N-(2-甲基-4-硝基苯基)哌啶的相转移催化合成

2-氯-5-硝基甲苯与哌啶的亲核取代反应,在130℃的油浴中,反应9.5h,收率仅5.O%;而在相转移催化剂聚苯乙烯固载聚乙二醇400和氟化钠、氯化亚铜存在下,在150℃的油浴中,反应3.8h即生成标题化合物。收率可达65.07%。其结构已经红外光谱、核磁共振和元素分析证实。并探讨了反应过程的机理。

N-(桂皮酰基)-α-甲基哌啶的抗惊厥作用

本文研究表明N—(桂皮酰基)—α—甲基哌啶(N—MP)对大、小鼠电休克惊厥(MES)和戊四氮惊厥(Met)有明显的对抗作用。利血平预处理后,能明显提高N—MP抗小鼠MES的ED_(50)值。N—MP还能明显降低家兔ⅳ戊四氮引起的惊厥率并缩短异常脑电持续的时间。对硫酸亚铁所致家兔的慢性癫痫也有一定的保护作用。

N—(桂皮酰基)—α—甲基哌啶对离体平滑肌的作用

本文研究表明N—(桂皮酰基)—α—甲基哌啶对离体兔空肠和离体豚鼠气管的正常活动有明显抑制作用;对氯化钡和乙酰胆碱引起的兔肠管痉挛性收缩及5—羟色胺、组织胺和乙酰胆碱引起的豚鼠气管痉挛性收缩均有明显的对抗作用。N—MP对平滑肌的抑制作用可能是非特异性的,是对平滑肌直接作用的结果。

新型5-HT_(2A)选择性配体——N-取代哌啶-4-苯硫醚和砜类衍生物的合成及其生物活性

目的 为寻找新型的 5 HT2A受体选择性配体 ,设计合成了一系列二芳烷基哌啶类化合物的含硫衍生物。方法 以 2 ,3 二甲氧基硫酚为原料 ,经烃化、氧化和水解等反应合成 3个N 取代哌啶 4 苯硫醚和砜类化合物 ,所有目标化合物结构均经元素分析、1HNMR谱、质谱和红外光谱确证 ,并测定其对 5 HT2A,5 HT2C,5 HT6和 5 HT7受体及其他一些中枢神经递质受体的体外亲和力。结果 3个目标化合物 ( 2a - 2c)及 5个中间体均为新化合物。体外受体竞争结合试验结果表明 2a - 2c均有较高的 5 HT2A受体选择性。结论 此类化合物对 5 HT2A受体的选择性较高 。

1-N-Boc-4-甲氨甲基哌啶合成方法

以4-哌啶甲酸为原料,经酯化、还原、(Boc)2O保护、溴代、甲胺化五步反应,以72%的总收率合成了重要药物中间体1-N-Boc-4-甲氨甲基哌啶。合成方法操作简单、收率高。

1-脱氧野尻霉素的N-取代苯丙烷衍生物的合成

以(2R,3R,4R,5S)-3,4,5-三(苄氧基)-2-((苄氧基)甲基)哌啶盐酸盐为起始原料,与取代苯乙酮及多聚甲醛在无水乙醇中经曼尼希反应缩合得到中间体1-(4-取代苯基)-3-((2R,3R,4R,5S)-3,4,5-三(苄氧基)-2-((苄氧基)甲基)哌啶-1-基)丙烷-1-酮,该中间体经Pd(OH)_(2)/C加氢、脱苄、脱氧得到1-脱氧野尻霉素(DNJ)的N-取代苯丙烷衍生物,总收率36.8%~46.8%,并通过^(1)HNMR、^(13)CNMR、LC-MS对产物结构进行了确证。

二氧化碳混合物的临界常数的估算

对于几种有工业和环保实际意义的二氧化碳混合物的临界常数进行了预测估算，这些二元混合物是：二氧化碳＋乙醇、＋乙醇胺、＋碳酸丙烯酯、＋甲酰基哌啶、＋环丁砜和＋Ｎ－甲基己内酰胺。在目前缺乏文献数据的情况下，利用经验方法估算了纯组分物质的Ｔ＿ｃ、Ｐ＿ｃ、Ｖ＿ｃ和偏心因子ω，进而预测了二氧化碳混合物在不同组成时的临界温度和临界压力，绘出各混合物近似的临界曲线（Ｐ－Ｔ图），并作了简要的讨论。

