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Understanding the metabolism of Mycoplasma mycoides subsp. capri in vitro by a transcriptomic analysis 被引量:2
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作者 WANG Xiao-hui WANG Yan-fang +7 位作者 HUANG Hai-bi BAI Fan SHI Xiao-na MA Chang-jiao GAO Yuan ZHANG Jian-hua ZHANG Wen-guang HAO Yong-qing 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2018年第2期428-435,共8页
It is generally known that the culture for mycoplasma is time-consuming and a variety of nutrients are needed in the culture medium. This brings a lot of difficulties to mycoplasma research and application, including ... It is generally known that the culture for mycoplasma is time-consuming and a variety of nutrients are needed in the culture medium. This brings a lot of difficulties to mycoplasma research and application, including Mycoplasma mycoides subsp. capri(Mmc). Furthermore, little research on the characteristics of Mmc metabolism has been reported. In this study, Mmc PG3 strain cultures were investigated for dynamic gene expression. Culture samples were harvested during logarithmic phase(PG3-1), stationary phase(PG3-2), decline phase(PG3-3) and late decline phase(PG3-4). Twelve RNA samples(three replicates for each of the four growth stages considered) from these cultures were collected and sequenced. Paired comparison between consecutive growth phases in the four growth stages showed 45 significant differentially expressed genes(P〈0.01) were linked to PG3 metabolism. The enzymes these genes coded were mainly involved in ATP synthase, pyrimidine metabolism, nicotinate and nicotinamide metabolism, arginine and proline metabolism. Among these, cytidylate kinase, fructose 1,6-bisphosphate aldolases Class II, nicotinate-nucleotide adenylyltransferase and dihydrolipoamide dehydrogenase play a key role in Mmc metabolism. These results provide a baseline to build our understanding of the metabolic pathway of Mmc. 展开更多
关键词 metabolism mycoplasma mycoides subsp.capri transcriptomic
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Detection of Antibodies against Mycoplasma mycoides subsp. capri in Goats with the Complement Fixation Test
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作者 José L. Corona-Vargas Myrna A. Vicencio-Mallén +3 位作者 Frida Salmerón-Sosa Erika M. Carrillo-Casas Francisco J. Trigo-Tavera Rosa E. Miranda-Morales 《Advances in Microbiology》 2016年第13期959-964,共6页
