活有关。

保元解毒汤对癌性恶病质小鼠骨骼肌蛋白质降解及MAFbx、MuRF-1基因表达的影响

目的研究保元解毒汤对肺癌恶病质小鼠骨骼肌蛋白质降解及MAFbx、MuRF-1基因表达的影响,探讨其干预骨骼肌蛋白质代谢的可能机制。方法 C57BL/6小鼠皮下接种Lewis肺癌细胞株复制肺癌恶病质小鼠模型。40只小鼠随机分为正常对照组、模型组、保元解毒汤组和醋酸甲羟孕酮组。测定小鼠腓肠肌质量;高效液相色谱法检测腓肠肌3-甲基组氨酸(3-MH)含量;RT-PCR法测定腓肠肌MAFbx、MuRF-1mRNA表达。结果与正常对照组比较,模型组小鼠腓肠肌质量显著降低(P<0.05),肌组织内3-MH含量明显升高(P<0.05),MAFbx、MuRF-1 mRNA表达显著升高(P<0.05);与模型组和醋酸甲羟孕酮组比较,保元解毒汤组小鼠腓肠肌质量显著增加(P<0.05),肌组织内3-MH含量明显降低(P<0.05),MAFbx、MuRF-1 mRNA表达显著降低(P<0.05)。结论保元解毒汤能够改善癌性恶病质小鼠骨骼肌萎缩,其机制可能与MAFbx、MuRF-1基因表达下调,骨骼肌收缩蛋白降解减少相关。

大鼠失神经腓肠肌细胞内Fox03a及MuRF-1的表达规律

目的探讨失神经大鼠腓肠肌细胞中叉头蛋白转录因子3a（fork-head protein，FoxO3a）及MuRF-1的表达规律。方法72只Wistar大鼠随机分为12组，每组6只，切断大鼠右侧坐骨神经，左侧行假手术，分别于术后0、1、2、3、4、5、6、7、10、14、21、28d各处死一组大鼠，取右侧腓肠肌，于-70℃冰箱保存。分别使用实时荧光定量PCR法和Western Blot法对其中的FoxO3a和MuRF-1的基因和蛋白进行检测。结果MuRF-1的基因表达在失神经第4天达到峰值（18.12倍），失神经14d后下降至正常。FoxO3a的基因表达在失神经第6天达到峰值（7．06倍），而后虽缓慢下降，但仍高表达。FoxO3a和MuRF-1的蛋白含量随失神经时间的延长逐渐升高。结论FoxO3a和MuRF-1的表达和蛋白改变与失神经骨骼肌萎缩关系密切，可以作为药物治疗和基因治疗的靶点之一。

温肾活血方对心衰大鼠运动耐量及Airogln-1MAFbx和Murf-1 mRNA表达的影响

目的研究温肾活血方对心衰大鼠运动耐量的影响及其对心肌细胞Airogln-1MAFbx和Murf-1 mRNA表达的影响。方法 wistar成年大鼠60只随机分为模型组、假手术组、米力农组及温肾活血方高、中、低剂量组。采用腹主动脉缩窄术构建心衰模型,以EF≤45%作为造模成功标准,温肾活血方高、中、低计量组分别给予高、中、低浓度的中药汤剂灌胃,模型组与假手术组给予同样体积生理盐水灌胃,米力农组给予腹腔注射米力农,喂养四周后进行心脏彩超检查,力竭游泳实验。取心肌及腓肠肌细胞,通过TUNEL检测计算细胞凋亡率,RT-PCR检测Airogln-1MAFbx和Murf-1 mRNA的表达。结果温肾活血方高、中剂量组心脏彩超指标(LVDS、LVDD、LVSV、LVEF、LVFS、LVCO、LVPWS、LVPWD)较模型组明显改善(P<0.01),与米力农组无明显差异(P>0.05)。温肾活血方高、中剂量组力竭游泳时间较模型组明显延长(P<0.01),与米力农组无明显差异(P>0.05)。温肾活血方高、中剂量组细胞凋亡率较模型组明显降低(P<0.01),与米力农组无明显差异(P>0.05),Airogln-1MAFbx和Murf-1 mRNA的表达较模型组、米力农组明显减少(P<0.01)。结论温肾活血方能改善心衰大鼠心功能及运动耐量,其机制可能是通过降低Airogln-1MAFbx和Murf-1 mRNA表达,减少心肌及骨骼肌细胞凋亡来实现的。

