三种血清学方法和qPCR方法在鸡滑液囊支原体检测中的综合应用研究

为评价不同方法对鸡滑液囊支原体(MS)活疫苗免疫和非免疫状态鸡群的监测效果,研究分别采用HI、SPA与ELISA三种抗体检测方法和qPCR方法同步对某养殖场A、B和C三组鸡群进行MS感染和抗体水平监测,其中A鸡群23日龄免疫MS活疫苗(MS-H株),B、C鸡群不免疫MS疫苗。结果显示:三种血清学检测方法所测MS抗体阳性率趋势基本一致,HI抗体效价变化规律和ELISA抗体效价变化规律相似,但血清学方法相对于qPCR方法具有一定的滞后性,qPCR可以最早发现MS野毒感染,且在使用活疫苗免疫的情况下对疫苗和野毒进行鉴别检测。研究提示:在条件允许的情况下,qPCR可以作为MS首选的监测方法;当检测条件受限时,上述三种血清学方法同样也可以用于评估MS野毒感染状况,但对结果的判断受母源抗体水平、疫苗免疫状况、野毒感染时间等多重因素的影响,在结果判断时应进行综合分析。

被动凝集法和化学发光法诊断儿童肺炎支原体感染的应用价值

目的探讨被动凝集法和化学发光法诊断儿童肺炎支原体(MP)感染的价值。方法选取本院2021年4—12月收治的53呼吸道感染患儿作为研究对象,抽取患儿空腹静脉血3mL,采用被动凝集法、化学发光法进行检测,以免疫荧光法检测结果为金标准,分析动凝集法、化学发光法对儿童肺炎支原体感染的检出率以及对儿童肺炎支原体感染的诊断效能。结果以免疫荧光法为金标准,检测53例呼吸道感染患儿,其结果显示MP感染43例,检出率为43/53(81.13%),非MP感染为10例,检出率为10/53(18.87%);其中化学发光法与病原学判断标准一致性好(Kappa=0.870),被动凝集法与病原学判断标准一致性尚可(Kappa=-0.537);化学发光法检测肺炎MP感染的特异度(40.00%)、敏感度(69.77%)、阳性预测值(83.33%)、阴性预测值(23.53%)及诊断准确率(64.15%)均高于被动凝集法检测,两者之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论被动凝集法、化学发光法均可对儿童肺炎支原体感染进行检查,化学发光法检测可提高对儿童MP感染早期的检测诊断率。

317例儿童肺炎支原体感染检验结果分析

目的探讨荧光聚合酶链反应（PCR）、被动凝集法、C反应蛋白（CRP）检测在儿童呼吸道肺炎支原体（MP）感染的临床应用价值及意义,寻求合理的检测方法以提高病原体的检出率,综合各种检测方法的优势,合理的指导临床用药。方法选择本院诊治的呼吸道感染患儿317例,荧光PCR检测咽拭子及深部痰液,被动凝集法检测患儿血清,免疫比浊法检测血浆CRP。结果荧光PCR阳性率15.1%（48/317）,单份血清被动凝集法30.6%（97/317）,双份血清被动凝集法35.6%（113/317）,荧光PCR联合被动凝集法41.6%（132/317）。荧光PCR与被动凝集法的结果一致性比较差,荧光PCR阳性患者检测平均病程8.2 d,被动凝集法阳性患者检测平均病程12.6 d,t=11.67,P〈0.001,两者检出时间差异有统计学意义,荧光PCR更适用于早期诊断。联合血浆CRP检测,以CRP〉6 mg/L为阳性,各种方法检测阳性患儿中CRP阳性率为荧光PCR阳性率的52.1%（25/48）;被动凝集法阳性滴度（1∶40）组71.6%（53/74）;被动凝集法阳性滴度大于（1∶40）组79.5%（31/39）;荧光PCR与CRP的阳性符合率低于被动凝集法。在不同年龄段3种方法的检测,0~3岁组62例呼吸道感染患儿单份及双份血清被动凝集法阳性率分别为3.2%（2/62）和4.8%（3/62）,与荧光PCR阳性率14.5%（9/62）比较,χ^2=6.64,P〈0.05,差异有统计学意义,荧光PCR更适用于婴幼儿的MP感染检测。结论荧光PCR更适用于早期诊断及婴幼儿的MP感染检测。被动凝集法与CRP对荧光PCR的检测结果,尤其对带菌人群的临床假阳性结果可提供辅助诊断,合理的指导临床用药。