Mycoplasma mycoides subsp. capri is the causative agent of severe and acute respiratory problems in goats, which spreads rapidly and represents high mortality. The serological profile of the goat population, from nine... Mycoplasma mycoides subsp. capri is the causative agent of severe and acute respiratory problems in goats, which spreads rapidly and represents high mortality. The serological profile of the goat population, from nine regions in seven states of Mexico, was screened by the Complement Fixation test (CF) in sera from asymptomatic goats and animals with mild respiratory symptoms. Sera and nasal swabs of 827 goats were collected for the isolation of the organism. An antiserum was prepared against a previously isolated field strain of Mycoplasma mycoides subsp. capri. CF Antibody titers were associated with the results of the isolates to determine the cutoff point. The CF was considered as positive if its result was ≥1/16. The CF registered 251 positive goats (30.35%) and 576 (69.65%) negative;the test showed high sensitivity (93.33%) and specificity (72.27%). In the specific case of diagnosis for mycoplasmosis associated with respiratory problems in goats, the CF proved to be a good diagnosis test, this study determined that 30% of the goat population showed antibody titers against Mycoplasma mycoides subsp. capri and revealed those animals who have had contact with this microorganism during their lives regardless of the presence or absence of respiratory symptoms. 展开更多
关键词 Complement Fixation Indirect Agglutination MYCOPLASMOSIS mycoplasma mycoides mycoplasma mycoides subsp. capri
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山羊传染性胸膜肺炎病原分离与鉴定 被引量:24
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作者 杜永凤 文心田 +2 位作者 曹三杰 肖驰 易佳 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期618-621,共4页
本试验从传染性胸膜肺炎的山羊体内分离获得两株支原体Y1和Y2,通过病原分离、形态学观察、生化试验、HA、生长抑制试验和代谢抑制试验等试验,证实Y1和Y2的形态与培养特性、生化反应特性和血清学特性分别与模式株丝状支原体山羊亚种PG3... 本试验从传染性胸膜肺炎的山羊体内分离获得两株支原体Y1和Y2,通过病原分离、形态学观察、生化试验、HA、生长抑制试验和代谢抑制试验等试验,证实Y1和Y2的形态与培养特性、生化反应特性和血清学特性分别与模式株丝状支原体山羊亚种PG3和绵羊支原体Y98相接近;动物回归试验成功复制出山羊传染性胸膜肺炎的典型临床症状和病理剖解变化。结果表明Y1和Y2分别为丝状支原体山羊亚种和绵羊支原体。 展开更多
关键词 传染性胸膜肺炎 丝状支原体山羊亚种 绵羊支原体 分离 鉴定 山羊
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应用双重PCR方法检测羊支原体肺炎病原 被引量:12
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作者 储岳峰 高鹏程 +4 位作者 赵萍 贺英 郭晗 逯忠新 赵海燕 《畜牧与兽医》 北大核心 2009年第12期23-26,共4页