RNA干涉介导大鼠成肌细胞系L6中MuRF-1与FOXO3a基因表达变化的研究

目的探讨RNAi技术体外抑制MuRF-1或FOXO3a基因表达的效果,为RNAi介导的失神经骨骼肌萎缩基因治疗奠定基础。方法体外培养大鼠成肌细胞系L6,将MuRF-1和(或)FOXO3a siRNA重组质粒在Lipofectamine 2000介导下转染,优化与检测系统的转染效率;将2μg MuRF-1或FOXO3a基因siRNA重组质粒转染L6,转染后48 h与72 h,采用实时定量PCR检测siRNA重组质粒对MuRF-1和FOXO3a的mRNA的抑制效果,使用Western印迹检测siRNA重组质粒对MuRF-1和FOXO3a蛋白水平的抑制效果。用单因素方差分析方法和LSD法进行组间比较。结果(1)质粒转染后24 h,荧光显微镜下可见细胞中有大量明亮的绿色荧光表达,显示系统有较高的转染效率。(2)实时定量PCR分析结果显示:MuRF-1与FOXO3a各自的siRNA重组质粒转染后48 h,二者干扰序列在mRNA水平分别明显抑制了MuRF-1和FOXO3a的表达,抑制率达67﹪和54﹪,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05),联合MuRF-1与FOXO3a两基因siRNA重组质粒转染后48 h,干扰序列在mRNA水平明显抑制了MuRF-1及FOXO3a的表达,抑制率达61﹪及58﹪,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);转染后72 h,MuRF-1与FOXO3a各自的siRNA重组质粒干扰序列对MuRF-1和FOXO3a的mRNA的抑制率分别达79﹪和81﹪,联合MuRF-1与FOXO3a两基因siRNA重组质粒干扰序列对MuRF-1和FOXO3a的mRNA的抑制率达77﹪及72﹪,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05),与48 h相比,抑制效应更为明显。(3)Western印迹灰度分析结果显示:转染后48 h,干扰序列MuRF-1明显抑制了MuRF-1蛋白的表达,抑制率达61﹪,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),干扰序列FOXO3a明显抑制了FOXO3a蛋白的表达,抑制率达46﹪,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),联合MuRF-1与FOXO3a两基因siRNA重组质粒干扰序列对MuRF-1和FOXO3a蛋白表达的抑制率达64﹪及42﹪,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);转染后72 h,干扰序列MuRF-1对MuRF-1蛋白表达的抑制率达70﹪,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),干扰序列FOXO3a对FOXO3a蛋白表达的抑制率达72﹪,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),联合MuRF-1与FOXO3a两基因siRNA重组质粒干扰序列对MuRF-1和FOXO3a蛋白表达的抑制率达73﹪及74﹪,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),与48 h相比,抑制效应更为明显,与对mRNA水平的影响一致。(4)MuRF-1的siRNA重组质粒与联合MuRF-1与FOXO3a两基因siRNA重组质粒干扰序列MuRF-1对MuRF-1的mRNA和蛋白抑制效果相比差异无统计学意义(P>0.05),FOXO3a的siRNA重组质粒与联合MuRF-1与FOXO3a两基因siRNA重组质粒干扰序列FOXO3a对FOXO3a的mRNA和蛋白抑制效果相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 (1)RNA干扰技术在体外能够明显抑制泛素连接酶MuRF-1和叉头蛋白转录因子FOXO3a基因的表达。(2)体外研究中MuRF-1与FOXO3a两基因siRNA重组质粒联合转染与各基因siRNA重组质粒单独转染其干扰序列对MuRF-1或FOXO3a的mRNA和蛋白抑制效果无差别。(3)活体实验中MuRF-1与FOXO3a两基因siRNA重组质粒联合转染与各基因siRNA重组质粒单独转染其干扰序列对MuRF-1或FOXO3a的mRNA和蛋白抑制效果尚不明确,这为RNAi介导的失神经骨骼肌萎缩基因治疗提供了一种新的思路。

