^(99m)Tc标记抗心肌肌凝蛋白单克隆抗体在实验性心肌梗塞中的研究

为比较99mTc－AMLA的特异性，将两组心肌梗塞24h大鼠分别注射99mTc－AMLA（n=24）和99mTc－N－IgG（n=18）；为研究不同心肌梗塞时间对摄取抗体的影响，将另一组不同心肌梗塞时间（2h到14d共8个亚组）的大鼠注射99mTc－AMLA，计算三组的ID％／g和梗塞心肌摄取／正常心肌摄取比（IM／NM）。用一只心肌梗塞的狗注射99mTc－AMLA后离体心肌显像。结果表明，梗塞心肌摄取99mTC－AMLA为特异性摄取。其摄取量远高于正常心肌的摄取。大鼠注射99mTc－AMLA8h后IM／NM最高为6．68；而注射非特异性IgG在相同时刻仅为1．42（P＜0.01）。大鼠梗塞心肌摄取99mTc－AMLA与梗塞时间无明显区别（P＞0.05）。离体狗心肌显像表明，心肌中放射性浓集区与TTC染色中空白区一致。说明99mTc－AMLA是一个对心肌梗塞特异的显像剂，它可用于亲心肌梗塞的显像。

抗人心肌肌凝蛋白轻链Ⅰ单克隆抗体的制备和鉴定

以人心肌肌凝蛋白轻链I免疫Balb/c小鼠,取其脾淋巴细胞与NS-1细胞融合,经过筛选、克隆化和再克隆已获得3-D_3、2-D_9、1-E_(10)和2-E_(10)等4个分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经免疫酶标和放免方法测定抗体工作滴度为1:1万。流动式荧光密度计检测NS-1、小鼠脾和杂交瘤细胞DNA的含量,结果表明杂交瘤细胞的DNA含量相当于NS-1和小鼠脾细胞DNA含量之和。杂文瘤细胞传代半年以上稳定地分泌特异性的单克隆抗体。用两个单抗进行了抗原双决定簇的放免測定,并制备了高效价的小鼠腹水。

抗人心肌肌凝蛋白重链单克隆抗体在心肌缺血尸检例中的应用

为了更有效地检测早期及超早期心肌缺血性病变，对5例心肌组织材料进行了肌凝蛋白重链（MyosinH链）及肌红蛋白的免疫组织学染色，探讨了肌凝蛋白的染色情况、抗原分布、死后变化对染色的影响及心肌早期、超早期缺血的有无、程度及与死亡的关系。应用石蜡组织切片进行的抗人心肌肌凝蛋白重链免疫组织学染色，在病理学方面尚属首次，这种单克隆抗体对人的特异性高，无共集现象，在心肌缺血数分钟乃至十几分钟后即可发现缺血心肌细胞中肌凝蛋白重键的脱失像，是分析早期、超早期心肌缺血所致急死及其它原因死亡案例心肌缺血病变的有力方法。

肿瘤坏死因子对急性心肌梗塞后心功能的影响

目的探索急性心肌梗塞（AMI）患者血浆中肿瘤坏死因子（TNFα）动态变化及其对心功能的影响。方法临床检测22例急性心肌梗塞（AMI）及AMI合并心衰患者（KillipⅢ～Ⅳ级）血浆中TNFα含量，并在免急性心肌梗塞模型中用TNFα单克隆抗体桔抗实验中所产生的TNFα，同时观察心功能指标的变化。结果（1）AMI发生后血浆中的TNFα含量立即升高，10例（10／22）合并心力衰竭患者TNFα升高较单纯AMI者更显著（P＜0．01）。（2）在动物实验中：AMI组的TNFα含量较对照组明显升高（P＜0．01），心功能各指标（±dp／dt；PRP）在90分钟实验期间，对照组的心功能指标无明显变化（P＞0．05），而AMI组心功能各指标明显低于对照组（P＜0．05或0．01），用TNFα的特异性抗体治疗后（ATM组）的心功能各指标较AMI组得到明显改善。结论TNFα在AMI的病理生理中起一定的作用，AMI合并心衰患者血浆中TNFα含量明显增加，TNFα单克隆抗体可明显改善心功能。

