脓毒症诱导大鼠延髓内脏带胆碱能神经元凋亡及其对系统性炎症和行为学的影响

目的:探索脓毒症诱导的系统性炎症对延髓内脏带(MVZ)胆碱能神经元活性与凋亡、大鼠行为学的影响及胆碱能抗炎通路(CAP)干预的效应。方法:纳入无特定病原体(SPF)级Sprague Dawley(SD)大鼠64只,随机分为3组:对照组,不做任何处理。假手术组(8只),大鼠剖腹但不进行盲肠结扎穿刺法(CLP)并予哌拉西林预防感染(50 mg/kg,腹腔注射,每日3次,连续3 d)。脓毒症组(48只),制备CLP脓毒症模型并予哌拉西林预防感染(使用方法同假手术组),制备成功后随机再分为模型组、GTS-21组及甲基牛扁亭(MLA)组,各16只。模型组予生理盐水(1 mL/100 g,腹腔注射,每日3次,连续3 d);GTS-21组以α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAchRs)特异性激动剂GTS-21(4 mg/kg,腹腔注射,每日1次,连续3 d)进行干预;MLA组以α7nAchRs特异性拮抗剂MLA(4.8 mg/kg腹腔注射,每日1次,连续3 d)进行干预。采用脓毒症严重程度评分(MSS)系统对大鼠每天行为进行分类评分、3 d后处死大鼠采用灌注取脑方式摘取延髓标本,采用免疫荧光双标测定延髓标本的Caspase-3/胆碱乙酰转移酶(CHAT)表达。结果:脓毒症模型组、GTS-21组及MLA组MSS评分高于对照组,且MLA组MSS评分高于GTS-21组(P<0.05),分类评分中,脓毒症3组外观、意识水平、行为表现、对刺激反应、睁眼反应、呼吸频率、呼吸质量评分均高于对照组和假手术组,3组间分类评分比较差异无统计学意义;MLA组CHAT表达较对照组降低(P<0.05),GTS-21具有升高CHAT表达的趋势(P>0.05);脓毒症各组Caspase-3表达升高(P<0.05)。结论:脓毒症诱导的系统性炎症的紊乱可能通过MVZ诱导脓毒症的病态行为,干预CAP可调控脓毒症炎症风暴和病态行为。