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A Pilot Study of Quantitative Loop-mediated Isothermal Amplification-guided Target Therapies for Hospital-acquired Pneumonia 被引量:5
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作者 Fang Wang Ran Li +9 位作者 Ying Shang Can Wang Guo-Qing Wang DeXun Zhou Dong-Hong Yang Wen Xi Ke-QiangWang Jing Bao Yu Kang Zhan-Cheng Gao 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2016年第2期181-186,共6页
Background: It is important to achieve the definitive pathogen identification in hospital-acquired pneumonia (HAP), but the traditional culture results always delay the target antibiotic therapy. We assessed the me... Background: It is important to achieve the definitive pathogen identification in hospital-acquired pneumonia (HAP), but the traditional culture results always delay the target antibiotic therapy. We assessed the method called quantitative loop-mediated isothermal amplification (qLAMP) as a new implement for steering of the antibiotic decision-making in HAP. Methods: Totally, 76 respiratory tract aspiration samples were prospectively collected from 60 HAP patients. DNA was isolated from these samples. Specific DNA fragments for identifying 11 pneumonia-related bacteria were amplified by qLAMP assay. Culture results of these patients were compared with the qLAMP results. Clinical data and treatment strategies were analyzed to evaluate the effects of qLAMP results on clinical data. McNemar test and Fisher's exact test were used for statistical analysis. Results: The detection of Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumonia, Stenotrophomonas maltophilia, Streptococcus pneumonia, and Acinetobacter baumannii by qLAMP was consistent with sputum culture (P 〉 0.05). The qLAMP results of 4 samples for Haemophilus influenzae, Legionella pneumophila, or Mvcoplasma pneumonia (MP) were inconsistent with culture results; however, clinical data revealed that the qLAMP results were all reliable except 1 MP positive sample due to the lack of specific species identified in the final diagnosis. The improvement of clinical condition was more significant (P 〈 0.001) in patients with pathogen target-driven therapy based on qLAMP results than those with empirical therapy. Conclusion: qLAMP is a more promising method for detection of pathogens in an early, rapid, sensitive, and specific manner than culture. 展开更多
关键词 Hospital-acquired Pneumonia sputum Culture Target-driven Therapy Quantitative loop-mediated isothermal amplification
