精氨酸与N^G-硝基-精氨酸甲酯对大鼠正畸牙移动时诱导型一氧化氮合酶的影响

目的研究精氨酸(L-arg)与NG-硝基-精氨酸甲酯(L-NAME)对大鼠牙周膜压力侧诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的影响。方法将60只雄性S-D大鼠随机分为3组并建立正畸牙移动模型,分别于局部骨膜下注射精氨酸(L-arg组)、生理盐水(生理盐水组)和NG-硝基-精氨酸甲酯(L-NAME组),每2d1次。定期处死动物,取材并制作组织切片,进行免疫组化染色和图像分析。结果各实验组iNOS的表达-时间曲线基本相似,均在加力后7d达到高峰,牙周膜压力侧iNOS的表达在同一时间点不同实验组之间比较差异无统计学意义。结论L-arg和L-NAME对大鼠正畸牙移动牙周膜内iNOS的表达并无影响,两者可能通过其他途径影响正畸牙牙周膜的改建和正畸牙的移动。

硝普钠和L-硝基-精氨酸甲酯对大鼠生精功能的影响

目的 :观察硝普钠 (SNP)与L 硝基 精氨酸甲酯 (L NAME)对大鼠睾丸生精细胞DNA及倍体细胞群的影响 ,探讨一氧化氮 (NO)对睾丸生精功能的作用。 方法 :4 0只雄性SD大鼠均分为 4组 ,分别于腹腔内注射SNP、L NAME、SNP +L NAME与生理盐水 (NS) ,1次 /d ,共 12d。于最后 1次给药后 2h颈动脉放血处死动物。收集血清于- 70℃冻存 ,放射免疫法测定血清内睾酮含量 ;Greiss法测定血清NOx-(硝酸盐 /亚硝酸盐 )含量 ;流式细胞术(FCM)测定睾丸内各级生精细胞DNA含量 ,计算 1c、2c、4c期细胞的百分比。 结果 :SNP组血清内NOx-含量高于NS组 (P <0 .0 1) ,睾酮含量低于NS组 (P <0 .0 1) ,1c细胞减少 (P <0 .0 1) ;L NAME组血清内NOx-含量低于NS组(P <0 .0 1) ,睾酮含量高于NS组 (P <0 .0 1) ,1c细胞增加 (P <0 .0 1)。SNP和L NAME混合注射时 ,血清内NOx-、睾酮的含量及 1c细胞与NS组无显著性变化 (P >0 .0 5 )。 结论 :增加外源性NO可抑制精子的产生 ,而抑制NO生成途径则可促进精子的生成。

硝普钠和L-硝基-精氨酸甲酯对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

目的 观察硝普钠 (SNP)和L 硝基 精氨酸甲酯 (L NAME)对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响。 方法雄性SD大鼠分为 4组 :分别于腹腔内注射SNP、L NAME、SNP +L NAME与生理盐水 ,每天 1次 ,共 12d。颈动脉放血处死动物。流式细胞术 (FCM)结合TUNEL法检测睾丸生精细胞的凋亡。 结果 FCM结合TUNEL法检测发现SNP组亚单倍体峰 (AP峰 )及凋亡指数 (AI)较生理盐水组明显增高 ,L NAME组AP峰及AI显著低于生理盐水组 (P<0 0 1)。SNP和L NAME混合注射时 ,AP峰及AI与生理盐水组无显著性差异 (P >0 0 5 )。 结论 SNP促进生精细胞的凋亡 ,L NAME抑制生精细胞的凋亡 ,其对生精细胞凋亡的调节可能是由一氧化氮 (NO)介导的。

