慢性鼻窦炎伴鼻息肉中MZB1的表达及其对局部免疫球蛋白表达的影响

【目的】局部免疫球蛋白高表达是慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)重要病理特征,本研究主要探讨亚洲CRSwNP中边缘区B和B-1(MZB1)与局部免疫球蛋白表达的关系。【方法】通过聚合酶链式反应(PCR)、lu-minex、免疫组化染色对40例CRSwNP患者的鼻息肉组织和6名健康对照者的下鼻甲分别进行mRNA水平和蛋白质水平的检测,通过单因素方差分析、独立样本t检验和Pearson相关性分析进行统计检验。【结果】与健康对照组相比,2型CRSwNP中MZB1(P<0.01)和HSP90B1(P<0.01)的mRNA表达水平显著升高,免疫组织化学染色显示MZB1蛋白表达在2型CRSwNP中表达显著增加。此外,MZB1与鼻息肉组织中的免疫球蛋白E(IgE)的表达呈线性相关(P<0.01,r=0.52)。MZB1与2型CRSwNP鼻息肉组织中的白细胞介素-5(IL-5)(P<0.05,r=0.4)、白细胞介素-13,(IL-13)(P<0.05,r=0.44)的表达也呈线性相关。MZB1与鼻息肉组织嗜酸性粒细胞数线性相关有统计学意义(P<0.05,r=0.72)。【结论】与对照组相比,MZB1在亚洲CRSwNP中表达显著增加,尤其是2型CRSwNP,并且与鼻息肉组织中IgE的高表达和CRSwNP疾病严重程度相关。

Mzb1通过内质网应激途径改善过氧化氢所致人心肌细胞损伤的研究

目的观察边缘区B和B1细胞特异性蛋白(marginal zone B and B1 cell specific protein,Mzb1)对过氧化氢(hydrogen peroxide,H_(2)O_(2))诱导的人心肌细胞损伤的影响并探求其机制。方法培养人心肌细胞系AC16,H_(2)O_(2)(200μmol/L)诱导心肌细胞损伤模型,通过Lipofectamine®3000脂质体转染Mzb1;将细胞分为(1)对照组:培养液。(2)H_(2)O_(2)组:H_(2)O_(2)(200μmol/L)诱导12 h。(3)Mzb1+H_(2)O_(2)组:转染Mzb1,36 h后加入H_(2)O_(2)(200μmol/L)继续培养12 h。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT]法检测细胞活力;以蛋白质印迹法检测Mzb1,内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein 94,GRP94)、CCAAT/增强子结合蛋白的同源蛋白(CCAAT/enhancer binding protein homologous protein,CHOP)以及凋亡相关蛋白胱天蛋白酶3(Caspase3)的表达水平。结果与对照组比较,H_(2)O_(2)组细胞活力显著下降,Cleaved-Caspase3水平显著升高,内质网应激相关蛋白GRP94、CHOP表达水平升高,Mzb1表达量显著降低;与H2O2组比较,过表达Mzb1后,AC16细胞中Mzb1的细胞活力有所恢复,内质网应激相关蛋白GRP94、CHOP蛋白表达水平下降,细胞内Cleaved-Caspase3水平显著降低。结论Mzb1通过抑制内质网应激抑制凋亡,改善H_(2)O_(2)引起的心肌细胞损伤。

增强miR-185-5p表达可减轻小鼠实验性牙周炎的炎症反应

背景:目前牙周炎的发生发展机制仍不十分明确,治疗靶点有待探讨。近年研究发现,miR-185-5p在多种疾病中表现出抗炎作用,其在牙周炎中的作用尚不清楚。目的:探讨调节miR-185-5p表达对小鼠实验性牙周炎炎症反应的影响。方法:C57B/6J小鼠24只随机分为正常对照组、牙周炎对照组、牙周炎miR-NC组、牙周炎miR-mimics组,每组6只。除正常对照组外,其余组均构建实验性牙周炎模型。造模4周后,在牙周炎miR-mimics组小鼠双侧下颌第二磨牙近远中牙龈乳头注射100μL含0.5 mmol/L miR-185-5p mimics的生理盐水,在牙周炎miR-NC组注射100μL含0.5 mmol/L阴性对照miR-NC的生理盐水,在正常对照组、牙周炎对照组注射等量生理盐水。给药8周后处死小鼠,Micro-CT检测左下颌骨,qRT-PCR检测左下颌牙龈miR-185-5p、MZB1、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6基因表达,免疫组织化学染色检测小鼠右下颌牙龈MZB1、磷酸化p65核因子κB、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6蛋白表达。结果与结论:①Micro-CT检测显示,与牙周炎对照组及牙周炎miR-NC组相比,牙周炎miR-mimics组的牙槽骨丧失减少(P<0.05);②qRT-PCR结果显示,牙周炎miR-mimics组的miR-185-5p表达高于正常对照组、牙周炎对照组及牙周炎miR-NC组(P<0.05);与牙周炎对照组、牙周炎miR-NC组相比,牙周炎miR-mimics组的MZB1、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6的mRNA表达降低(P<0.05);③免疫组织化学染色结果显示,与牙周炎对照组及牙周炎miR-NC组相比,牙周炎miR-mimics组的MZB1、磷酸化p65核因子κB、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6蛋白表达减少(P<0.05);④提示增强miR-185-5p表达能抑制牙周炎炎症反应,抑制牙槽骨吸收,该作用可能与下调牙龈组织中MZB1、核因子κB通路有关。