Mus81沉默对结肠癌HCT116细胞奥沙利铂敏感性的影响

目的:观察Mus81基因沉默对人结肠癌细胞HCT116奥沙利铂敏感性的影响并分析其机制。方法:采用慢病毒介导的RNAi技术,构建Mus81基因沉默的HCT116细胞,MTT法检测奥沙利铂的IC50值。Annexin V-APC染色法检测奥沙利铂处理后的细胞凋亡率,并以实时定量PCR及Western blot检测p53、Bax及Bcl-2的表达水平。结果 :Mus81沉默的HCT116细胞对奥沙利铂的IC50值明显降低,该细胞经奥沙利铂处理后凋亡率上升了77.6%(P<0.01),p53和Bax的表达明显升高(P<0.01),Bcl-2表达则明显降低(P<0.01),导入Mus81基因则可降低该细胞凋亡率。结论 :Mus81基因沉默可提高HCT116细胞对奥沙利铂的敏感性,其机制可能是调控p53、Bax及Bcl-2的表达从而促进细胞凋亡。

Mus81对人乳腺癌SKBR3增殖、侵袭和迁移的影响

目的研究Mus81过表达对人乳腺癌SKBR3增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法从相应甘油菌中抽提Mus81过表达质粒和阴性对照质粒,通过Lipofectamine2000脂质体转染人乳腺癌SKBR3细胞。分别利用RT-PCR和Western blot法检测Mus81过表达效果,CCK-8增殖实验检测过表达前后细胞增殖能力变化,Transwell侵袭实验检测过表达前后细胞侵袭能力变化,Transwell迁移实验和细胞划痕实验检测过表达前后细胞迁移能力变化。结果 RT-PCR和Western blot法表明Mus81基因过表达效果良好。Mus81过表达后,增殖实验结果显示实验组细胞增殖速度明显低于对照组(P<0.05)。Transwell侵袭实验显示,实验组细胞每高倍视野平均穿膜个数低于对照组(P<0.05)。Transwell迁移实验显示,实验组细胞每高倍视野平均穿膜个数同对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。细胞划痕实验结果显示,实验组划痕愈合率同对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Mus81过表达抑制了人乳腺癌SKBR3细胞的增殖,降低了细胞的侵袭能力,但对SKBR3细胞迁移能力没有明显影响。

DNA损伤修复基因Mus81在肿瘤发生中的作用

通过对DNA损伤修复基因Mus81的特殊结构、生物学特性与肿瘤发生关系的探讨,反映Mus81在保持染色体的稳定性和抑制肿瘤中重要的生物学作用,为提高放疗、化疗疗效和克服肿瘤耐药提供新的理论依据和治疗思路。现就哺乳动物Mus81在肿瘤发生中的相关作用机制作一综述。

乳腺浸润性导管癌Mus81表达的检测及其意义

目的研究乳腺浸润性导管癌组织中Mus81的表达及意义。方法采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测39例乳腺浸润性导管癌病灶组织及其对应的癌旁组织、15例乳腺纤维腺瘤组织中Mus81 mRNA和蛋白的表达情况。结果乳腺浸润性导管癌病灶组织中Mus81阳性率为66.67%(26/39),低于癌旁组织(100%),差异有统计学意义(P<0.05)。乳腺纤维腺瘤组织中Mus81阳性率(100%)与癌旁组织无差别。乳腺浸润性导管癌病灶组织Mus81 mRNA和蛋白平均表达水平低于癌旁组织,差异有统计学意义(t=-6.546,P<0.01;t=-4.264,P<0.01);乳腺浸润性导管癌病灶组织Mus81mRNA和蛋白平均表达水平低于乳腺纤维腺瘤组织,差异有统计学意义(t=-6.117,P<0.01;t=-3.566,P<0.01);癌旁组织Mus81 mRNA和蛋白平均表达水平低于乳腺纤维腺瘤组织,差异无统计学意义(t=-0.519,P>0.05;t=-2.128,P>0.05)。Mus81表达水平与乳腺癌TNM分期有关,处于TNM分期0、Ⅰ期的乳腺浸润性导管癌组织Mus81 mRNA和蛋白平均表达水平高于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期,差异有统计学意义(t=2.297,P<0.05;t=2.763,P<0.05);Mus81表达水平与患者年龄、肿瘤大小、腋窝淋巴结转移无关(P>0.05)。结论 Mus81在乳腺浸润性导管癌中表达下调且与肿瘤TNM分期相关,检测Mus81的表达情况有助对乳腺浸润性导管癌的病情评估。