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Comparison of LAMP,GeneXpert,Mycobacterial Culture,Smear Microscopy,TSPOT.TB,TBAg/PHA Ratio for Diagnosis of Pulmonary Tuberculosis 被引量:4
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作者 Yan DENG Yi-fei DUAN +1 位作者 Shu-pei GAO Jian-miao WANG 《Current Medical Science》 SCIE CAS 2021年第5期1023-1028,共6页
Objective:To investigate the application value of loop-mediated isothermal amplification(LAMP),GeneXpert,mycobacterial culture,smear microscopy,TSPOT.TB(TSPOT),ratio of TB-specific antigen to phytohemagglutinin(TBAg/P... Objective:To investigate the application value of loop-mediated isothermal amplification(LAMP),GeneXpert,mycobacterial culture,smear microscopy,TSPOT.TB(TSPOT),ratio of TB-specific antigen to phytohemagglutinin(TBAg/PHA ratio)in the detection of mycobacterium tuberculosis in the bronchoalveolar lavage fluid.Methods:A retrospective analysis was performed on the patients who underwent bronchoscopy from December 2018 to November 2019 in Tongji Hospital.The patients with positive tuberculosis culture or positive GeneXpert in bronchoalveolar lavage fluid were selected as the case group,and those without tuberculosis served as the control group.The receiver operating characteristic(ROC)curve was used to evaluate the diagnostic value of LAMP,GeneXpert,culture,smear microscopy,TSPOT,and TBAg/PHA ratio.Results:For the patients with positive cultures as case,the sensitivity of LAMP,GeneXpert,smear microscopy,TSPOT and TBAg/PHA ratio was 73.49%,89.16%,25.30%,80.00%,33.85%,respectively,the specificity was 99.00%,100.00%,99.00%,86.00%,100.00%,respectively,the area under the ROC curve(AUC)was 0.849,0.938,0.633,0.830,0.669,respectively.For the patients with positive GeneXpert as case,the sensitivity of LAMP,mycobacterial culture,smear microscopy,TSPOT and TBAg/PHA ratio was 73.20%,74.23%,22.68%,68.92%,29.73%,respectively,the specificity was 99.00%,100.00%,99.00%,86.00%,100.00%,respectively,the AUC was 0.853,0.878,0.623,0.775,0.649,respectively.Conclusion:The sensitivity of GeneXpert was best.The sensitivity and diagnostic value of LAMP were slightly lower than those of GeneXpert,and were similar to tuberculosis culture.The sensitivity of smear microscopy was low.The specificity of TSPOT was low.When TBAg/PHA ratio>0.2 was used as a diagnostic index,the specificity was improved,but the sensitivity was low. 展开更多
关键词 pulmonary tuberculosis bronchoalveolar lavage fluid loop-mediated isothermal amplification GeneXpert TSPOT
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RNA恒温扩增实时检测痰标本结核分枝杆菌对肺结核的诊断价值
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作者 郭新景 李晓琳 《四川解剖学杂志》 2024年第3期53-55,共3页
