HPLC-MS/MS法检测巴豆醛暴露产生的DNA加合物

为评价卷烟烟气中巴豆醛的危害性,采用不同浓度(0~1.0 mmol/L)巴豆醛对小牛胸腺DNA模型进行暴露,DNA样品经过酶解、固相萃取(SPE)柱纯化和浓缩复溶处理后,使用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)测定DNA加合物S-α-甲基-γ-羟基-1,N^2-丙桥-脱氧鸟苷(Cd G-1)和R-α-甲基-γ-羟基-1,N^2-丙桥-脱氧鸟苷(CdG-2)的含量,并考察了CdG加合物与巴豆醛暴露量之间的关系。结果表明:①以C_(18)色谱柱为分析柱,采用梯度洗脱条件,分离度较高且分析时间短。②工作曲线线性良好(R^2>0.999),CdG-1和CdG-2的检出限分别为0.006 ng/mL和0.005 ng/mL,回收率在83.3%~101.0%之间,相对标准偏差(RSD)<7.0%。③小牛胸腺DNA中CdG的含量随着巴豆醛暴露剂量的增加而升高,二者存在剂量-反应关系。该方法样品前处理简单,选择性好,灵敏度和准确度较高,适用于评估巴豆醛接触所致的DNA损伤。