MUS81在DNA修复过程中的作用

DNA常受到内源性细胞代谢产物、外源性化学物质和辐射等损伤。不同修复途径可修复各种损伤的DNA,从而维持基因组的完整性,预防基因突变。近年发现,MUS81基因表达的蛋白质与生物的DNA修复息息相关,在DNA重组修复中起极重要的作用。由于MUS81被发现较晚,目前人们对其研究尚处起步阶段。本文结合近年国内外相关文献报道，综述如下。

Mus81和GEN1基因在肺癌组织中的表达及其临床意义

目的研究肺癌组织中Mus81及GEN1的表达及其临床意义。方法采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测30例肺癌组织及其相应癌旁组织中Mus81及GEN1 mRNA和蛋白的表达情况,分析其临床意义。结果 30例肺癌组织中Mus81 mRNA和蛋白表达水平低于相应癌旁组织,差异具有统计学意义(t=-3.529,P<0.05;t=-4.273,P<0.05);30例肺癌组织中GEN1 mRNA和蛋白表达水平同癌旁相比无统计学差异(t=-2.006,P>0.05;t=0.957,P>0.05)。30例肺癌组织中Mus81表达水平和GEN1表达水平无明显相关性(P>0.05)。结论肺癌组织中Mus81表达低于癌旁组织,提示Mus81表达下调可能和肺癌的发生相关;GEN1在肺癌组织中的表达水平同癌旁相比无统计学差异,提示GEN1在肿瘤的发生、发展过程中可能不起主要作用;肺癌组织中Mus81的表达水平和GEN1的表达水平无明显相关性。

Mus81基因在中国汉族结直肠癌中的表达及其临床意义

目的了解Mus81基因在中国汉族结直肠癌中的表达水平并分析其临床意义。方法收集43例手术切除的中国汉族结直肠癌及相应的癌旁组织标本,采用巢式荧光定量PCR技术检测标本中Mus81基因的表达水平,并分析Mus81基因表达与结直肠癌临床病理特征及常规肿瘤指标的相关性。结果 Mus81基因在结直肠癌中的表达水平低于相应的癌旁组织(114.6±68.0 vs202.5±109.0,P<0.001)。Mus81基因在74.4%(32/43)的病例中表现为表达下调,且其表达下调与结直肠癌的远处转移(P=0.043)、TNM分期(P=0.022)及P53蛋白高表达(P=0.011)密切相关。结论 Mus81基因的表达水平在中国汉族结直肠癌中明显下调,且其表达下调与结直肠癌的转移潜能及进展相关,提示Mus81是中国汉族结直肠癌的一个潜在分子指标物。

MUS81基因多态性与EBV相关肿瘤的相关性

目的探讨MUS81基因多位点单核苷酸多态性与EB病毒(EBV)相关肿瘤的关系。方法采用飞行时间质谱技术,分别检测鼻咽癌、淋巴瘤、胃癌等肿瘤组织和正常对照人群外周血MUS81基因rs13817、rs648732、rs659857位点基因型,并分别分析EBV阳性肿瘤、EBV阴性肿瘤、正常对照人群MUS81基因上述位点基因型和等位基因频率的差异。结果EBV阳性胃癌rs13817位点基因型AA、等位基因A和rs648732位点等位基因T频率均明显高于正常对照(χ^(2)=4.917~6.802,P<0.05);EBV阳性胃癌和鼻咽癌rs659857位点TC基因型频率明显低于正常对照和(或)相应的EBV阴性肿瘤(χ^(2)=14.759~28.741,P<0.01),EBV阳性和阴性淋巴瘤rs659857位点TC基因型频率明显低于正常对照(χ^(2)=14.124、16.455,P<0.01)。结论MUS81基因rs13817、rs648732和rs659857位点多态性与EBV相关肿瘤存在相关性,是其潜在的风险因素。