胶体金法和被动凝集法在肺炎支原体检测中的比较

目的:比较胶体金法和被动凝集法检测肺炎支原体(MP)感染的符合率,探讨两种方法在快速诊断MP感染中的临床价值。方法:选取MP感染就诊者200例,其中儿童组100例,成年组100例,采用胶体金法和被动凝集法检测两组血清中MP-IgM抗体。结果:在儿童组中被动凝集法MP-IgM抗体阳性检出率略高于胶体金法,但差异无统计学意义(P>0.05),而在成年组中被动凝集法阳性检出率则显著高于胶体金法,差异有统计学意义(P<0.05);在儿童组中当MP-IgM抗体滴度1∶160,≥1∶320时,胶体金法阳性结果与被动凝集法的符合率分别为95.40%,95.30%;在成年组中当MP-IgM抗体滴度1∶80,1∶160,≥1∶320时,胶体金法阳性结果与被动凝集法的符合率分别为0,61.90%,63.80%。结论:在小儿MP检测中,对于高滴度MP-IgM抗体,胶体金法阳性符合率可达到临床诊断需求。临床医师可根据患者年龄、发病进程选择合适的方法,以实现简便、快速、准确的诊断肺炎支原体感染。

伪狂犬病毒单克隆抗体的特性和应用

应用4株伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PrV)作免疫原,建立了23株分泌抗PrV的单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株。根据其免疫生物学特性可分为4个类型:(1)具有FA、ELISA和Western blot特性;(2)具有FA和ELISA特性;(3)具有FA和Western blot特性;(4)只有FA特性。根据ELISA和Western blot试验,McAb可将5株PrV分为两种不同的抗原群。应用此McAb建立并比较了3种检测PrV抗原的方法(FA、RPHA、ELISA)。FA和RPHA特异性强,与分离病毒的符合率分别为88.2％和76.5％。两者的阳性检测率统计学上无显著差异(P>0.05)。RPHA设备简单,操作简便,结果直观,更适于在基层单位推广应用。

两种血清学检测方法在婴、幼儿肺炎支原体感染早期诊断中的应用研究

目的 比较和分析肺炎支原体抗体的两种血清学检测方法,探讨其在婴、幼儿肺炎支原体感染早期诊断中的临床意义.方法 收集急性呼吸道感染患儿3 365例,根据不同年龄将其分为0～〈1岁组（n=1 267）、1～〈3岁组（n=1 709）、3～〈6岁组（n=257）、6～〈13岁组（n=132）.采用被动颗粒凝集法（PPA）及间接免疫荧光法（IFA）检测肺炎支原体抗体MP-IgM,对IFA和PPA检测结果不一致的患儿进行双份血清MP-IgM抗体效价检测.结果 0～〈1岁和1～〈3岁组患儿IFA检测的MP-IgM阳性率高于PPA检测（P＜0.01）,3～〈6岁组和6～〈13岁组患儿采用两种方法检测的MP-IgM阳性率比较,差异无统计学意义（P〉0.05）.两种检测方法的阳性符合率为95.53%（1 113/1 165）,阴性符合率为89.45%（1 968/2 200）,总符合率为91.56%（3 081/3 365）.28例患儿双份血清MP-IgM抗体效价检测中,24例患儿的肺炎支原体抗体升高4倍.结论 IFA和PPA联合检测可有效提高肺炎支原体感染早期诊断的敏感性和特异性.

LPS-PHA、肥达反应和细菌培养诊断伤寒的比较研究——附102例检测结果

目的：比较脂多糖－被动血凝试验（ＬＰＳ－ＰＨＡ）、肥达反应和细菌培养诊断伤寒的临床价值。方法：用上述三种方法同时对１０２例伤寒患者和２５０例非伤寒发热患者进行检测。结果：①伤寒患者中ＬＰＳ－ＰＨＡ阳性率为９２．２％，肥达反应阳性率为８８．２％，差异无显著性（Ｐ＞０．０５），但均高于细菌培养的阳性率（２４．５％，Ｐ＜０．０１）。②病程第１周三种方法的阳性率分别为８０％（２４／３０）、８３％（２５／３０）和２７％（８／３０）。③肥达反应的伤寒与副伤寒鞭毛抗体交叉阳性率达３７．３％。结论：细菌培养的灵敏度太低，肥达反应的特异性较差，ＬＰＳ－ＰＨＡ早期快速诊断伤寒可靠性较好。

空斑减少中和试验测定血清抗乙脑病毒抗体

目的 对比空斑减少中和试验与反向被动血凝抑制试验在评价人血清抗乙脑病毒抗体时测定结果的异同。方法 对 4 5 0名 6～ 10岁儿童接种灭活乙脑疫苗前后的血清样本用两种方法进行了测定。结果 两种方法在测定免前人血清抗乙脑病毒抗体时存在显著性差异 ,在测定免后人血清抗乙脑病毒抗体时两者没有差异。结论 空斑减少中和试验比反向被动血凝抑制试验在测定人血清抗乙脑病毒抗体时灵敏。