梗塞心肌摄取锝标抗心肌肌凝蛋白轻链mAb^(99)Tc^m-AMLCA的影响因素

目的 :探讨注射锝标抗心肌肌凝蛋白轻链单克隆抗体 (99Tcm AMLCA)后不同时间 ,梗死时间和梗死区域对大鼠梗死心肌摄取99Tcm AMLCA的影响 .方法 :大鼠静脉注射99Tcm AMLCA 7.4MBq ,观察不同注射时间 (2 ,4 ,8,2 4h) ,不同梗死时间 (心梗后 6 ,12h ,1～ 14d)和不同梗死区域 (梗死中央、周边的内层心肌和外层心肌 )对梗死心肌 /正常心肌发射性比的影响 .结果 :注射后 2h梗死心肌开始摄取99Tcm AMLCA ,梗死心肌 /正常心肌发射性比是 1.6 7± 0 .96 ,4～ 8h摄取逐渐增加 ,2 4h达到高峰 ,梗死心肌 /正常心肌发射性比是 4 .38± 0 .80 .心肌梗死后 6h～ 14d ,梗死心肌均有很强的99Tcm AMLCA摄取 ,心梗后 5d摄取最强 ,梗死心肌 /正常心肌发射性比是3.82± 0 .6 7;梗死中央区内层心肌的放射性摄取比值是 4 .5 2± 0 .6 0 ,外层心肌是 3.32± 0 .5 8两者具有统计学显著意义 (P<0 .0 1) .结论 :急性心肌梗死大鼠梗死心肌特异性地摄取99Tcm AMLCA迅速持久 ,不受心梗时间影响 ,梗死中央区内层心肌摄取最强 ,为99Tcm AMLCA亲梗死心肌显像临床应用提供了实验依据 .

急性心肌梗塞发生中肿瘤坏死因子的作用探讨

本文观察了22例AMI患者及免心便模型血浆中TNF的含量变化，以研究TNF对心肌梗塞坏死面积的影响。结果发现：（1）AMI患者心肌梗塞早期血浆TNFα迅速升高，高峰在胸痛发作后4小时，显著高于正常对照组（P＜0．001），以后逐渐下降，48小时与正常对照组比较无差异（P＞0．05）。（2）在免心梗模型中，用TNF单克隆抗体中和血浆中的TNF后，坏死区占缺血区和坏死区占左心室的体积百分比ATM组显著低于AMI组（P＜0．01）。提示：TNFα在AMI发生中起重要作用，TNFα单克隆抗体可显著减少心肌梗塞范围。

肌球蛋白单克隆抗体标记大鼠心肌坏死的研究

Monoclonal antibody (MAb) attained from hybridoma 1A5 was against human cardiac myosin heavy chains (CMHC) and didn’t react with smooth muscle. It was labeled with Na 125 I and injected to the rats suffered from acute myocardial necrosis, which were treated by isoproylarterenol. After injection, the rats were studied from the 4 th to the 48 th hours by relative radioactivity in blood, thyroid gland, stomach, liver, lung, muscle and heart, respectively. The results indicated that 125 I CMHC MAb could specifically reach the target necrotic organ in the 4 th hours (2 03±0 60 ) and remained up to the 48 th hours (2 55±0 49) or longer, at which the 8 th was higher (4 89±0 44). Meanwhile 125 I CMHC MAb showed much higher affinity to necrotic cardiac tissue than the normal ( P <0 001). The same results were should in the blood from 4 th (4 94±0 45) to 48 th (2 70±0 12). Thus 125 I CMHC MAb can be considered as an effective tool for image diagnosis of acute myocardial necrosis.