中等强度持续运动和高强度间歇运动对小鼠肥胖性肌萎缩的干预作用

背景:肥胖已成为全球范围内的健康问题之一,伴随而来的是肥胖性肌萎缩等相关并发症。虽然运动已被报道可以改善多种肥胖相关疾病,但是其中鲜有关于运动模式的研究。目的:在相同运动距离的前提下,比较中等强度持续运动(moderate-intensity continuous training,MICT)与高强度间歇运动(high-intensity interval training,HIIT)两种运动模式对小鼠肥胖性肌萎缩的改善作用,为肥胖性肌萎缩的运动干预疗法的选择提供科学依据。方法:将72只C57BL/6雄性小鼠分为普通饮食组、普通饮食+MICT组,普通饮食+HIIT组、高脂饮食组、高脂饮食+MICT组、高脂饮食+HIIT组(每组12只),通过检测小鼠腓肠肌质量、腓肠肌指数、腓肠肌肌纤维横截面积、腓肠肌脂质沉积以及腓肠肌中肌萎缩标志基因Murf-1与Atrogin-1的表达量来评估8周不同运动模式的跑台训练对于长期高脂饮食引起的肌萎缩的改善作用。结果与结论:(1)与高脂饮食组相比,MICT和HIIT均改善了腓肠肌指数(MICT+18.8%vs.HIIT+17.6%,两种运动模式无显著差异)、肌纤维萎缩(MICT+15.5%vs.HIIT+13.7%,两种运动模式无显著差异)和腓肠肌脂质沉积(MICT-19.8%vs.HIIT-17.1%,两种运动模式无显著差异)。(2)在基因水平上,与高脂饮食组相比,MICT和HIIT运动模式均能显著下调Murf-1(MICT-62.4%vs.HIIT-52.6%,MICT显著优于HIIT,P<0.01)和Atrogin-1(MICT-43.3%vs.HIIT-29.8%,MICT显著优于HIIT,P<0.01)。(3)基于运动模式难度与舒适性的考量以及基因水平上的证据显示,MICT模式更适合用于肥胖性肌萎缩的运动干预。

不同运动方式对小鼠骨骼肌肌萎缩相关因子表达的影响

目的:运动能够引起骨骼肌肥大,防止肌萎缩的发生。骨骼肌在萎缩状态下泛素蛋白酶通路被激活,旨在通过检测蛋白降解途径中几个关键因子mRNA的表达,探讨不同的运动形式对抗骨骼肌萎缩的效果及机制。方法:选取21只雄性老年SAMP8小鼠,随机分为对照组(C)、耐力训练组(E)、抗阻训练组(R)。经过8周的训练后,检测小鼠右侧腓肠肌横截面积及MuRF-1、MAFbx、Caspase-3和IGF-1mRNA表达。结果:耐力训练和抗阻训练大鼠腓肠肌MuRF-1、MAFbx和Caspase-3 mRNA表达均显著高于对照组,但两训练组间无显著性差异;IGF-1mRNA的表达两训练组亦显著高于对照组,且抗阻训练组显著高于耐力训练组,抗阻训练组的腓肠肌纤维面积显著高于对照组和耐力训练组。结论:抗阻训练在维持肌质量方面效果优于耐力训练。两种不同的运动方式对腓肠肌质量影响之差异可能不仅仅是通过泛素蛋白酶体途径实现,还与IGF-1介导的骨骼肌再生有关。