目的:探讨RNA恒温扩增实时检测(SAT)技术检测痰标本结核分枝杆菌(MTB)对肺结核的诊断价值.方法:选择2020年8月至2022年8月本院收治的1190例可疑活动性肺结核患者为研究对象.对患者痰标本行罗氏培养、抗酸染色、SAT检测,以痰培养结果为&q... 目的:探讨RNA恒温扩增实时检测(SAT)技术检测痰标本结核分枝杆菌(MTB)对肺结核的诊断价值.方法:选择2020年8月至2022年8月本院收治的1190例可疑活动性肺结核患者为研究对象.对患者痰标本行罗氏培养、抗酸染色、SAT检测,以痰培养结果为"金标准",分析SAT检测方法的诊断价值.结果:痰培养结果明确肺结核患者990例,非肺结核患者200例;SAT检测明确肺结核患者570例,非肺结核患者620例;罗氏培养法明确肺结核患者445例,非肺结核患者745例;抗酸染色法明确肺结核患者300例,非肺结核患者890例.与罗氏培养法及抗酸染色法比较,SAT检测对于肺结核诊断灵敏度、准确度、阳性预测值及阴性预测值分别为56.97%(564/990)、63.95%(761/1190)、98.95%(564/570)、31.29%(194/620),均高于罗氏培养法及抗酸染色法,差异均有统计学意义(P<0.05);特异度各检查方法比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:SAT检测痰标本MTB对肺结核诊断具有较高的应用价值,能在较短时间内提供诊断结果,且具有较高的诊断准确度,为临床进一步诊疗提供了可靠的参考依据. 展开更多
关键词 肺结核 痰标本 RNA恒温扩增实时检测技术 结核分枝杆菌
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环介导等温扩增技术在病原微生物临床检测中的应用
4
作者 廖川 梁丽娜 +3 位作者 黄少宇 马梦霞 李雪斌(综述) 韦贵将(审校) 《检验医学与临床》 CAS 2024年第7期1003-1007,1024,共6页
病原微生物是威胁人类健康的重要因素之一,快速、准确的检测方法对于感染性疾病的诊断具有重要意义。环介导等温扩增(LAMP)是一种恒温扩增方法,具有反应时间短、操作简便、灵敏度高、特异度高、检测成本低等优点,因此被广泛应用于感染... 病原微生物是威胁人类健康的重要因素之一,快速、准确的检测方法对于感染性疾病的诊断具有重要意义。环介导等温扩增(LAMP)是一种恒温扩增方法,具有反应时间短、操作简便、灵敏度高、特异度高、检测成本低等优点,因此被广泛应用于感染性疾病的快速诊断。基于这种情况,该文主要阐述了LAMP的原理、特点及其在临床常见病原微生物检测方面的应用与研究进展。LAMP技术现在已经被应用于病原微生物的检测,且具有较高的灵敏度及特异度,但该技术仍有易产生假阳性、引物设计复杂等不足之处。该文综述了近年来LAMP技术在病原微生物感染中的应用与进展,并对其未来的发展前景进行了展望,以期在资源有限的环境中为病原微生物感染的快速诊断提供合理的研究方向。 展开更多
关键词 环介导等温扩增技术 核酸检测 病原微生物 核酸扩增 结核分枝杆菌
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SAT-TB联合FQ-PCR检测在痰涂片阴性肺结核诊断中的效能
5
作者 刘延华 《中国民康医学》 2024年第7期136-138,共3页
目的:分析RNA恒温扩增实时检测技术(SAT-TB)联合荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测在痰涂片阴性肺结核患者诊断中的效能。方法:选取2020年7月至2022年7月该院收治的75例疑似痰涂片阴性肺结核患者进行前瞻性研究。采集所有患者肺泡灌洗... 目的:分析RNA恒温扩增实时检测技术(SAT-TB)联合荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测在痰涂片阴性肺结核患者诊断中的效能。方法:选取2020年7月至2022年7月该院收治的75例疑似痰涂片阴性肺结核患者进行前瞻性研究。采集所有患者肺泡灌洗液标本,采用SAT-TB、FQ-PCR法进行检测,以结核分枝杆菌痰培养结果为“金标准”,比较SAT-TB、FQ-PCR单项及联合检测在痰涂片阴性肺结核诊断中的效能。结果:金标准结果显示,75例疑似痰涂片阴性肺结核患者中,阳性48例,阴性27例;SAT-TB检测结果显示,阳性36例,阴性39例;FQ-PCR检测结果显示,阳性37例,阴性38例;SAT-TB联合FQ-PCR检测结果显示,阳性47例,阴性28例;SAT-TB联合FQ-PCR检测诊断痰涂片阴性肺结核的灵敏度、准确度均高于SAT-TB、FQ-PCR单项检测诊断,漏诊率低于SAT-TB、FQ-PCR单项检测诊断,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SAT-TB联合FQ-PCR检测诊断痰涂片阴性肺结核的效能高于二者单项检测诊断效能。 展开更多
关键词 RNA恒温扩增实时检测技术 荧光定量PCR 痰涂片阴性 肺结核 准确度
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GeneXpert MTB/RIF技术在结核病早诊断中的应用 被引量:28
6
作者 路丽苹 陆斌 +3 位作者 刘梅 洪建军 郭晓芹 高谦 《中国防痨杂志》 CAS 2017年第1期71-75,共5页