L-硝基-精氨酸甲酯对严重烫伤早期大鼠血脑屏障通透性和基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的:观察L-硝基-精氨酸甲酯(L-NAME)对严重烫伤早期大鼠血脑屏障(BBB)通透性和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响,探讨L-NAME对血脑屏障的保护作用。方法:健康SD大鼠,随机分为正常对照组、假烫伤组、烫伤组、烫伤+L-NAME治疗组。烫伤后又设3、6、12、24、48h等5个时相点,用透射电镜观察BBB超微结构变化;紫外分光光度计检测脑伊文氏蓝(EB)含量;免疫组织化学观察脑MMP-9表达。结果:烫伤后脑EB含量明显增高,MMP-9表达升高,差别具有显著性。电镜显示烫伤后大脑皮质的神经细胞线粒体肿胀或溶解。脑毛细血管周围出现空泡化,内皮肿胀,基底膜厚薄不均。L-NAME治疗后,脑EB含量明显下降,MMP-9表达恢复至正常水平,脑毛细血管、神经细胞、突触及基底膜等超微结构基本恢复正常。结论:烫伤后血脑屏障通透性增高与脑内MMP-9表达升高密切相关,提示MMP-9是严重烫伤后血脑屏障损伤的关键因素。早期应用L-NAME能明显减轻烫伤对BBB的损伤,可能与L-NAME抑制MMP-9表达有关。

Nω-硝基-L-精氨酸甲酯对大鼠严重烫伤血脑屏障损伤及脑水肿的影响

目的:观察N_ω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对严重烫伤大鼠血脑屏障(BBB)通透性的影响,探讨NO在严重烫伤中损害BBB的机制。方法:实验SD大鼠分为烫伤组和L-NAME组后又各分为烫伤后1～24 h等5组。检测大鼠脑组织伊文蓝(EB)含量及脑百分含水量;观察BBB超微结构变化。结果:烫伤组与正常组比较,脑EB含量明显增高,具有显著差异。用L-NAME治疗后在1～12 h均可见明显的疗效,脑EB含量与同组比较明显下降。电镜显示:烫伤3h以后脑毛细血管周围出现空泡化,内皮肿胀,基底膜厚薄不均;经L-NAME治疗后脑毛细胞血管基本恢复到正常。结论:严重烫伤可导致脑BBB通透性增高,早期应用L-NAME能明显减轻烫伤对脑BBB的损伤。

N-硝基-L-精氨酸甲酯对大鼠后肢动脉生成过程中eNOS、Ki67及CD11b表达的影响

目的：探讨大鼠后肢动脉生成过程中eNOS、Ki67和CD11b的表达及N-硝基-L-精氨酸甲酯（LNAME）对eNOS、Ki67、CD11b表达的影响。方法：18只健康SD大鼠，雌雄性各半，随机分为假手术组、模型组及LNAME组。模型组采用大鼠股动脉结扎诱导动脉生成动物模型；L-NAME组在建立动物模型的基础上，腹腔注射L-NAME干预；假手术组除不结扎股动脉外，其他步骤与模型组相同。采用免疫荧光组织化学显色法检测血管eNOS、Ki67、CD11b等蛋白的表达。结果：eNOS主要表达于血管内皮细胞，Ki67、CD11b可表达于血管壁各层，模型组eNOS、Ki67、CD11b免疫荧光强度较假手术组强，L-NAME组eNOS、Ki67、CD11b免疫荧光强度较模型组弱。结论：在大鼠后肢动脉生成过程中，eNOS、Ki67和CD11b蛋白在血管大量表达，L-NAME可下调eNOS的表达并抑制血管增殖及巨噬细胞的浸润。

Nω-硝基-L-精氨酸甲酯对失重大鼠肺动脉反应性的影响

目的探讨Nω-硝基-L-精氨酸甲酯（L—NAME）对失重大鼠肺动脉反应性的影响。方法将16只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组和尾悬吊组，每组8只。利用离体血管环灌流技术测量大鼠肺动脉环对苯肾上腺素（PE）的收缩反应和对乙酰胆碱（Ach）的舒张反应，以及L—NAME预处理后动脉环对PE的收缩反应。同时用硝酸还原酶法测定肺动脉组织一氧化氮（NO）含量。结果尾悬吊14d后大鼠肺动脉环对1×10^-5～1×10^-7mol／L浓度PE的收缩反应均显著下降（P均＜0．01）；对1×10^-6～1×10^-8mol／L Ach的舒张反应均显著增强（P均＜0．05）；一氧化氮合酶（NOS）抑制剂L—NAME预处理后动脉环对PE的收缩反应恢复，与对照组比较差异均无显著性。肺动脉组织NO含量增加，两组差异有显著性（P＜0．05）。结论模拟失重引起肺动脉血管内皮细胞释放NO增加可能是导致其收缩反应性下降的原因之一。