Mus81基因沉默对MDA-MB-231乳腺癌细胞增殖、凋亡及裸鼠成瘤能力的影响

目的:分析甲磺酸盐及紫外线敏感性81号基因(Mus81)在乳腺癌组织中的表达水平,观察Mus81基因敲减对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、凋亡和裸鼠移植瘤形成能力的影响。方法:从TCGA数据库下载乳腺癌样本基因表达数据,应用perl及R软件整理数据筛选出每个样本Mus81基因表达量。通过慢病毒介导的小干扰RNA(short interfering RNA,siRNA)技术构建Mus81基因敲减的MDA-MB-231乳腺癌细胞系(即Mus81敲减组)和阴性对照组MDA-MB-231乳腺癌细胞系,以实时定量PCR法检测Mus81基因的敲减效率,再以MTT检测实验、克隆形成实验、细胞流式检测及实时定量PCR法检测两组MDA-MB-231细胞的生长、增殖、细胞周期分布、凋亡水平及Mus81下游基因表达水平。最后,向BALB/c裸鼠右侧腋下注射Mus81基因敲减组和阴性对照组MDA-MB-231乳腺癌细胞,观察Mus81基因沉默对MDA-MB-231细胞在裸鼠中成瘤能力的影响。结果:Mus81基因在乳腺癌组织中的平均表达量明显高于癌旁组织(P<0.05)。Mus81基因敲减组MDA-MB-231细胞中Mus81基因的表达水平明显低于阴性对照组(P<0.05),Mus81基因的敲减效率达70.7%。较之阴性对照组,Mus81基因敲减组MDA-MB-231细胞的生长速度明显减缓(P<0.05);形成的细胞克隆数也明显下降(P<0.05);细胞凋亡水平、G2/M期细胞比例则明显升高(P<0.05)。STC2等Mus81下游基因的表达水平在两组MDA-MB-231细胞间也有明显差异(P<0.05)。裸鼠成瘤实验显示,Mus81基因敲减组形成的裸鼠瘤体体积和重量均明显低于阴性对照组(P<0.05)。结论:Mus81基因在乳腺癌组织中的表达明显升高,且可能通过调控STC2等下游基因的表达促进三阴性乳腺癌细胞的生长增殖及裸鼠体内成瘤能力并抑制其凋亡,提示其可能是一个潜在的乳腺癌治疗靶点。

MUS81-EME1维持基因稳定性作用研究进展

MUS81-EME1是结构特异性核酸内切酶,在维持基因组的稳定性中起重要作用。MUS81-EME1能促进同源重组修复、链间交联修复,也能促进染色体普通型脆弱位点的表达,还能处理复制过程中停滞的复制叉,重新启动复制。MUS81-EME1可与其他结构特异性核酸内切酶SLX1-SLX1、XPF-ERCC1形成合适的多聚体结构,能增强其作为分解酶的活力。MUS81-EME1的活性受细胞周期蛋白、复制检查点的调控。最新一些研究表明,MUS81-EME1能处理复制应激下的反向复制叉,从而促进肿瘤细胞的DNA复制,起到潜在致癌作用。

