副结核分枝杆菌McAb的某些特性鉴定

以超声波粉碎的副结核分枝杆菌地力株C_2抗原免疫Balb/c小鼠,经与NS—1骨髓瘤细胞三次融合,获得了3株能稳定分泌抗副结核分枝McAb的杂交瘤细胞系,其染色体数目为78～110条,分别为IgM和IgG_2。应用间接ELISA法测定细胞培养液、腹水和血清效价为10^(-2)～10^(-7)。交叉试验证明,McAbO_1与受试的各株副结核分枝杆菌反应强烈,与牛分枝杆菌和草分枝杆菌有微弱的交叉反应,与其他受试的分枝仟菌不反应,说明McAbO_1所对应的抗原是副结核分枝杆菌种特异性抗原之一。SDS—PAGE、免疫转印试验结果表明,McAb_1、O_2和O_3所对应的抗原分子量分别为38.5,55.5和6.5KD。

副结核分枝杆菌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立和鉴定

本试验通过6次细胞融合,经过3次反复克隆化与长时间培养和两次液氮中冻存、复苏,获得了10株稳定、高效地分泌抗副结核分枝杆菌单克隆抗体的杂交瘤细胞系。这些杂交瘤细胞的染色体数量均较其两种母源细胞有明显地增加,但少于两者之和;经培养产生的含单克隆抗体的培养上清液效价在1/100～1/300之间,腹水效价达万倍以上。这10株单克隆抗体都是分枝杆菌特异性的,但在分枝杆菌之间却有广泛的交叉反应。