通过对丝状支原体山羊亚种(M.mycoides subsp.capri,Mmc)特异性引物MmcF/MmcR和绵羊肺炎支原体(M.ovipneumontiae,Mo)特异性引物LmF/LmR退火温度、引物浓度比例等条件的选择,建立了一个可以同时检测Mmc和Mo的双重PCR方法。该方法可同时... 通过对丝状支原体山羊亚种(M.mycoides subsp.capri,Mmc)特异性引物MmcF/MmcR和绵羊肺炎支原体(M.ovipneumontiae,Mo)特异性引物LmF/LmR退火温度、引物浓度比例等条件的选择,建立了一个可以同时检测Mmc和Mo的双重PCR方法。该方法可同时扩增出Mmc 195 bp和Mo 361 bp目的片段,但对其他病原菌不能扩增出任何条带,具有良好的特异性。敏感性试验表明,该方法能够分别检测出0.1ng的Mmc DNA和0.01 ng的Mo DNA,或同时检测出1ng Mmc和1ng Mo混合的DNA。用该双重PCR方法可对实验室保存的4株绵羊肺炎支原体和2株丝状支原体山羊亚种进行准确鉴定,并可从临床病料中检测出相应支原体,表明建立的双重PCR方法可用于Mmc和Mo的快速鉴定、实验室诊断和病原学调查。 展开更多
关键词 丝状支原体山羊亚种 绵羊肺炎支原体 双重PCR 检测
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丝状支原体山羊亚种最佳培养基的筛选 被引量:10
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作者 赵萍 储岳峰 +2 位作者 高鹏程 贺英 逯忠新 《动物医学进展》 CSCD 2008年第1期21-23,共3页
在不同条件下对丝状支原体山羊亚种进行培养,通过PPLO精氨酸培养基、牛心汤培养基、MEM-KM2培养基以及不同种类动物血清和同一动物不同浓度血清,从生长滴度、生长速度、培养基来源、造价各个方面的比较试验,结果显示,加100 mL/L马血清的... 在不同条件下对丝状支原体山羊亚种进行培养,通过PPLO精氨酸培养基、牛心汤培养基、MEM-KM2培养基以及不同种类动物血清和同一动物不同浓度血清,从生长滴度、生长速度、培养基来源、造价各个方面的比较试验,结果显示,加100 mL/L马血清的MEM-KM2培养基更适合于丝状支原体山羊亚种的培养,它的生长滴度可达109,所需时间只为5 d,并且配置方便,价格合理。这一结果为丝状支原体山羊亚种抗原的大批量生产奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 丝状支原体山羊亚种 生长条件 培养基
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丝状霉形体山羊亚种血清抗体间接ELISA检测方法的建立 被引量:4
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作者 赵萍 逯忠新 +3 位作者 储岳峰 高鹏程 贺英 石琴 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期859-862,共4页
利用丝状霉形体山羊亚种标准株PG3制备抗原,经纯化后作为包被抗原建立了间接ELISA方法,用于检测丝状霉形体山羊亚种血清抗体。经方阵滴定确定最佳抗原包被浓度为1.09μg/mL,血清样品最佳稀释度为1∶64,兔抗羊IgG辣根过氧化物酶结合物的... 利用丝状霉形体山羊亚种标准株PG3制备抗原,经纯化后作为包被抗原建立了间接ELISA方法,用于检测丝状霉形体山羊亚种血清抗体。经方阵滴定确定最佳抗原包被浓度为1.09μg/mL,血清样品最佳稀释度为1∶64,兔抗羊IgG辣根过氧化物酶结合物的最佳稀释度为1∶40 000,抗原抗体最佳结合时间为1 h。判定标准为样品D490 nm值与标准阴性血清D490 nm值之比(P/N)≥3为阳性,≤2.5为阴性,介于二者之间的为可疑。重复性和稳定性试验证明,建立的间接ELISA的稳定性和重复性良好,与间接血凝试验相比,其敏感性较高。 展开更多
关键词 间接ELISA 丝状霉形体山羊亚种 血清抗体
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丝状霉形体山羊亚种巢式PCR检测方法的建立 被引量:4
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作者 储岳峰 逯忠新 +2 位作者 赵萍 高鹏程 贺英 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期940-943,共4页
根据已发表的丝状霉形体簇各成员核苷酸序列,设计合成了2对引物McF、McR和MmcF、MmcR,建立了可以鉴别丝状霉形体山羊亚种(Mycoplasma mycoidessubsp.capri,Mmc)的巢式PCR方法。特异性和敏感性试验结果显示,该方法只能对Mmc扩增出195 bp... 根据已发表的丝状霉形体簇各成员核苷酸序列,设计合成了2对引物McF、McR和MmcF、MmcR,建立了可以鉴别丝状霉形体山羊亚种(Mycoplasma mycoidessubsp.capri,Mmc)的巢式PCR方法。特异性和敏感性试验结果显示,该方法只能对Mmc扩增出195 bp的片段,而对其他病原菌不能扩增出任何条带,它最低能够检测出10 pg的Mmc DNA,说明该方法具有良好的特异性和很高的敏感性。田间试验结果显示,对4株霉形体分离株及其病料均可扩增出Mmc特异性片段,表明,该巢式PCR方法可用于Mmc快速鉴定和流行病学调查。 展开更多
关键词 丝状霉形体山羊亚种 巢式PCR 山羊传染性胸膜肺炎
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丝状支原体山羊亚种FJ-GT株的分离和鉴定 被引量:6
