雷米普利对大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响

目的观察雷米普利对大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响。方法大鼠口服雷米普利(1 mg.kg-1)或等剂量生理盐水,24 h后制备心肌缺血30m in再灌注120 m in模型,用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色法测定心肌梗死范围,用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)和DNA琼脂糖凝胶电泳技术检测心肌细胞凋亡并用免疫组化方法测定抑凋亡基因(Bc l-2)和促凋亡基因(Bax)的表达。结果与对照组相比,雷米普利组由缺血/再灌注损伤引起的心肌梗死范围缩小,细胞凋亡指数减少且DNA琼脂糖凝胶电泳呈现减弱的DNA梯形图谱,Bc l-2表达增加以及Bc l-2/Bax比值增加。结论雷米普利通过减少/缺血再灌注心肌细胞坏死和凋亡以及上调抑凋亡基因Bc l-2的表达发挥心脏保护作用。

心肌营养素—1和结缔组织增长因子在糖尿病大鼠心肌中的表达及厄贝沙坦的干预作用

目的通过观察心肌营养素-1(CT-1)mRNA和结缔组织增长因子(CTGF)在糖尿病大鼠心肌中的动态表达以及厄贝沙坦干预的影响,探讨CT-1和CTGF在糖尿病心肌病(DMCM)发病机制中的作用。方法SD雄性大鼠78只,随机分为对照组和糖尿病组。用链脲佐菌素(STZ)一次性腹腔注射建立糖尿病模型后,糖尿病组再为厄贝沙坦治疗组及糖尿病未治疗组。治疗组以厄贝沙坦灌服12周。分别在病程2、4、6、8、10、12周处死各组大鼠。称量体重(BW)、全心重量(HW)、左室重量(LVW),计算心体比(HW/BW)和左室重量指数(LVWI)。检测心肌CT-1mRNA和CTGF的表达水平;心肌胶原(Col)和心肌血管紧张素(AngII)含量。观察心肌超微结构病理改变。结果糖尿病组大鼠的HW/BW、LVWI明显高于正常对照组(P<0.01),厄贝沙坦治疗组大鼠的HW/BW、LVWI明显低于糖尿病组(P<0.01),但仍高于正常对照组(P<0.01)。厄贝沙坦组心肌细胞变性、坏死程度和范围较糖尿病组明显减轻。糖尿病组大鼠CT-1mRNA、CTGF表达明显上调,随病程延长呈升高趋势(P<0.01),心肌Col、AngII含量较正常对照组明显升高(P<0.01)。而厄贝沙坦治疗组大鼠的CT-1mRNA、CTGF表达与糖尿病组相比较下调(P<0.01):心肌Col、AngII含量明显低于糖尿病组(P<0.05)。糖尿病组大鼠心室CT-1mRNA、CTGF和心室局部Col、AngII含量呈明显正相关。结论糖尿病大鼠心肌CT-1mRNA、CTGF表达上调与心肌肥大、间质纤化密切相关,在糖尿病心肌病的心室重构中起重要作用。厄贝沙坦可减轻糖尿病心肌病的心室重构,其心肌保护作用机制可能与其下调CT-1和CTGF水平有关。

葛根素对烫伤大鼠心肌损害的保护作用

目的探讨葛根素对烫伤大鼠心肌损害的保护作用及机制。方法采用制作30%TBSAⅢ度烫伤大鼠模型,随机分为复苏组(40只),治疗组(40只),另取8只作为伤前对照。于烫伤后1、3、6、12、24h各取静脉血,测心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量,另取大鼠心脏作形态学检查。结果复苏组及治疗组cTnT及TNF-α的含量高于对照组,治疗组低于复苏组(P<0.05)。电镜显示,伤后24h,治疗组心肌组织损伤程度较复苏组减轻。结论葛根素对大鼠烧伤后心肌损害有一定的保护作用。

PD098059抑制血管紧张素Ⅱ对心肌细胞活力的影响

目的 :观察分裂酶原激活的蛋白激酶系统 (MAPK)特异阻断剂PD0 980 5 9对心肌细胞活力与增殖能力的影响 ,探讨细胞内信号传递通路的阻断是否能有效地干预细胞能量代谢 ,为寻找新的心衰的预防与治疗药物提供实验依据。方法 :利用培养的乳鼠心肌细胞 ,根据活细胞线粒体在能量代谢过程中可作用于MTT产生蓝紫色结晶产物formazan这一原理 ,应用比色法测定血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )对培养心肌细胞的活力的影响和PD0 980 5 9的干预作用。结果 :与对照组相比 ,AngⅡ在 12h之内使formazan产物的OD值逐渐上升 ,12h达到高峰 ,此后开始下降 ,至 2 4h已低于正常水平 ,它们的OD值之间均有显著的统计学差异 (P <0 0 5或 0 0 1) ,PD0 980 5 9可以显著的拮抗AngⅡ对心肌细胞活力的影响。 结论 :该结果提示PD0 980 5 9可以显著的拮抗AngⅡ对心肌细胞活力的影响。