尾加压素Ⅱ对大鼠血流动力学的影响及L-硝基-精氨酸甲酯的拮抗作用

目的:观察肺动脉内尾加压素Ⅱ(UⅡ)注射给药对正常大鼠血流动力学的影响以及L-硝基-精氨酸甲酯(L-NAME)的拮抗作用。方法:①从正常大鼠肺动脉内注入不同剂量的UⅡ溶液(0.1～30.0nmol·kg-1),对照组注入等量的生理盐水;记录收缩压(SP)、舒张压(DP)、脉压(PP)、平均颈动脉压(mCAP)、平均肺动脉压(mPAP)和心率(HR)的变化。②L-NAME组大鼠预先注入L-NAME(26mg·kg-1)进行预处理,10min后再注射UⅡ(10.0nmol·kg-1);对照组预先注入等量的生理盐水,10min后再注射UⅡ(10.0nmol·kg-1),然后观察UⅡ作用的峰值变化。结果:随肺动脉内UⅡ注射剂量的增加而增强降低SP、DP、mCAP的作用,用L-NAME预处理能削弱其降压作用约60%,而对PP、mPAP、HR无影响。结论:肺动脉内注射UⅡ可剂量依赖性地降低正常大鼠SP、DP、mCAP。L-NAME能削弱其降压作用,表明UⅡ的降压作用部分是通过L-精氨酸/一氧化氮(L-Arg/NO)途径而实现的。

N-硝基-L-精氨酸甲酯诱导的高血压大鼠胸主动脉血管紧张素转换酶2和血管紧张素转换酶的表达

目的通过观察高血压大鼠胸主动脉组织中血管紧张素转换酶(ACE)、ACE2活性及mRNA表达的改变,探讨ACE2及其与ACE相互平衡对高血压的调节作用。方法 40只血压正常且年龄匹配的SD大鼠分为模型组和对照组,每组20只。模型组大鼠每100 mL饮水中加入Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)50 mg,每日摄入L-NAME 50 mg/kg,制作高血压模型;按照L-NAME的摄入时间分为第2、4、8、12周4个亚组(n=5);对照组设立相同的亚组,于相应时间分别摄入相同体积的清水。采用总活性比色法检测胸主动脉ACE和ACE2活性;RT-PCR技术检测胸主动脉ACE和ACE2 mRNA的表达。结果模型组大鼠在服用L-NAME后第4、8、12周,血压均较相应对照组显著升高(P<0.05);而对照组各亚组入组前后血压差异无统计学意义(P>0.05)。服用L-NAME后第4、8、12周,模型组大鼠的胸主动脉组织ACE活性和mRNA相对表达量均较相应对照组显著升高(P<0.05),ACE2活性及其mRNA相对表达量均较对照组显著降低(P<0.05);对照组各亚组间ACE、ACE2活性和mRNA相对表达量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论通过抑制NO合成所导致的高血压的发病过程中,胸主动脉组织ACE2、ACE的mRNA表达及活性与血压升高有关。