放射性核素标记心肌肌球蛋白重链单抗检测心肌损伤的实验研究

为探讨急性心肌梗塞病灶心肌细胞损伤程度，采用放射性核素标记心肌肌球蛋白重链（CMHC）单克隆抗体（McAb）进行了实验性心肌损伤大鼠和心梗模型犬的研究。125I－CMHCMcAb注射大鼠后4h，标记抗体即已进入坏死心肌靶组织，8h达最高值。实验组心肌／对照组心肌比值为2．86。99mTC-CMHCMcAb犬显像，实验组中有3只于6h心肌梗塞灶显影清晰，4只于8h显影清晰,阳性检出率为70％。动物实验提示；大鼠损伤心肌对CMHCMcAb的结合力高于正常心肌，心梗模型犬CMHCMcAb放免显像阳性检出率高，可为临床急性心肌损伤检测提供可靠的定位诊断依据。

抗心肌肌凝蛋白轻链单克隆抗体亲大鼠梗死心肌放射免疫显像探讨

目的 探讨抗心肌肌凝蛋白轻链单克隆抗体 ( AMLCA)亲梗死心肌显像的可行性。 方法 大鼠静脉注射99m Tc标记 AMLCA,观察梗死心肌摄取99m Tc-AMLCA的特异性及摄取与注射时间和梗死时间的关系。 结果 99m Tc-AMLCA在大鼠血中的清除呈双相 :注射后 ,99m Tc-AMLCA血浓度由 2 h的 ( 4.0 7± 0 .90 ) ID% / g组织迅速降至 4 h的 ( 2 .70± 0 .54) ID% / g组织 ;此后缓慢下降。注射后 6h、8h、2 4 h,肝脏均较梗死心肌摄取强。梗死心肌在注射后 2 h就开始摄取99m Tc-AMLCA,4～ 8h渐趋平衡 ,2 4 h达到高峰。梗死 6h至 1 4 d的不同梗死时间 99m Tc-AMLCA摄取差异无显著性( P>0 .0 5)。注射后相同时间 ,梗死心肌与正常心肌放射比 ,99m Tc-AMLCA明显大于 99m Tc-N-Ig G( P<0 .0 1 )。 结论 大鼠梗死心肌能特异地摄取 99m Tc-AMLCA,并且具有摄取时间早 ,持续时间长 ,受梗死时间影响较小的特点 ,为99m Tc-AMLCA亲梗死心肌显像的研究提供了初步的实验依据。

Anti-TNF-α单克隆抗体对急性梗阻性黄疸大鼠心肌的保护作用

目的:探讨抗肿瘤坏死因子α单克隆抗体(anti-TNF-α)对急性梗阻性黄疸大鼠心肌损伤的保护作用。方法:24只雄性SD大鼠随机均分为模型组(行胆总管结扎),治疗组(行胆总管结扎+anti-TNF-α治疗),假手术组。治疗组于胆总管结扎后第3天开始经尾静脉注射anti-TNF-α(1 mg/kg),连用5 d;模型组和假手术组以同样方法注射等体积的生理盐水。术后7 d,分别检测各组大鼠血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)和TNF-α水平,以及大鼠心肌组织中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量,并观察心肌组织形态学改变。结果:除假手术组外,模型组和治疗组大鼠术后3 d开始均出现黄疸,并逐渐加重。与假手术组比较,模型组和治疗组大鼠术后7 d血清CK-MB,TNF-α水平及心肌组织中MDA含量明显升高,SOD活性明显降低(均P<0.01),但治疗组以上指标的改变不如模型组明显,差异均有统计学意义(均P<0.01)。光镜下可见假手术组心肌无明显病理改变,模型组心肌纤维稀疏、变细、坏死,心肌细胞浊肿,治疗组比模型组心肌损伤减轻。结论:TNF-α可能是急性梗阻性黄疸后大鼠心肌损伤的重要介导因子,anti-TNF-α可以通过拮抗TNF-α而减轻急性梗阻性黄疸时大鼠的心肌损伤。