MUS81基因在喉癌中的突变和表达

目的探讨MUS81基因突变和表达与喉癌发生发展的相关性。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析技术结合DNA测序检测分析了42例喉癌患者MUS81基因第9、10外显子的突变；应用半定量逆转录-PCR和Western印迹方法分析MUS81基因在喉癌组织中的表达情况。结果42例喉癌、癌旁组织标本中，癌旁正常组织均无突变，喉癌组织标本中19例发生突变，占45．2％（19／42），11例喉癌组织第9外显子发现有突变，占26．2％（11／42），8例喉癌组织第10外显子有突变，占19％（8／42），分析表明具有统计学意义（P〈0．01）。逆转录．PCR结果表明，42例喉癌中有17例MUS81基因mRNA低表达，占40．48％（17／42）。Western印迹方法分析结果表明，42例喉癌中有17例MUS81蛋白质低表达，占40．48％（17／42），经统计学分析肿瘤组与对照组差异有统计学意义（P〈0．01）。分析表明MUS81基因突变与mRNA和蛋白质低表达有显著相关性（P〈0．01）。统计结果显示喉癌MUS81基因突变与TNM分期、年龄和淋巴结转移无相关性（P〉0．05）。MUS81基因低表达与TNM分期、年龄和淋巴结转移无相关性（P〉0．05）。结论发现MUS81基因在喉癌组织中有突变发生及表达异常，提示MUS81基因突变和表达异常可能是喉癌发生及发展的重要因素之一。

Mus81基因在乳腺癌中的表达及其意义

Mus81基因是1个功能强大的抑癌基因。Mus81在肝癌中表达下调，其表达降低会导致肝癌的恶性程度增加、侵润性增强、预后不良。我们采用逆转录-聚合酶链反应（1iT-PCR）检测乳腺癌病灶组织及其对应的癌旁组织、乳腺良性病变组织中Mus81mRNA表达，探讨Mus81表达与乳腺癌临床病理特征的关系。

Mus81与恶性肿瘤的发生、发展及化疗敏感性调控

DNA修复基因Mus81是新近发现的肿瘤抑制基因,现已发现其表达下调及基因突变与多种恶性肿瘤的发生、发展密切相关,且可能在肿瘤化疗敏感性调控中也发挥了重要作用,对其进行深入研究则有望获得新的肿瘤标志物和治疗靶点。本文对Mus81在恶性肿瘤发生、发展及化疗敏感性调控中的研究进展进行简要综述。

甲磺酸盐及紫外线敏感性81号基因对肝癌细胞的影响

目的检测甲磺酸盐及紫外线敏感性81号基因(Mus81)在肝细胞癌中的表达,并观察Mus81对人肝癌细胞迁移、侵袭及转移能力的影响。方法32例组织标本选自2020年1月至2021年6月在暨南大学附属广州红十字会医院进行手术切除的肝细胞癌患者的肝癌组织及相应癌旁组织。分析Mus81在32例肝癌标本、癌症基因组图谱数据库的374例肝癌样本、人正常肝细胞系HL-7702和人肝癌细胞系JHH-7、Huh-7、Hep3B中的表达水平,构建Mus81敲减的JHH-7、Huh-7和过表达的Hep3B肝癌细胞系,通过划痕实验、Transwell迁移及侵袭实验和裸鼠尾静脉注射转移实验观察Mus81对肝癌细胞的影响。结果Mus81在肝癌组织或细胞系中的表达量高于癌旁组织或正常肝细胞系,差异有统计学意义(均P<0.05)。Mus81敲减的Huh-7肝癌细胞的迁移率、转移及侵袭细胞数分别为22.24%±2.16%、49.04±5.62、3.81±1.08,阴性对照组分别为26.89%±1.15%、86.81±4.79、19.78±3.30,两组比较差异有统计学意义(t=4.24、26.59、23.92,均P<0.01);Mus81过表达的Hep3B肝癌细胞迁移率、转移及侵袭细胞数分别为80.57%±5.12%、18.74±8.07、33.81±8.44,均高于空载体组的64.17%±7.20%、10.96±5.32、3.04±1.13,差异有统计学意义(t=4.15、4.18、18.78,均P<0.01)。裸鼠尾静脉转移实验显示,注射Mus81敲减组JHH-7细胞的裸鼠总荧光量、转移瘤重量均低于对照组,且肾、脊柱、颈部、腋下及皮下的转移率均低于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论Mus81基因在肝癌中表达上调,且可促进肝癌细胞的迁移、侵袭、转移能力,提示Mus81可能是一个潜在的肝细胞癌治疗靶点。