目的评估GeneXpertMTB/RIF技术(简称XpertMTB/RIF)检测结核分枝杆菌(MTB)及其利福平耐药的可行性。方法选取2015年1—6月上海市松江区结核病定点医院结核科门诊连续纳入、初次就诊的疑似结核病患者,共556例。收集患者痰液标本,... 目的评估GeneXpertMTB/RIF技术(简称XpertMTB/RIF)检测结核分枝杆菌(MTB)及其利福平耐药的可行性。方法选取2015年1—6月上海市松江区结核病定点医院结核科门诊连续纳入、初次就诊的疑似结核病患者,共556例。收集患者痰液标本,分别进行涂片抗酸染色镜检法(简称“涂片法”)、液体分枝杆菌培养管(MGIT)培养法(简称“液体培养法”)、传统比例法药物敏感性试验(简称“药敏试验”)和XpertMTB/RIF检测,比较XpertMTB/RIF法和传统方法检测痰标本中MTB及其耐药性的效能。结果537例患者经涂片法、液体培养法和XpertMTB/RIF检测,阳性率分别为17.32%(93/537)、28.31%(152/537)和28.12%(151/537)。以液体培养为金标准,XpertMTB/RIF检测的敏感度和特异度分别为90.60%(135/149)和95.84%(369/385),且敏感度高于涂片法[涂片法的敏感度为60.53%(92/152)],差异有统计学意义(χ2=36.71,P%0.01);XpertMTB/RIF检测涂阳标本的敏感度为96.63%(86/89),明显高于检测涂阴标本的敏感度ES1.67%(49/60)],差异有统计学意义(χ2=9.43,P〈0.01)。以比例法药敏试验结果为金标准,XpertMTB/RIF检测利福平耐药的敏感度为90.00%(9/10),特异度为99.07%(106/107),一致率为98.29%(115/117)。结论XpertMTB/RIF技术操作简便、快速、安全,敏感度和特异度较高,对基层实验室早期检测MTB及判定利福平耐药具有重要价值。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 核酸扩增技术 早期诊断 利福平 抗药性
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环介导等温扩增技术检测痰样结核分枝杆菌临床价值评价 被引量:16
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作者 李金莉 王峰 +2 位作者 彭毅 洪创跃 杨应周 《中国防痨杂志》 CAS 2015年第2期134-139,共6页
目的 评价环介导等温扩增技术(LAMP)检测痰标本中结核分枝杆菌的效果和临床价值。 方法 收集深圳市慢性病防治中心2013年4—9月350例结核病专科门诊就诊者的痰标本,其中肺结核患者216例(初诊患者93例,其中涂阳患者41例,涂阴患者5... 目的 评价环介导等温扩增技术(LAMP)检测痰标本中结核分枝杆菌的效果和临床价值。 方法 收集深圳市慢性病防治中心2013年4—9月350例结核病专科门诊就诊者的痰标本,其中肺结核患者216例(初诊患者93例,其中涂阳患者41例,涂阴患者52例;随访治疗患者123例),非结核病患者134例(含非结核分枝杆菌感染11例)。用涂片法、罗氏培养法、实时PCR法和LAMP法检测样本中的结核分枝杆菌,以临床诊断为标准,用SPSS 17.0软件进行统计学分析,计算LAMP对初诊患者的检出率和检测敏感度和特异度。不同方法之间检测效率的比较采用χ2检验,P〈0.05为差异有统计学意义。LAMP与实时PCR法检测的一致性评价采用Kappa检验。 结果 上述4种方法检测初诊肺结核患者痰样的敏感度分别为44.1%(41/93)、52.7%(49/93)、48.4%(45/93)、48.4%(45/93),LAMP检测敏感度与实时PCR一致;高于涂片法,低于罗氏培养法,但差异均无统计学意义(χ^2=0.75,P〉0.05;χ^2=0.75,P〉0.05)。LAMP对初诊涂阳患者的总检出率为90.2%(37/41),对初诊涂阴患者的检出率为15.4%(8/52),诊断肺结核的特异度为100.0%(134/134)。对123例治疗随访的患者,涂片、培养、实时PCR 和LAMP 4种方法单次检测的阳性率分别为26.0%(32/123)、14.6%(18/123)、31.7%(39/123)和30.9%(38/123)。LAMP和实时PCR检测总体一致率为96.9%(339/350),Kappa值为0.91。 结论 LAMP检测痰样本结核分枝杆菌用于结核病诊断具有良好的特异度,总体检测效能和实时PCR具有很高一致性,具有临床应用价值。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 核酸扩增技术 结核 肺/诊断
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结核杆菌多位点环介导等温扩增检测方法的建立 被引量:5
8
作者 王正荣 陈创夫 +4 位作者 杨明锋 孟茹 曹旭东 张辉 乔军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期267-271,共5页
为建立一种快速、高敏感、高特异、鉴别结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的方法,本研究根据大多数致病性结核分枝杆菌共有序列esat-6,结核分枝杆菌和牛分枝杆菌gyrB共有特异性序列,以及结核分枝杆菌种特异序列mtp40设计6对特异性引物对痰液中... 为建立一种快速、高敏感、高特异、鉴别结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的方法,本研究根据大多数致病性结核分枝杆菌共有序列esat-6,结核分枝杆菌和牛分枝杆菌gyrB共有特异性序列,以及结核分枝杆菌种特异序列mtp40设计6对特异性引物对痰液中的结核分枝杆菌进行检测,并与鉴别培养基分离培养结果以及常规PCR鉴定结果进行比较。实验结果表明,建立的LAMP检测方法具有很高的特异性。可区分致病性结核分枝杆菌和非致病结核分枝杆菌,也可鉴别结核分枝杆菌和牛分枝杆菌。LAMP检测技术的灵敏度比经典PCR技术高100倍左右,可检测到7拷贝/反应。另外,用3种方法同时检测样品发现,LAMP与细菌培养的符合率为90.91%,LAMP与常规PCR检测结果的符合率为100%。LAMP检测方法可以在流行病学调查及现场快速诊断方面广泛应用,并为临床治疗提供依据。 展开更多