应用反向间接血凝试验检测山羊痘病毒抗原

以兔抗山羊痘病毒IgG致敏绵羊红细胞,采用反向间接血凝试验(RPHA)检测山羊痘病毒抗原.该诊断试剂与山羊痘病毒抗原发生特异性的凝集反应;在PBS中不自凝;与其它动物病病毒抗原无交叉反应.对贵州省8个疫区现场采集山羊痘待检抗原检测结果表明,该方法阳性检出率为87.5%(7/8),与琼脂扩散试验(AGP)阳性检出率为50%(4/8)相比较,RPHA敏感性比AGP高;同时对山羊痘野生强毒H-GZ株F1～F5代细胞培养物进行检测,F1代就可检出RPHA效价,而AGP则不能检测.该诊断试剂可用于兽医临床上山羊痘的快速诊断及作为病毒分离培养的检测指标.

2018-2020年广州市海珠区肺炎支原体感染的流行病学分析

目的对广州市海珠区肺炎支原体(MP)检测结果进行分析,为肺炎支原体感染的预防、诊断和治疗提供重要依据。方法对2018-2020年广州新海医院门诊和住院就诊的且进行血清MP筛查的4348例患者为研究对象,收集患者的临床数据,进行统计分析。结果4348例标本中,MP总阳性率为50.39%(2191/4348),2018-2020年MP总阳性率分别为:46.43%(755/1626),55.42%(1073/1936),46.18%(363/786),差异具有统计学意义(P<0.05)。从季节方面分析,冬季MP的阳性率最高,为53.88%(562/1043),其次是夏季52.36%(576/1100),秋季50.92%(637/1251)和春季43.61%(416/954),季节与MP阳性率之间差异具有统计学意义(P<0.05)。从性别方面分析,男性患者MP阳性率48.11%(1199/2492),低于女性患者MP阳性率53.45%(992/1856),差异具有统计学意义(P<0.05)。各年龄组的MP阳性率分别为,<1岁组28.96%(280/967),1~3岁组49.82%(547/1098),4~6岁组57.17%(614/1074),7~18岁组65.49%(666/1017),19~30岁组56.86%(29/51),31~50岁组48.72%(38/78),>50岁组26.98%(17/63),组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。在急性上呼吸道感染组、急性下呼吸道感染组、重症肺炎组和其他疾病组中,MP阳性率分别为50.15%(341/680),50.30%(1108/2203),44.74%(166/371),52.65%(576/1094),两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论MP高发人群主要是儿童,广州地区夏冬季为高流行季节,有必要加强MP感染的临床诊断与防治。

脂多糖-被动血凝试验早期诊断伤寒的价值

为评估脂多糖－被动血凝试验（ＬＰＳ－ＰＨＡ）早期诊断伤寒的应用价值，对病程不同的１０２例伤寒患者用ＬＰＳ－ＰＨＡ、肥达反应和细菌培养进行检测，２００例非伤寒发热患者作为对照。结果显示：伤寒患者病程第一周ＬＰＳ－ＰＨＡ阳性率为８０％（２４／３０），第二周达９７７３％（４３／４４）；细菌培养阳性率２４５１％；肥达反应的伤寒与副伤寒鞭毛抗体交叉阳性率达３７２５％；对照组ＬＰＳ－ＰＨＡ有２％的假阳性。结果表明：ＬＰＳ－ＰＨＡ可早期、简便及快速诊断伤寒，有较高的敏感性和特异性。

用单克隆抗体反向间接血凝检测兔出血症病毒

将抗兔出血症病毒(RHDV)的 AA8-1和 CG4-1两株单抗(McAb)分别致敏双醛化人红细胞,混合后建立单抗反向间接血凝(McAb-RPHA)方法。其敏感性较常规血凝试验(HA)高256倍,最小检出量为0.214 ng/ml。此法对感染兔的心、肝、脾、肺、骨髓、血液等检出率均为100%;脊髓、淋巴结、肌肉等组织的检出率分别为62.5%,58.3%和37.5%。HA 的检出率除肝为100%外,其余均低于 McAb—RPHA,不能检出脊髓、淋巴结和肌肉样品中的病毒抗原。

老年呼吸道感染者血清肺炎支原体抗体检测及临床意义

本文应用间接血凝法对１２５例老年呼吸道感染患者，９７例老年对照组及９２例非老年呼吸道感染患者进行血清肺炎支原体抗体的检测。结果发现老年呼吸道感染组血清肺炎支原体抗体阳性率明显高于老年对照组（Ｐ＜０．０１）。与非老年呼吸道感染组相比无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。说明肺炎支原体已成为老年呼吸道感染的常见病原体之一。