大鼠体外循环基础上应用停跳液心脏停跳模型的建立

目的:在大鼠普通体外循环(CPB)模型基础上,建立灌注心停跳液心脏停跳(CA)模型,比较CA模型与普通CPB模型实验大鼠心肌缺血再灌注损伤情况;观察CA模型大鼠术后的存活和恢复情况。方法:借助血管穿刺置管技术,在大鼠普通CPB模型基础上,通过右侧颈总动脉置入双腔气囊导管,充气套囊、阻断升主动脉及灌注心脏停跳液使心脏停搏。比较CPB模型大鼠(n=6)和CA模型大鼠(n=15)心肌缺血再灌注损伤的区别;分别在术后1 d、1周和2周3个时点观察CA模型大鼠恢复情况(n=5)。结果:CA大鼠在心脏缺血再灌注60 min后,心型脂肪酸结合蛋白(HFABP)和心肌肌钙蛋白I(cTnI)明显高于术前基础值和普通CPB组水平,在复灌后3 h达到顶峰,术后1 d降低,在术后1周和2周的观察时点回降至术前水平。左心室射血分数(EF)在2组动物之间差别不大;舒张早期血流峰值/舒张晚期血流峰值比值(E/A比值)在CPB后降低,而在CA后进一步下降。CA组大鼠均存活,但术后质量明显降低,在术后1周时最为显著,2周时大鼠质量已经恢复,并且超过术前水平。结论:本实验在普通的CPB模型基础上成功的建立了CA模型。同普通CPB模型大鼠相比,CA模型大鼠在CPB心脏缺血再灌注后,出现了明显的心肌损伤。CA大鼠具有较高的存活率。

输精管结扎家兔血清总胆固醇、酯质过氧化物及一些酶系的变化

应用日本大耳白兔复制输精管结扎模型，分为输精管结扎２５月组（ＶＧ２５）和６月组（ＶＧ６），并设同龄假手术对照组（ＳＯＧ２５和ＳＯＧ６）．实验结果表明，１．增龄可使血清总胆固醇（Ｃｈ）和甘油三脂（ＴＧ）含量增高，肌酸磷酸激酶（ＣＰＫ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、谷草转氨酶（ＧＯＴ）、ａ－羟丁酸脱氢酶（ＨＢＤＨ）的血清水平略增高，但ＶＧ与ＳＯＧ比较无差异；２．血清酸性磷酸酶（ＡＣＰ）水平，２５月组明显高于６月组（Ｐ＜０．０５），ＶＧ与ＳＯＧ比较无差异（Ｐ＞０．０５）；３．血清脂质过氧化物（ＬＰＯ）含量，２５月组明显地高于６月组（Ｐ＜０．０５），而输精管结扎对其无影响；４．相关检验表明，血清ＬＰＯ含量与血清ＣＰＫ和ＡＣＰ水平均呈明显正相关关系，ｒ值分别为０．４７２（Ｐ＜０．０５），０．６８０（Ｐ＜０．００１）。提示血清酶水平的增高与膜的脂质过氧化有关。输精管结扎对老化过程、细胞及亚细胞膜结构无不良影响。

大鼠骨髓基质干细胞体外培养方法的实验研究

目的研究培养骨髓基质干细胞(MSCs)的简易方法和其在体外经5-氮胞苷诱导为心肌细胞,为心肌梗死后心力衰竭的干细胞移植治疗提供理想的种子细胞。方法采用传统的密度梯度离心分离加贴壁法和略加改进的Wakitani方法。具体操作是:取SD大鼠分离出股骨和胫骨,用10%DMEM培养基冲出骨髓液,以2×105/ml密度接种于培养瓶中,培养出的骨髓基质干细胞连续传3代,使细胞纯化后,用5-氮胞苷诱导,观察细胞形态改变。结果大鼠骨髓液接种于培养瓶中后,第2天大部分细胞已经贴壁,贴壁生长的细胞以分散、克隆集落的方式增殖,细胞大多呈梭形,7～10d后克隆集落逐渐增多,细胞融合,传代培养后细胞呈分布均匀的纺锤形细胞生长。MSCs经10!mol/L5-氮胞苷诱导3周后,发现细胞形态较前更加细长,呈梭形,类似心肌细胞样形态。结论应用略加改进的Wakitani方法,能较好地进行骨髓基质干细胞的培养和扩增,且操作简便;在体外培养的骨髓基质干细胞经诱导可转化为心肌细胞,有望成为心肌梗死后心力衰竭干细胞移植治疗的细胞材料。