关键词 环介导等温扩增 结核分枝杆菌 牛分枝杆菌 鉴别诊断
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链置换扩增技术的影响因素研究 被引量:3
9
作者 蒋天伦 府伟灵 +3 位作者 张波 陈鸣 张雪 赵树铭 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期39-42,共4页
目的 探索限制酶、聚合酶、缓冲体系和DTT等对链置换扩增 (SDA)实验的影响 ,以期在商品化试剂条件下组建SDA系统。方法 以结核菌IS61 1 0序列为扩增对象设计SDA引物 ,利用商品化的BsoBI和exo Bst为实验用酶建立SDA实验系统。对比在不... 目的 探索限制酶、聚合酶、缓冲体系和DTT等对链置换扩增 (SDA)实验的影响 ,以期在商品化试剂条件下组建SDA系统。方法 以结核菌IS61 1 0序列为扩增对象设计SDA引物 ,利用商品化的BsoBI和exo Bst为实验用酶建立SDA实验系统。对比在不同BsoBI、exo Bst浓度条件下SDA产物的电泳条带亮度来观察限制酶、聚合酶对SDA效率的影响 ;对比SDA在pH 7.6的磷酸盐缓冲液和以Tris HCl为缓冲体系的NEBuffer2、ThermoPolBuffer和EcoPolBuffer中的产物电泳条带的方法来观察不同缓冲体系对SDA效率的影响 ;对比加入DTT和不加DTT时SDA产物的电泳条带亮度来观察DTT对SDA效率的影响。结果 ①在 0 .1~ 0 .4U μl浓度范围内 ,SDA的扩增率与BsoBI含量正相关 ,而 0 .8U μlBsoBI反而使SDA受到抑制。②在 0 .0 8~ 0 .3 2U μl浓度范围内exo Bst用量对SDA的扩增能力没有显著影响 ;③SDA可以在pH 7.6的磷酸盐缓冲液和ThermoPolBuffer中进行 ,而不能在NEBuffer2和EcoPolBuffer中进行 ;④DTT对SDA的扩增率和特异性都没有显著影响。结论 以上实验结果表明在商品化试剂条件下可以构建SDA系统 。 展开更多
关键词 链置换扩增 等温扩增 核酸 结核菌 压电石英晶体传感器 DNA传感器 基因诊断
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环介导等温扩增技术快速检测结核分枝杆菌核酸 被引量:6
10
作者 沈会平 张耀祺 +5 位作者 杨坚 石磊 陈涛 李国周 赵红波 莫自耀 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期378-380,共3页
目的建立一种快速准确的检测结核分枝杆菌(MTB)核酸的环介导等温扩增(LAMP)方法。方法以重复插入序列IS6110为目的基因,设计LAMP引物,特异检测MTB核酸。用本法与痰涂片抗酸染色镜检法、实时荧光PCR法对100例可疑患者痰标本进行对比检查... 目的建立一种快速准确的检测结核分枝杆菌(MTB)核酸的环介导等温扩增(LAMP)方法。方法以重复插入序列IS6110为目的基因,设计LAMP引物,特异检测MTB核酸。用本法与痰涂片抗酸染色镜检法、实时荧光PCR法对100例可疑患者痰标本进行对比检查。结果 LAMP法特异性强,仅扩增MTB复合群核酸;灵敏度高,检测限达100 fg;而实时荧光PCR检测限为1 pg。对100例疑似结核病患者痰液标本检测,涂片抗酸染色法、LAMP法、实时荧光PCR法的阳性率分别为28%、39%和38%。结论本研究建立的LAMP方法检测MTB核酸特异性强、灵敏度高、时间短且操作简便,有望成为临床快速检测MTB的新方法。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 环介导等温扩增法 IS6110基因 实时浊度仪
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环介导等温扩增技术对结核性胸腔积液的诊断价值 被引量:9
11
作者 刘云 徐晶 +2 位作者 谢燊 肖碧仁 黄胜和 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第16期2735-2737,共3页
目的:建立一种快速、敏感、准确地检测结核性胸膜炎患者结核分枝杆菌的方法。方法:根据结核分枝杆菌esat-6基因设计引物,利用环介导等温扩增技术(LAMP)对胸腔积液中的结核分枝杆菌进行临床检测。结果:60例临床样本检测结果表明,常规胸... 目的:建立一种快速、敏感、准确地检测结核性胸膜炎患者结核分枝杆菌的方法。方法:根据结核分枝杆菌esat-6基因设计引物,利用环介导等温扩增技术(LAMP)对胸腔积液中的结核分枝杆菌进行临床检测。结果:60例临床样本检测结果表明,常规胸腔积液沉淀抗酸染色和胸膜活检、PCR法、LAMP法检测阳性率分别为38.3%、58.3%、61.7%,而且LAMP法较PCR法更为敏感。结论:LAMP法检测胸腔积液结核分枝杆菌具有快速、敏感、简便等优点,在结核性胸膜炎患者的诊断中将发挥重要作用。 展开更多
关键词 环介导等温扩增 结核分枝杆菌 胸腔积液
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实时荧光核酸恒温扩增技术在肺结核诊断中的价值分析 被引量:9
12
作者 许光辉 赵柳婵 +3 位作者 陈华 黄燊德 陈志宇 刘治忠 《临床肺科杂志》 2015年第8期1487-1489,共3页