Nω-硝基-L-精氨酸甲酯能够通过抑制一氧化氮／N-甲基-D-天冬氨酸受体系统而延缓大鼠吗啡镇痛耐受的形成

采用热甩尾测痛法观察全身应用非特异性一氧化氮合酶（nitric oxide synthase，NOS）抑制剂-N^ω-硝基-L-精氨酸甲酯（L—NAME）对吗啡镇痛耐受形成的影响，并通过观察脊髓和中脑神经元型NOS（nNOS）和N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体亚单位表达的变化来阐释一氧化氮（nitric oxide，NO）／NMDA受体在吗啡镇痛耐受形成中的作用。将36只健康成年SD大鼠平均分为6组（每组6只）：1组为对照组，皮下注射生理盐水1ml；2组、3组、4组、5组和6组为处理组，分别皮下注射L—NAME 10mg／kg、L—NAME 20mg／kg、吗啡10ms／kg、L—NAME 10mg／kg和吗啡10mg／kg、L—NAME 20mg／kg和吗啡10mg／kg，每天2次。在注射前测量大鼠的热甩尾潜伏期（tail—flick latency，TFL）基础值，随后每天第一次给药后50min测量其TFL。第8天最后一次给药后80min（除2组和5组之外）断头取脊髓和中脑，采用RT—PCR技术测量nNOS以及NMDA受体1A和2A亚单位的表达。结果显示，2组大鼠第1天至第7天的TFL与基础值相比无显著差异；第7天时3组的TFL仍显著性高于基础值；4组的TFL在第1天时最高，在第2至第6天期间逐渐降低，第6天时与基础值相比无显著性差异；5组的TFL在实验过程中呈下降趋势，虽然第7天时较第1天有所降低，但是仍然显著性高于基础值；6组的TFL变化趋势与5组相同。PT—PCR分析结果显示，与1组相比，3组脊髓和中脑的nNOSmRNA表达显著性降低，但NR1AmRNA和NR2AmRNA表达无显著性改变；

L-精氨酸对深低温停循环脑血流及代谢的影响

目的 通过深低温停循环 (DHCA)转流模型 ,研究L 精氨酸 (L arg)在低温缺血时对脑血流和代谢的影响。方法 采用 3～ 4周龄上海种白猪 ,按临床方法建立体外循环。于转流前、降温 5min、降温末、复温 5min、复温末、常温 6 0min、转流结束等时间点分别测定颈动脉流量、颈内静脉一氧化氮和乳酸含量、脑氧代谢率、脑皮质ATP及一氧化氮合酶活性。结果 L arg能增加脑血流量和加快停循环后脑组织ATP、颈内静脉乳酸含量的恢复 ;L 硝基 精氨酸甲酯 (L NAME)却使脑血流量降低和减慢停循环后脑组织ATP及颈内静脉乳酸含量的恢复。结论 在DHCA时应用L arg具有较好的脑保护作用 ;而应用L NAME具有脑损害作用。

侧脑室注射L-硝基-精氨酸甲酯对大鼠运动能力和运动疲劳后下丘脑一氧化氮表达的影响

一氧化氮（NO）作为一种不同于经典递质的信息传递物质,介导了许多生理过程.在运动中,它对运动系统、心血管系统、免疫系统以及神经系统的功能都有重要影响.一氧化氮合酶（NOS）作为NO的生物合成酶广泛存在于下丘脑[1-4].

L-精氨酸和左旋-硝基精氨酸甲酯对纯化视网膜神经节细胞凋亡的影响

目的 探讨 L-精氨酸 (L- arginine,L- Arg)和左旋 -硝基精氨酸甲酯 (L- nitro- arginine- m ethyl- ester,L- NAME)对纯化培养的视网膜神经节细胞 (retinal gangal cells,RGCs)凋亡的影响。 方法 同化培养液培养抗体纯化的 Sprague- Dawley(SD)系大鼠 RGCs;在纯化培养的 RGCs中分组加入体积百分浓度为 1× 10 - 6 、1× 10 - 5、 1× 10 - 4、1× 10 - 3、1× 10 - 2 、1× 10 - 1 mol/ L的 L - Arg及 L - NAME,培养 2 4 h后检测各组培养上清液中硝酸盐含量、细胞的活性 ;培养 4 8h后检测各组细胞的凋亡及细胞中 bcl- 2、bax及p5 3m RNA的表达。 结果 培养上清液中硝酸盐含量随着 L- Arg体积百分浓度的增高而增高 ,随着 L-NAME体积百分浓度的升高而降低。低体积百分浓度时 ,随着 L - Arg和 L - NAME体积百分浓度的增加bcl- 2 m RNA表达逐渐增高 ,bax及 p5 3m RNA的表达无明显变化。而高体积百分浓度时则相反。 结论 L - Arg低体积百分浓度时能促进 RGCs的生长 ,高体积百分浓度时则促进细胞凋亡 ;L - NAME对 L -