保元解毒汤改善癌性恶病质模型小鼠骨骼肌萎缩的实验研究

目的:复制癌性恶病质模型,探讨保元解毒汤对癌性恶病质模型骨骼肌萎缩的影响。方法:用Lewis肺癌细胞株皮下接种C57BL/6小鼠,复制肺癌恶病质小鼠模型。40只小鼠随机分为四组:正常对照组、模型对照组、中药干预组和醋酸甲羟孕酮组。HE染色后测量小鼠肌纤维横径,免疫组化法测定小鼠腓肠肌中Atrogin-1、MuRF-1的蛋白表达水平。结果:①形态学观察结果与实验数据结果一致。②与正常对照组比较,模型对照组腓肠肌肌纤维横径明显减小(P<0.01);与模型对照组和醋酸甲羟孕酮组比较,中药干预组腓肠肌肌纤维横径明显增加(P<0.01);③与正常对照组比较,模型对照组Atrogin-1、MuRF-1的蛋白表达水平明显增强(P<0.01);与模型对照组和醋酸甲羟孕酮组比较,中药干预组肌肉中Atrogin-1、MuRF-1的蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:保元解毒汤可增加恶病质模型肌纤维横径,降低肌肉中Atrogin-1、MuRF-1的蛋白表达,改善恶病质骨骼肌萎缩。

华蟾素片对CT26结肠腺癌诱导恶病质小鼠肌肉萎缩的影响

目的探讨华蟾素片对CT26结肠腺癌诱导的恶病质小鼠净体质量、肌肉萎缩等方面的影响。方法建立CT26结肠腺癌细胞恶病质小鼠模型,24只小鼠随机分为正常组、单纯恶病质组、实验组。测定对比小鼠实验后净体质量、心肌、腓肠肌、附睾脂肪质量;RT-PCR法测定对比实验后腓肠肌MAFbx和Mu RF-1 mRNA表达。结果实验前后小鼠的净体质量的对比,单纯恶病质组下降最为明显,差异有统计学意义(t=4.055,P<0.05)。实验后单纯恶病质组小鼠腓肠肌MAFbx和Mu RF-1 mRNA表达为(97.68±6.21)、(36.77±3.74)mg,而实验组为(57.24±6.29)、(26.79±3.73)mg,两组相比实验组的骨骼肌萎缩明显缓解,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对于癌性恶病质小鼠模型,经华蟾素片的干预,能够明显减缓其肌肉的萎缩速度。

阿奇霉素联合不同剂量辛伐他汀对AECOPD合并肺动脉高压患者的效果分析

目的:分析阿奇霉素联合不同剂量辛伐他汀治疗急性加重期慢性阻塞性肺疾病(AECOPD)合并肺动脉高压(PH)患者的效果。方法:将2018年6月—2021年5月间于我院呼吸科与重症医学科住院的AECOPD合并PH患者136例按随机数字表法分为A、B、C、D四组,每组34例,四组均接受常规吸氧、化痰等对症治疗,其中A组和C组口服辛伐他汀片10mg,B组和D组服用剂量为20mg,在此基础上C组和D组联用阿奇霉素分散片,比较四组治疗前后6min步行实验(6MWT)、血清肌抑制素(MSTN)和肌肉环指蛋白-1(MuRF-1)水平,观察不良反应情况。结果:治疗后四组6MWT均明显提高,A组与B组、C组与D组6MWT比较无明显差异(P>0.05),C组6MWT明显高于A组,D组6MWT明显高于B组(P<0.05);治疗后四组MSTN、MuRF-1水平均明显降低,A组与B组、C组与D组MSTN、MuRF-1水平比较无明显差异(P>0.05),C组MSTN、MuRF-1水平明显低于A组,D组MSTN、MuRF-1水平明显低于B组(P<0.05);四组不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:阿奇霉素联合辛伐他汀能更好地降低AECOPD合并PH患者血清MSTN、MuRF-1水平,显著提高运动耐量,其效果与辛伐他汀剂量无明显量效关系。