目的评价实时荧光核酸恒温扩增技术(SAT-TB)在肺结核诊断中的价值。方法纳入1121例非相同患者痰标本,其中26例为非结核分枝杆菌。570例肺结核为观察组,525例其他肺部疾病患者为对照组。对治疗前的痰标本分别进行抗酸杆菌涂片、培养及鉴... 目的评价实时荧光核酸恒温扩增技术(SAT-TB)在肺结核诊断中的价值。方法纳入1121例非相同患者痰标本,其中26例为非结核分枝杆菌。570例肺结核为观察组,525例其他肺部疾病患者为对照组。对治疗前的痰标本分别进行抗酸杆菌涂片、培养及鉴定和SAT法检测。阳性检出率的比较使用卡方检验。结果临床诊断肺结核570例,痰培养结核菌阳性率46.5%(265/570),SAT法检测阳性率46.7%(266/570),痰涂片阳性率34.4%(196/570),SAT与涂片法阳性率的差异有统计学意义(χ2=17.83,P<0.01)。在涂阴肺结核中,SAT阳性率达19.5%。以培养阳性作为金标准,SAT法诊断结核病的灵敏度为89.4%,特异度96.3%,阳性似然比为24.2,阴性似然比为0.11,一致率是94.6%,阳性预测值是88.4%,阴性预测值为96.6%。在非结核分枝杆菌肺病中SAT检测阳性率为零。结论 SAT-TB法在肺结核的早期诊断中是一种快速、准确、敏感的方法,值得推广。 展开更多
关键词 实时荧光核酸恒温扩增 结核/肺 结核分枝杆菌 痰涂片 痰培养
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恒温扩增荧光检测法检测结核分枝杆菌复合群的应用价值 被引量:3
13
作者 李静 吴哲渊 +5 位作者 杨景卉 杨丽媛 王莉莉 袁锋 沈鑫 江渊 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2022年第11期1167-1173,共7页
目的:评价恒温扩增荧光检测法检测痰样本中结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTBC)的临床应用价值。方法:选择上海市6家结核病定点医院作为研究现场,收集2020年1月至2020年11月各家医院肺科门诊初诊的1848例疑似... 目的:评价恒温扩增荧光检测法检测痰样本中结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTBC)的临床应用价值。方法:选择上海市6家结核病定点医院作为研究现场,收集2020年1月至2020年11月各家医院肺科门诊初诊的1848例疑似肺结核患者痰样本,分别进行恒温扩增荧光检测法与传统的痰涂片、BACTEC MGIT 960液体培养(液体培养)及GeneXpert MTB/RIF(简称“GeneXpert”)检测。以液体培养为参照标准,分析比较恒温扩增荧光检测法、痰涂片及GeneXpert的检测效能。结果:在1848例患者痰样本中,恒温扩增荧光检测法、痰涂片、液体培养和GeneXpert检测MTBC的检出率分别为16.7%(309/1848)、14.4%(266/1848)、25.4%(470/1848)和28.7%(530/1848)。以液体培养为参照标准,恒温扩增荧光检测法、痰涂片和GeneXpert检测的敏感度分别为58.94%(277/470)、52.77%(248/470)、80.43%(378/470);特异度分别为97.68%(1346/1378)、98.69%(1360/1378)、88.97%(1226/1378);一致率分别为87.82%(1623/1848)、87.01%(1608/1848)、86.80%(1604/1848),Kappa值分别为0.638、0.600、0.666。4种不同性状痰样本(黏液样痰、唾液样痰、干酪样痰和血样痰)中,除在唾液样痰中液体培养检出率最高[38.8%(59/152)]外,其余3种性状痰样(黏液样痰、干酪样痰和血样痰)均为GeneXpert检出率最高,分别为51.5%(308/598)、66.7%(28/42)和64.0%(16/25)。结论:恒温扩增荧光检测法检测痰样本中MTBC具有良好的检测特异度,该方法和痰涂片及GeneXpert与液体培养检测结果一致性均一般,临床可以根据实验室硬件条件及患者情况选择开展多种方法联合检测,以提高肺结核的病原学诊断率。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 核酸扩增技术 诊断 鉴别
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LAMP技术在涂阴肺结核中的临床快速诊断价值 被引量:14
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作者 陈伊 黄文焰 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第19期3283-3286,共4页
目的评估LAMP技术在涂阴肺结核中的临床快速诊断价值。方法选取2016~2017年我院临床确诊为肺结核的患者和非结核患者共270例进行LAMP法、痰涂片法及GeneXpert MTB/RIF检测。结果 LAMP法、痰涂片抗酸染色法及GeneXpert MTB/RIF在肺结核... 目的评估LAMP技术在涂阴肺结核中的临床快速诊断价值。方法选取2016~2017年我院临床确诊为肺结核的患者和非结核患者共270例进行LAMP法、痰涂片法及GeneXpert MTB/RIF检测。结果 LAMP法、痰涂片抗酸染色法及GeneXpert MTB/RIF在肺结核组的阳性率分别为48.8%、35.2%及52.4%。LAMP法在肺结核组与非结核组的阳性检出率比较,差异有统计学意义(P <0.05)。LAMP法与痰涂片抗酸染色在肺结核组中比较,阳性率差异有统计学意义(P <0.05)。LAMP法与GeneXpert MTB/RIF技术在肺结核组中比较,两方法一致性最佳,阳性率差异无统计学意义(P> 0.05)。在110例涂阴肺结核患者组中,以GeneXpert MTB/RIF为比较标准,LAMP法的敏感度为82.8%(24/29)、特异度为97.5%(79/81),总体一致率93.6%(103/110)。两种方法一致性相比,两者一致性最佳,阳性率差异无统计学意义(P> 0.05)。结论痰标本检测中LAMP法在涂阴肺结核快速检测方面具有良好的诊断效能,具有很好的临床应用价值。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 环介导等温扩增 GeneXpert MTB/RIF 诊断
