结核分枝杆菌总RNA提取方法的比较研究

目的鉴于结核分枝杆菌RNA提取难度很大，为了提取到高质量的RNA，探讨两种不同方法提取结核分枝杆菌总RNA，并在实验中对其进行优化。方法收集结核分枝杆菌培养物，分别用甲醇和玻璃粉裂解其细胞壁，然后加入Trizol提取结核分枝杆菌总RNA，用琼脂糖凝胶电泳检测其完整性，用Nanodrop2000检测其得率和纯度。结果玻璃粉裂解细胞壁法和甲醇裂解细胞壁法提取的结核分枝杆菌总RNA的获得率分别为6．124±l｜144和13．437±1．76760〈0．01），纯度A260／A280的值分别为1．924±0．039和1．899±0．072（P〉O．01）。结论玻璃粉裂解细胞壁法和甲醇裂解细胞壁法提取的结核分枝杆菌总RNA均未发生明显降解。用甲醇裂解法提取的结核分枝杆菌总RNA的获得率明显高于玻璃粉法，差异具有显著性；方法完整性和纯度均能满足实验需要，无明显差异。