联合检测胃粘膜组织P_(53)、P_(16)、K-ras对胃癌的诊断价值

目的 :探讨胃癌组织P53、P1 6 、K ras基因的协同突变情况 ,揭示P53、P1 6 、K ras基因突变与胃癌发生的关系。方法 :应用聚合酶链反应 (PCR)与单链构象多态性分析法 (SSCP)对 6 0例经病理切片诊断为胃癌组织和 2 0例正常胃粘膜组织进行P53、P1 6 、K ras基因突变分析。结果 :6 0例胃癌粘膜组织中 ,P53基因发生突变 5 3例 ,占 88 3% ;P1 6 基因发生突变 49例 ,占 81 7% ;K ras基因发生突变 5 6例 ,占 93 3% ;男女间突变率比较差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;而 2 0例正常胃粘膜组织无P53、P1 6 、K ras基因突变发生。结论 :P53、P1 6 、K ras基因突变是胃癌中常见的分子事件 ,用PCR—SSCP法联合检测胃粘膜组织P53、P1 6 、K ras基因的突变情况将有助于诊断胃癌 。

Experimental research for specific down-regulated expression of p53 gene by individual antisense RNA in vitro

Objective： To investigate the specific blockage effect of individual antisense RNA on mutant p53 gene in vitro. Methods： The single strand antisense transcription system containing mt-p53 exon 8 sequence （pGEM3zf（＋/-）p53exon8） was constructed. The ligation of antisense RNAwith mt-p53 gene was confirmed by in situ hybridization; MDA-MB-231 human breast cancer cells were transfected with ASp53exon8＇RNA cotionic liposome-mediated. Expression of mt-p53 protein was examined by immunocytochemical staining and Western blot. Cell proliferation was evaluated by MTT assay; Cell cycle distribution was determined by flow cytometry （FCM）; Apoptosis was observed by TUNEL. Results： In transfected MDA-MB-231 cells, hybridization signals were observed in cytoplasm. ASp53exon8＇RNA transfection induced inhibition of cell proliferation, G2/M phase arrest and increasing apoptotic rates. In addition, expression of p53 protein was down-regulated. Conclusion： pGEM3zf（＋/-）p53exon8 was well constructed and ASp53exon8＇RNA can block mt-p53 gene expression specifically and then inhibit MDA-MB-231 cell proliferation in vitro, which may serve as therapeutic means for human malignancy.

P^(53)突变产物在睑板腺癌中的增强表达及其意义

我们采用免疫组化S－P法，对17例石蜡包埋睑板腺癌及癌旁组织标本的P53突变蛋白表达进行了检测。结果：17例癌组织有12例表达阳性，阳性率71％。其中分化型7例，6例呈阳性（86％）表达。在一组原发灶及淋巴结转移癌配对标本中，同一病人之两个部位P(53)突变蛋白表达差异无明显意义。癌旁（睑缘）组织17例中5例上皮有异常增生，且同时伴有P(53)突变蛋白呈强阳性表达。以上结果提示：抑癌基因P53的突变在睑板腺癌的发生中是一个比较常见的基因改变，且在分化型癌的发生中表现明显；P(53)基因异常发生在肿瘤转移之前且在淋巴道转移中可能起重要作用；P(53)突变蛋白在癌旁上皮异型增生组织中的过度表达具有十分重要的意义。

肾血管平滑肌脂肪瘤组化及突变型P53观察

目的：运用组化及免疫组化方法证实肾血管平滑肌脂肪瘤（ＲｅｎａｌＡｎｇｉｏｍｙｏｌｉｐｏｍａ，ＲＡＭＬ）细胞中存在类似软组织腺泡状肉瘤（Ａｌｖｅｏｌａｒｓｏｆｔｐａｒｔｓａｒｃｏｍａ．ＡＳＰＳ）细胞内的类晶体及其制癌基因（突变型Ｐ５３）的表达，进一步探讨本瘤潜在的生物学行为。方法：本文选择４例做用和不用淀粉酶做预处理的ＰＡＳ染色及突变型Ｐ５３单克隆抗体的免疫组化染色。结果：ＰＡＳ染色显示ＲＡＭＬ的上皮样平滑肌细胞胞浆中存在抗淀粉酶ＰＡＳ阳性颗粒和类晶体，免疫组化染色ＲＡＭＬ细胞中突变型Ｐ５３基因蛋白均表达阴性。结论：尽管ＲＡＭＬ细胞中存在与ＡＳＰＳ细胞内结晶相似的类晶体，但其Ｐ５３基因表达阴性，符合本瘤临床生物学行为良性的特征。