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环介导等温扩增技术在结核性胸膜炎快速诊断中的应用 被引量:5
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作者 刘洋 郭艳玲 +3 位作者 姜广路 孙琦 邢爱英 张宗德 《临床肺科杂志》 2015年第4期583-585,共3页
目的探讨针对hsp X基因设计引物的环介导等温扩增技术(LAMP)对结核性胸膜炎患者结核分枝杆菌的诊断价值。方法采用LAMP技术对结核分枝杆菌标准株H37Rv的DNA样品进行检测,评价LAMP技术的检测限;同时对8种非结核分枝杆菌菌株及阴沟肠杆菌... 目的探讨针对hsp X基因设计引物的环介导等温扩增技术(LAMP)对结核性胸膜炎患者结核分枝杆菌的诊断价值。方法采用LAMP技术对结核分枝杆菌标准株H37Rv的DNA样品进行检测,评价LAMP技术的检测限;同时对8种非结核分枝杆菌菌株及阴沟肠杆菌和大肠埃希菌标准菌株进行鉴定,评价该方法的特异性。对58例结核性胸膜炎患者和32例肺癌患者胸腔积液样本结核分枝杆菌进行检测,评价LAMP技术的临床应用价值。结果 LAMP对倍比稀释的H37Rv的DNA样品检测结果为阳性,检测限为320a M。八种非结核分枝杆菌和2种普通菌菌株检测结果为阴性。LAMP对胸腔积液标本检测的灵敏度是75.8%(44/58),定量PCR为79.3%(46/58),无显著差别(χ2=0.25,P>0.05);均显著高于涂片法39.6%(23/58),差异具有统计学意义(χ2=17.39,P<0.01)。结论 LAMP技术是一种简单快速有效的等温扩增技术,由于其较高的灵敏度和特异度,可以对结核性胸膜炎患者胸腔积液标本快速鉴定。 展开更多
关键词 环介导等温扩增 结核分枝杆菌 胸腔积液
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环介导等温扩增技术在检测痰标本结核分枝杆菌中的应用 被引量:4
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作者 王静 张艳 +3 位作者 胡钰卿 竺祖军 岳永宁 朱敏 《浙江医学》 CAS 2013年第13期1251-1253,共3页
目的评价结核分枝杆菌环介导等温扩增技术(LAMP)快速检测试剂盒的临床应用效果。方法选取肺结核患者183例(肺结核组)和非肺结核患者120例(对照组)。采用涂片抗酸染色、罗氏培养法和LAMP对痰标本进行检测,采用结核分枝杆菌核酸扩增荧光... 目的评价结核分枝杆菌环介导等温扩增技术(LAMP)快速检测试剂盒的临床应用效果。方法选取肺结核患者183例(肺结核组)和非肺结核患者120例(对照组)。采用涂片抗酸染色、罗氏培养法和LAMP对痰标本进行检测,采用结核分枝杆菌核酸扩增荧光检测试剂盒(TB-PCR)检测罗氏培养与LAMP结果不符的标本,分析LAMP与罗氏培养的检出率及两者的符合率。结果去除经鉴定为非结核分枝杆菌的10例标本,涂片抗酸染色、罗氏培养法和LAMP的阳性检出率分为64.1%(111/173)、64.7%(112/173)、78.6%(136/173)。LAMP与抗酸染色、罗氏培养阳性检出率的差异有统计学意义(P<0.01),抗酸染色与罗氏培养比较差异无统计学意义(P>0.05)。以罗氏培养为金标准,LAMP检测的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为88.5%(108/122)、82.3%(149/181)、77.1%(108/140)、91.4%(149/163),LAMP检测与罗氏培养的符合率为84.8%(257/303)。结论结核分枝杆菌环介导等温扩增技术的灵敏度和特异度高,具有简单易行、快速准确的特点,在肺结核患者的早期诊断中将发挥重要作用。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 环介导等温扩增技术
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LAMP技术检测结核分枝杆菌的临床时效性分析 被引量:3
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作者 陈伊 黄文焰 邓君丽 《国际检验医学杂志》 CAS 2018年第13期1622-1624,1628,共4页
目的探讨环介导等温扩增法(LAMP)检测结核分枝杆菌在基层诊疗机构中的临床应用价值。方法采用LAMP法及抗酸染色涂片法对140例临床诊断为肺结核的患者的痰标本进行检测。统计分析采用McNemar检验和Kappa检验。结果 140例痰标本中,抗酸染... 目的探讨环介导等温扩增法(LAMP)检测结核分枝杆菌在基层诊疗机构中的临床应用价值。方法采用LAMP法及抗酸染色涂片法对140例临床诊断为肺结核的患者的痰标本进行检测。统计分析采用McNemar检验和Kappa检验。结果 140例痰标本中,抗酸染色涂片法及LAMP法的阳性检出率分别为29.3%(41/140)和45.0%(63/140)。与抗酸染色涂片法比较,LAMP法的灵敏度为97.6%(40/41)、特异度为76.8%(76/99),总体一致率82.9%(116/140)。两种方法一致性相比,差异有统计学意义(Kappa=0.642,P<0.05),两者一致性良好。在检测时间上,与涂片法相比,大批量标本检测中LAMP法所用时间较短。结论痰标本检测中,LAMP法阳性检出率优于抗酸染色涂片法,批量检测性好,具有较好的临床应用前景。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 环介导等温扩增 结核 诊断