脂多糖—被动血凝试验早期诊断伤寒的实用价值

考察脂多糖—被动血凝试验（ＬＰＳ－ＰＨＡ）早期诊断伤寒的应用价值。方法：对病程不同的１０２例伤寒患者用ＬＰＳ－ＰＨＡ、肥达反应和细菌培养进行检测，２００例非伤寒发热患者作为对照。结果病程第一周ＬＰＳ－ＰＨＡ８０％阳性（２４／３０），病程第二周达９７７３％（４３／４４），而同期的肥达反应特异性不够，细菌培养阳性率较低。对照组ＬＰＳ－ＰＨＡ均阴性。结论：ＬＰＳ－ＰＨＡ可早期、简便及快速诊断伤寒。

胃癌单克隆抗体反向被动血凝方法的建立及临床应用

作者报道了用小鼠抗人胃癌单克隆抗体MG7,MGd1以铬-免疫球蛋白鞣酸法致敏绵羊红细胞(SRBC_s),建立反向被动血凝(RPHA),检测不同人群组中MG7,MGd1抗原(MG-Ags)的水平。如以≥1:32血凝滴度为分界值,则诊断胃癌的敏感性为52.4％,特异性92.9％,准确性76.7％。食管癌、结肠癌、肺癌、消化道良性病及健康献血员的阳性率分别为 35.7％,33.3％,24％,10.6％和 3.3％。提示本法有助于胃癌的血清学诊断。

被动凝集法检测3557份血清肺炎支原体抗体的实验室评价

目的探讨被动凝集法测定肺炎支原体(MP)总抗体的诊断价值。方法用被动凝集法来检测3557份血清MP总抗体。结果2007年检测1801例血清,阳性为105例,阳性率为5.83%;2008年检测1756例血清,阳性为120例,阳性率为6.83%;两年的总阳性率为6.32%,明显低于文献报道。结论分析被动凝集法阳性结果偏低的原因,提出改进方法。为早期确诊和早期治疗支原体感染提供有价值的诊断依据。

人免疫球蛋白白喉抗体国家标准品的协作标定

目的协作标定人免疫球蛋白白喉抗体国家标准品。方法用世界卫生组织提供的白喉抗毒素国际标准品(批号:9897/762)为标准,采用被动血凝法标定我国人免疫球蛋白白喉抗体国家标准品,将待标品按标示量加水溶解后,置于4℃保存6个月和将冻干待标品分别置于4,25,37℃保存6个月,进行稳定性考查。结果人免疫球蛋白白喉抗体国家标准品的效价为0.4 HAU/支,稳定性好,其他项目符合国家标准品要求。结论该批冻干人免疫球蛋白白喉抗体国家标准品可取代上批国家标准品。

分离培养和血清学试验诊断肺炎支原体早期感染的应用及评价

目的应用并评价肺炎支原体(MP)快速培养法、被动凝集法检测总抗体和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测免疫球蛋白M(IgM)抗体在MP感染早期诊断中的价值。方法应用MP快速培养法对该院2009年10月至2010年4月260例急性下呼吸道感染住院惠者的咽拭子标本进行培养,同时用被动凝集法检测患者血清中MP的总抗体和ELISA检测MP的IgM抗体。结果 260例急性下呼吸道感染患者咽拭子MP快速签定培养法培养阳性58例,阳性率22.3%。被动凝集法检测总抗体阳性83例,阳性率31.9%。ELISA检测IgM抗体阳性67例,阳性率25.8%。结论 MP IgM抗体检测试剂因其方便,快捷,可作为优先检测试验。

两种血清学方法对儿童肺炎支原体感染抗体测定的临床评价

目的探讨被动凝集法和间接免疫荧光法在肺炎支原体早期诊断中的应用价值。方法采用PA法和IFA法分别对236例笔者所在医院儿科疑似MP感染的初诊患者进行血清抗-MP抗体的测定。结果 236例患儿中,用PA法检测阳性94例(阳性率39.8%),IFA法测定阳性125例(阳性率53.0%),两种方法的阳性检出率比较,差异有统计学意义(x2=4.1,P<0.05)。结论 PA法和IFA法均对MP感染的早期诊断具有重要的参考价值,联合检测可提高MP感染确诊率。

三种方法检测流行性出血热病毒自然感染和疫苗免疫后的抗体水平比较

应用高密度颗粒凝集试验（ＨＤＰＡ）、反向血凝抑制试验（ＲＰＨＩ）和空斑减少中和试验（ＰＲＮＴ）三种方法对我国出血热疫苗人体免疫后和出血热病毒自然感染人体后的抗体水平进行检测比较，结果三种方法检出阳性率基本一致，但ＨＤＰＡ、ＲＰＨＩ的抗体水平较ＰＲＮＴ为高。不显性感染者的抗体水平较显性感染者低。自然感染者的中和抗体水平较疫苗免疫者高。