桡动脉途径实施经皮室间隔心肌化学消融术治疗肥厚型梗阻性心肌病

目的探讨桡动脉途径实施经皮室间隔心肌化学消融术(PTSMA)治疗肥厚型梗阻性心肌病(HOCM)患者的疗效及安全性。方法回顾性分析通过桡动脉途径接受PTSMA治疗的32例HOCM患者的临床资料,观察患者术前及术后6个月心脏彩超的左心室流出道(LVOT)宽度、左心室流出道压差(LVOTG)以及室间隔(IVS)厚度等指标,评估PTSMA的疗效,同时观察患者并发症发生情况。结果32例患者成功完成PTSMA。术后LVOTG由术前(75.17±12.70)mmHg降至(32.42±7.62)mmHg,术后IVS厚度由术前(26.87±4.35)mm降至(17.83±3.27)mm,术后LVOT宽度由术前(6.45±2.34)mm增至(11.23±3.28)mm;术后LVOTG、LVOT宽度以及IVS厚度均优于手术前,差异均有统计学意义(P<0.01)。临床症状显著改善。11例患者术中出现一过性Ⅲ度房室传导阻滞(AVB);术后出现迟发性Ⅲ度AVB的2例患者中,置入双腔起搏器1例。无桡动脉闭塞、心包填塞、出血或急性肺栓塞等并发症,无死亡病例。结论PTSMA是治疗HOCM患者的可行方法,能够显著降低LVOTG及IVS厚度、改善临床症状,并且桡动脉途径相对安全。

白介素8和兔心肌缺血/再灌注损伤研究

目的 探讨白介素8(rhIL-8)参与兔心肌缺血/再灌注损伤的机制,为减轻再灌注损伤探索新的治疗途径。方法 结扎兔冠状动脉左前降支(left anterior descending coronary artery,LAD)造成缺血1小时,再灌注3.5小时。实验分两组:缺血/再灌注组(MI/R,n=8)和假结扎组(Sham MI/R,n=8)。结果 MI/R组发生严重的心肌损伤,包括受累心肌髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性增大和血清肌酸磷酸激酶-MB同工酶(CPK-MB)、异构前列腺素(eoi-PGF_(2α))水平增高(均P<0.01)。血清IL-8浓度逐渐升高,免疫组化示受损心肌区血管内皮基底膜呈IL-8阳性染色。结论 血管内皮细胞释放的IL-8是吸引中性粒细胞浸润于缺血区心肌,造成缺血/再灌注损伤的因素之一。

重组人促红细胞生成素预先给药对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌炎性反应的影响

目的探讨重组人促红细胞生成素（rhEPO）预先给药对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌炎性反应的影响及其机制。方法健康雄性SD大鼠138只,体重350～450g,随机分为3组：假手术组（Sham组,n=42）、缺血再灌注组（I/R组,n=48）和rhEPO预先给药组（n=48）。缺血前24h,Sham组和I/R组腹腔注射0．9%NaCl溶液4ml/kg,rhEPO预先给药组腹腔注射rhEPO 5 000IU/kg（溶于0．9% NaCl溶液4ml/kg）。采用阻断左前降支冠状动脉30min、再灌注180min制备心肌缺血再灌注损伤模型,分别于结扎冠状动脉前即刻、缺血即刻、再灌注30、60、120、180min 3组各随机处死6只大鼠,取左心室心肌组织,测定肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、自细胞介素（IL）-6和IL-10的含量,检测心肌细胞核NF-kB和活化蛋白-1（AP-1）的表达；3组随机另取6只大鼠,再灌注结束时观察心肌中性粒细胞浸润情况。I/R组和rhEPO预先给药组再随机取6只大鼠,再灌注结束时测定心肌梗死面积。结果与Sham组比较,I/R组和rhEPO预先给药组NF-kB、AP-1表达及TNF-α、IL-6、IL-10含量升高（P＜0．01）；与I/R组比较,rhEPO预先给药组NF-kB和AP-1表达及TNF-α、IL-6含量降低,IL-10含量升高（P＜0．05或0．01）；rhEPO预先给药组较I/R组心肌梗死面积减小,中性粒细胞浸润程度减轻。结论预先腹腔注射rhEPO 5 000 IU/kg可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制与下调NF-kB和AP-1表达,抑制心肌炎性反应有关。