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作者 江锦秀 林裕胜 +2 位作者 游伟 江斌 胡奇林 《中国农学通报》 2016年第29期11-16,共6页
为明确福建省某羊场发生的疑似山羊传染性胸膜肺炎病例的病原,对肺组织的病原进行分离培养和纯化,通过生化试验和特异性PCR方法进行鉴定,用16S r RNA通用引物对分离株进行克隆测序。将分离菌株命名为FJ-GT。结果显示菌落呈典型的油煎蛋... 为明确福建省某羊场发生的疑似山羊传染性胸膜肺炎病例的病原,对肺组织的病原进行分离培养和纯化,通过生化试验和特异性PCR方法进行鉴定,用16S r RNA通用引物对分离株进行克隆测序。将分离菌株命名为FJ-GT。结果显示菌落呈典型的油煎蛋状,中心有棕褐色突起;分离株能发酵葡萄糖,不能水解精氨酸,不分解尿素,血细胞吸附试验呈阴性,胆固醇需要试验、美兰还原反应和氯化四氮唑还原反应均呈阳性,溶血试验为β溶血;PCR结果扩增出丝状支原体山羊亚种(Mycoplasma mycoides subsp.capri,Mmc)特异大小为394 bp的目的片段;菌株16S r RNA序列与丝状支原体山羊亚种标准株PG3的序列比较,同源性为99.5%。鉴定结果表明本次分离到的支原体为丝状支原体山羊亚种。本研究首次从病原学角度证明了福建省存在由丝状支原体山羊亚种引起的羊支原体性肺炎,对福建省羊支原体性肺炎的诊断和有效防控具有重要的指导意义。 展开更多
关键词 丝状支原体山羊亚种 分离 鉴定 羊支原体性肺炎 福建
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绵羊肺炎支原体、丝状支原体山羊亚种和精氨酸支原体多重PCR检测方法的建立及应用 被引量:8
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作者 郑佳琪 黄海碧 +4 位作者 王晓晖 刘文浩 麻昌姣 岳全占 郝永清 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1131-1134,共4页
根据GenBank登陆的绵羊肺炎支原体(MO)、丝状支原体山羊亚种(MmC)和精氨酸支原体(M.arg)的相关基因序列,分别设计了扩增MO hsp70基因、MmC hsp70基因和M.arg ADI基因片段的特异性引物,通过对反应条件和反应体系的优化,建立了MO、MmC和M.... 根据GenBank登陆的绵羊肺炎支原体(MO)、丝状支原体山羊亚种(MmC)和精氨酸支原体(M.arg)的相关基因序列,分别设计了扩增MO hsp70基因、MmC hsp70基因和M.arg ADI基因片段的特异性引物,通过对反应条件和反应体系的优化,建立了MO、MmC和M.arg的多重PCR检测方法。特异性试验结果显示:该方法能同时扩增出MO 703bp、MmC 385bp和M.arg223bp的特异性目的片段,而对其他病原的DNA扩增为阴性。敏感性试验结果显示:该方法对这3种支原体的最低核酸检出量均为10pg。55份临床样品检测结果表明:三重PCR检测结果与分离培养诊断方法一致,均能检测出样品中的病原菌。本试验建立的多重PCR方法能为MO、MmC和M.arg的感染提供正确快速诊断方法。 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体 丝状支原体山羊亚种 精氨酸支原体 多重PCR
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丝状支原体山羊亚种PG3株的全基因组序列测定与分析 被引量:5
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作者 徐春光 郝永清 +2 位作者 郝瑞霞 张玲 刘波 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期2669-2678,共10页
【目的】全面了解丝状支原体山羊亚种PG3株的全基因组序列信息,寻找该病原体的主要保护性抗原基因。【方法】利用高通量Illumina Hi Seq 2000测序技术对丝状支原体山羊亚种PG3株的全基因组进行测序与拼接,借助软件和数据库对全基因组序... 【目的】全面了解丝状支原体山羊亚种PG3株的全基因组序列信息,寻找该病原体的主要保护性抗原基因。【方法】利用高通量Illumina Hi Seq 2000测序技术对丝状支原体山羊亚种PG3株的全基因组进行测序与拼接,借助软件和数据库对全基因组序列所承载的遗传信息进行注释和分析。【结果】丝状支原体山羊亚种PG3株基因组大小为1 025 065 bp,G+C%为23.6%,预测含有846个编码基因。根据COG分类和KEGG代谢通路分类,基因组中绝大多数基因主要与蛋白翻译、核糖体结构与合成、DNA复制与修复、糖代谢和环境信号传递与转换方面有关。该菌株具有丝状支原体山羊亚种特有的麦芽糊精/麦芽糖代谢途径。与Mmc str.95010的基因组的比对结果显示二者具有良好的共线性关系。在基因组中发现3个串联排列的可变表面脂蛋白基因,即GL000459、GL000461和GL000462。【结论】获得丝状支原体山羊亚种PG3株的全基因组序列,分析基因组基本特征,初步解析3个串联排列的可变表面脂蛋白基因,为进一步研究支原体可变表面脂蛋白的功能和研制生物工程疫苗奠定基础。 展开更多
关键词 丝状支原体山羊亚种 全基因组序列测定 可变表面脂蛋白
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