一氧化氮合酶抑制剂L-NAME对大鼠脑缺血耐受诱导的影响

采用大鼠四血管闭塞全脑缺血耐受模型和脑组织切片形态学方法 ,观察应用一氧化氮合酶 (NOS)抑制剂L NAME对大鼠海马CA1区脑缺血耐受 (BIT)诱导的影响 ,在整体水平探讨一氧化氮 (NO)在BIT诱导中的作用。 5 4只Wistar大鼠凝闭双侧椎动脉后分为 6组 :( 1)假手术组 (n =6) :分离双侧颈总动脉 ,但不阻断脑血流 ;( 2 )损伤性缺血组 (n =6) :全脑缺血 10min ;( 3 )预缺血 +损伤性缺血组 (n =6) :脑缺血预处理 (CIP) 3min ,再灌注 72h后行全脑缺血 10min ;( 4)L NAME组 :分别于CIP前 1h和后 1、12及 3 6h腹腔注射L NAME ( 5mg/kg) ,每个时间点 6只动物 ,其余步骤同预缺血 +损伤性缺血组 ;( 5 )L NAME +L 精氨酸组 (n =6) :于CIP前 1h腹腔注射L NAME ( 5mg/kg)和L 精氨酸 ( 3 0 0mg/kg) ,其它步骤同L NAME组 ;( 6)L NAME +损伤性缺血组 (n =6) :于腹腔注射L NAME ( 5mg/kg) 72h后行全脑缺血 10min。实验结果表明 ,( 1)单纯 10min全脑缺血可使海马CA1区组织学分级增加 (表明损伤加重 ) ,神经元密度降低 (P <0 0 1) ;( 2 )预缺血 +损伤性缺血组的海马CA1区组织学分级、神经元密度与假手术组相比 ,无显著性差别 (P >0 0 5 ) ;( 3 )L NAME组中 ,应用L NAME后海马CA1区组织学分级增加 ,神经元密度降低 ,与预缺血

NO对大鼠肢体缺血/再灌注后肾脏P-选择素表达的影响及意义

目的:探讨一氧化氮(NO)对大鼠LI/R后肾脏P-选择素表达的影响及意义。方法:采用本室常规方法复制大鼠LI/R模型。将大鼠随机分为四组:对照组,LI/R组,L-Arg组和L-NAME组。观察肢体缺血4h再灌注4h后各组动物血浆NO及肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)的变化;观察肾组织NO、髓过氧化物酶(MPO)、总一氧化氮合酶(tNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、结构型一氧化氮合酶(cNOS)的改变;测定尿蛋白含量、利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测尿蛋白性质;免疫组织化学方法检测肾组织P-选择素(P-selectin)的蛋白表达,结合自动图象分析系统对其结果进行定量分析;肾组织切片经六氨银染色在光镜下观察其形态学改变。结果:与control组比较,LI/R组大鼠血浆NO、BUN、Cr均明显升高;肾组织MPO、NO、tNOS、iNOS均明显增加,而cNOS明显下降;尿蛋白含量增多,电泳显示,有大分子量蛋白排出;光镜下可见肾小管上皮细胞水肿,有炎细胞浸润;免疫组化结果显示:P-selectin蛋白表达明显较control组增强。与LI/R组相比,L-Arg组各项损伤指标明显减轻;肾组织P-selectin蛋白表达明显减弱;L-NAME组血浆和肾组织各项损伤指标明显加重;肾组织P-selectin蛋白表达明显增加。结论:大鼠LI/R后急性肾损伤的发生可能与P-selectin的表达有关;NO可能通过减弱P-selectin的表达及中性粒细胞的浸润,减轻LI/R后肾脏组织形态学及肾功能的损伤性变化。