RNAi技术体外沉默肌肉环指蛋白1的研究

目的探讨RNAi技术体外抑制大鼠肌肉环状指蛋白1(MuRF-1)基因表达的效果,筛选出针对MuRF-1基因最有效的siRNA重组质粒。方法根据大鼠MuRF-1基因的mRNA序列,设计4组干扰序列,即siRNA MuRF1-Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ,利用lipofactamine2000转染试剂将siRNA重组质粒转染大鼠成肌细胞系L6,于转染后48 h与72 h,采用实时定量PCR和Western blot或免疫印迹检测其对MuRF-1表达的抑制效果。MuRFl基因siRNA重组质粒瞬时转染后mRNA和蛋白质数据以x±s表示。对照组与四组实验组的比较用单因素方差分析;多个样本均数的两两比较用LSD检验。结果(1)实时定量PCR显示四组干扰质粒MuRF1-Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ对基因MuRF-1的mRNA的抑制率在转染后48 h分别为67﹪、31﹪、11﹪,20﹪,不同干扰序列的抑制效果有差异(F=4.527,P=0.024);72 h分别为79﹪、59﹪、50﹪和61﹪,不同干扰序列的抑制效果有差异(F=19.088,P<0.001),与48 h相比,抑制效应更为明显,但以siRNA MuRF1-Ⅰ的抑制效果最为明显(t=8.201,P<0.001)。(2)使用Western印迹灰度分析显示四组干扰序列对基因MuRF-1的蛋白的抑制率在转染后48 h分别为61﹪、40﹪、9﹪和15﹪,不同干扰序列的抑制效果有差异(F=4.286,P=0.028);72 h分别为70﹪、54﹪、30﹪和46﹪,不同干扰序列的抑制效果有差异(F=3.731,P=0.042);与48 h相比,MuRFl-Ⅰ、MuRFl-Ⅱ抑制效应与对照组相比有显著性差异(tⅠ=3.256,P=0.009;tⅡ=2.512,P=0.03),但MuRFl-Ⅲ和MuRFl-Ⅳ与对照组相比仍无显著性差异(P>0.05)。四对序列中,以siRNAMuRF1-Ⅰ的抑制效果最为明显。蛋白水平的抑制效果与mRNA水平基本一致。结论成功筛选出对MuRF-1基因有效的siRNA重组质粒,即siRNA MuRF1-Ⅰ,为通过RNAi技术进一步研究其功能以及基因靶向治疗奠定了基础。

AMPK活化对大鼠骨骼肌Akt/FoxO磷酸化介导的泛素蛋白连接酶mRNA表达的影响

目的:采用一次性AICAR注射动物模型,观察AMPK活性变化对Akt、FoxO磷酸化的影响,探讨骨骼肌蛋白质的降解机制。方法:采用同位素技术测定腓肠肌中AMPK活性变化;采用Western blot方法,测定腓肠肌中Akt/FoxO3a总蛋白含量及其磷酸化变化;采用实时荧光定量PCR方法,测定腓肠肌MAFbx mRNA和MuRF-1 mRNA基因表达。结果:AICAR注射后1、2、7 h,AMPK活性与对照组相比升高(P<0.05或P<0.01);AICAR注射后1、2、7 h,Akt磷酸化水平下降(P<0.05或P<0.01),分别是对照组的0.26倍、0.42倍、0.85倍;AICAR注射后1、2 h,FoxO3a磷酸化水平降低(P<0.05),分别是对照组的0.32倍、0.41倍;与对照组相比,AICAR注射后1、2 h,MuRF-1 mRNA和MAFbx mRNA表达量升高(P<0.01),AICAR注射后7 h,MuRF-1 mRNA表达量升高(P<0.05)。结论:AMPK在细胞内可能调节多条信号通路,多种蛋白质降解途径,通过降低Akt磷酸化,活化FoxO,促进泛素蛋白连接酶的表达,降解骨骼肌蛋白质是其中一条途径。