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恒温扩增法快速检测结核分枝杆菌复合群的临床应用 被引量:5
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作者 韩珍 朱惠慧 范远珍 《锦州医科大学学报》 CAS 2020年第1期24-26,共3页
目的比较痰涂片、罗氏培养法和恒温扩增荧光法在快速检测临床标本中结核分枝杆菌的检测效果,分析恒温扩增荧光法在临床应用中的优势。方法选取2018年1月至2019年5月期间在惠州市结核病防治研究所结核科就诊的1000名肺结核患者作为研究对... 目的比较痰涂片、罗氏培养法和恒温扩增荧光法在快速检测临床标本中结核分枝杆菌的检测效果,分析恒温扩增荧光法在临床应用中的优势。方法选取2018年1月至2019年5月期间在惠州市结核病防治研究所结核科就诊的1000名肺结核患者作为研究对象,采集足量晨痰标本,同时采用痰涂片镜检法、罗氏培养法、恒温扩增荧光法进行结核杆菌检测。采用阳性率来评价检测方法的检测效果;采用Kappa值来评价恒温扩增荧光法与罗氏培养法的检测效果一致性。结果1000例肺结核患者的痰标本进行痰涂片法、罗氏培养法、恒温扩增荧光法的检测阳性率分别为44.7%、55.4%和70.3%;对恒温扩增荧光法和罗氏培养法的检测结果进行一致性检验,Kappa值为0.592(P﹤0.01)。结论恒温扩增荧光法检测肺结核患者痰标本的阳性率明显高于传统的涂片镜检法和罗氏培养法,且恒温扩增法与临床金标准罗氏培养法的检测结果具有中等程度的一致性。恒温扩增荧光法具有阳性率高、结果客观准确、操作简便、检测耗时短、操作风险低等优点,具有良好的临床应用价值。 展开更多
关键词 恒温扩增荧光检测 肺结核 结核分枝杆菌 痰涂片 罗氏培养法
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实时荧光环介导等温扩增在快速检测结核分枝杆菌中的应用 被引量:1
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作者 曹东林 胡亮杉 +4 位作者 曹炜伟 石磊 叶蕾 叶泽兵 田军章 《中国急救复苏与灾害医学杂志》 2013年第11期993-996,共4页
【摘要】目的建立实时荧光环介导等温扩增快速检测结核分枝杆菌的方法。方法针对结核分枝杆菌特异序列建立实时荧光环介导等温扩增技术;对其特异性和敏感性进行评估;通过敏感性和特异性等指标验证其稳定性。结果建立的实时荧光环介导... 【摘要】目的建立实时荧光环介导等温扩增快速检测结核分枝杆菌的方法。方法针对结核分枝杆菌特异序列建立实时荧光环介导等温扩增技术;对其特异性和敏感性进行评估;通过敏感性和特异性等指标验证其稳定性。结果建立的实时荧光环介导等温扩增法对结核和非结核分枝杆菌标准菌株检测的敏感性和特异性均为100%,灵敏度可达102个菌/mL;痰标本结核分歧杆菌检测的敏感性为94.64%(53,56),荧光定量聚合酶链式反应方法检测的敏感性为92.86%(52/56);检测的特异性为96.55%(28,29),荧光定量聚合酶链式反应方法检测的特异性为96.55%(28/29)。结论建立实时荧光环介导等温扩增检测结核分枝杆菌的方法,敏感性和特异性强,灵敏度高,稳定性好,可用于痰液中结核分枝杆菌的快速检测。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 实时荧光环介导等温扩增 快速检测
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基于常规引物靶向结核分枝杆菌Ⅱ型分枝杆菌散在重复单位的恒温扩增
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作者 吴康 屈蓉 +4 位作者 王刚 薛清华 吕建新 Douglas BLowrie 范小勇 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期799-808,共10页
目的探讨基于特异常规引物(即引物不需折叠成特定二级结构)靶向恒温扩增重复DNA序列的方法,并测试其检测结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)的可能性。方法以合成的重复DNA或以抽提的细菌基因组DNA为模板,用Bst 2.0 WarmStar... 目的探讨基于特异常规引物(即引物不需折叠成特定二级结构)靶向恒温扩增重复DNA序列的方法,并测试其检测结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)的可能性。方法以合成的重复DNA或以抽提的细菌基因组DNA为模板,用Bst 2.0 WarmStart DNA聚合酶进行恒温扩增。用琼脂糖凝胶电泳检测扩增结果。结果合成的重复DNA可用其特异常规引物进行恒温扩增。进一步,Mtb H37Rv Ⅱ型分枝杆菌散在重复单位(mycobacterial interspersed repetitive units,MIRUs)可用其特异常规引物对(即Ⅱ_MIRU-F和Ⅱ_MIRU-R)或单引物(即Ⅱ_MIRU-F)进行恒温扩增。相比于非分枝杆菌菌株、非结核分枝杆菌菌株、Mtb复合物菌株和临床分离株,Ⅱ_MIRU-F能够高特异地扩增Mtb菌株。Ⅱ_MIRU-F针对Mtb H37Rv基因组DNA的检测下限较高,且不能特异地区分Mtb阴性痰液样本和Mtb阳性痰液样本。结论常规引物可恒温扩增重复DNA序列(包括MtbⅡ型MIRUs);MtbⅡ型MIRUs特异引物Ⅱ_MIRU-F不适合用于痰液样本的检测。 展开更多
关键词 恒温扩增 重复DNA 结核分枝杆菌 Ⅱ型分枝杆菌散在重复单位
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