L-NAME对急性一氧化碳中毒大鼠血脑屏障通透性的影响

目的 :研究一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase,NOS)抑制剂Nω 硝基 L 精氨酸甲酯 (Nω nitro L argininemethylester,L NAME)对急性一氧化碳 (carbonmonoxide,CO)中毒大鼠血脑屏障 (blood brainbarrier,BBB)通透性的影响 ,探讨NO介导CO中毒后BBB损伤的作用 .方法 :建立实验性CO中毒大鼠模型 .将健康雌性SD大鼠 4 0只随机分成4组 (对照组 ,CO中毒组 ,染毒前 1 5min给L NAME组和染毒后 30min给L NAME组 ) ,每组 1 0只 .用分光光度计法检测各组大鼠脑组织内伊文思蓝 (Evansblue ,EB)的含量 ,进行比较 .结果 :CO中毒后 2 4h ,大鼠大脑BBB通透性增加 ,脑组织内EB含量 (2 7.6± 1 .2 ) μg/g与对照组 (6 .1±1 .9) μg/g比较明显增高 (P <0 .0 1 ) ;给予L NAME治疗的两组大鼠大脑BBB损伤减轻 ,脑组织内EB含量分别为 (1 4 .8± 2 .3) μg/g和 (1 6 .0± 2 .2 ) μg/g ,较CO组 (2 7.6± 1 .2 ) μg/ g明显降低(P <0 .0 1 ) .结论 :急性CO中毒可导致大鼠大脑BBB通透性增高 ,中毒早期应用NOS抑制剂L NAME能够明显减轻大鼠大脑BBB损伤 。

L-NAME对新生鼠缺氧性脑损伤内源性NO和ET的影响

目的 用新生大鼠急性缺氧模型 ,探讨 NO合成酶抑制剂 L-硝基 -精氨酸甲酯 (L- NAME)在缺氧后脑损伤中的作用 ,进而探讨一氧化氮 (NO)和内皮素 (ET)在早期缺氧性脑损伤中的作用地位 .方法 检测正常对照组、缺氧组和缺氧前应用 L- NAME预处理的新生大鼠血浆 ET及脑组织匀浆 NO含量及 NOS的活性 ,并观察各组大鼠脑组织病理改变及毛细血管充盈不良程度 .结果 缺氧组血浆 ET水平较正常对照组显著升高 (P<0 .0 1) ,而脑 NO水平及 NOS活性无显著变化 (P>0 .0 5 ) ,脑毛细血管充盈不良程度与正常对照组相比明显加重 (P<0 .0 5 ) ;L- NAME组血浆 ET水平较缺氧组显著升高 (P<0 .0 5 ) ,脑 NO含量及 NOS活性较缺氧组显著下降 (P<0 .0 1) ,脑毛细血管充盈不良程度与缺氧组相比明显加重 (P<0 .0 5 ) .结论 急性缺氧早期 ,ET异常增高是脑损伤的主要因素 ;此时抑制内源性 NO的合成 。

微囊化异种嗅球组织移植联合L-NAME治疗脊髓损伤的实验研究

目的探讨微囊化异种嗅球组织移植联合L-NAME对脊髓继发性损伤的治疗保护作用及机制。方法健康SD大鼠,随机分为对照组、微囊化兔嗅球组织移植组、微囊化异种嗅球组织移植联合L-NAME治疗组,损伤组又设1、3、7、14、28d 5个时相点,紫外分光光度计检测脊髓伊文氏蓝含量,干湿重法测定脊髓组织含水量;免疫组织化学技术检测MMP-9的表达;神经功能评分法(BBB法)评价大鼠术后运动功能的恢复情况。结果脊髓损伤后脊髓伊文氏蓝含量增加、脊髓血管源性水肿、MMP-9表达上调,大鼠的运动功能缺失,经微囊化异种嗅球组织移植联合L-NAME治疗后血脊髓屏障通透性降低、水肿明显减轻、MMP-9表达下调,大鼠的运动功能恢复。结论微囊化异种嗅球组织移植对脊髓继发性损伤有较好的疗效,联合应用嗅球组织细胞和L-NAME在脊髓损伤修复治疗中具有协同作用。