切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓总蛋白及膜蛋白NMDA受体NRl、NR2A及NR2B亚基表达的变化

目的评价切口痛．瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓总蛋白及膜蛋白NMDA受体NRl、NR2A及NR2B亚基表达的变化。方法尾静脉置管成功的雄性sD大鼠32只，体重240—260g，月龄2～3月，采用随机数字表法，将大鼠随机分为4组（n=8）：对照组（C组）静脉输注等容量生理盐水60min，瑞芬太尼组（R组）静脉输注瑞芬太尼1．2μg·kg-1·min-160min；切口痛组（I组）建立切I：1痛模型，同时静脉输注等容量生理盐水60min；瑞芬太尼＋切口痛组（R＋I组）建立切口痛模型，同时静脉输注瑞芬太尼1．2μg·kg-1·min-160min。于生理盐水或瑞芬太尼给药前24h、给药后2,6、24和48h时测定机械刺激缩足阈值（PWT）和热刺激缩足潜伏期（PWL），最后一次测定痛阈后处死取脊髓L4-6节段，采用Western blot法测定脊髓总蛋白及膜蛋白NMDA受体NRl、NR2A及NR2B亚基的表达，并计算膜蛋白中NP,2B／NR2A比值。结果与C组比较，I组、R组和R＋I组PWT降低，PWL缩短，总蛋白及膜蛋白NMDA受体NRl和NR2B亚基表达上调，膜蛋白中NR2B／NR2A比值增加（P〈0．05）。与R组和I组比较，R＋I组PWT降低，PWL缩短，总蛋白及膜蛋白NMDA受体NRl和NR2B亚基表达上调，膜蛋白中NR2B／NR2A比值增加（P〈0．05）。各组总蛋白及膜蛋白NMDA受体NR2A亚基表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论大鼠切口痛．瑞芬太尼痛觉过敏的形成可能与脊髓总蛋白及膜蛋白NMDA受体NRl和NR2B亚基表达上调和膜蛋白中NMDA受体NR2B亚基组成比例的增加有关。

右美托咪定对瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏时脊髓背角神经元NMDA受体转运的影响

目的 探讨右美托咪定对瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏时脊髓背角神经元NM-DA受体转运的影响.方法 雄性SD大鼠24只,体重240～ 260 g,2～3月龄,采用随机数字表法,将其分为3组（n=8）：对照组（C组）、瑞芬太尼＋切口痛组（R＋Ⅰ组）和右美托咪定＋瑞芬太尼＋切口痛组（D＋R＋Ⅰ组）.D＋R＋Ⅰ组制备切口痛模型前30 min皮下注射右美托咪定50 μg/kg,R＋Ⅰ组和D＋R＋Ⅰ组制备切口痛的同时开始静脉输注瑞芬太尼1.2 μg＆#183;kg-1＆#183;min-1,输注90 min.分别于给予右美托咪定前（T0）、瑞芬太尼停止输注后2、6、24、48 h（T1-4）时测定热缩足潜伏期（TWL）和机械缩足反应阈（MWT）.最后一次痛行为学测试后处死大鼠,取脊髓L4-6节段,采用Western blot法测定脊髓背角膜蛋白（m）及总蛋白（t）NMDA受体NR1、NR2A和NR2B亚基的表达,计算mNR1与tNR1表达的比值（mNR1/tNR1）、mNR2A与tNR2A表达的比值（mNR2A/tN R2A）和mNR2B与tNR2B表达的比值（mNR2B/tNR2B）.结果 与C组比较,R＋Ⅰ组和D＋R＋Ⅰ组TWL缩短,MWT降低,脊髓背角mNR1、tNR1、mNR2B及tNR2B表达上调,脊髓背角mNR1/tNR1及mNR2B/tNR2B升高（P＜0.05）;而脊髓背角mNR2A、tNR2A表达及mNR2A/tNR2A差异无统计学意义（P＞0.05）;与R＋Ⅰ组比较,D＋R＋Ⅰ组TWL延长,MWT升高,脊髓背角mNR1、tNR1、mNR2B及tNR2B表达下调,脊髓背角mNR1/tNR1及mNR2B/tNR2B降低（P＜0.05）;而脊髓背角mNR2A、tNR2A表达及mNR2A/tNR2A差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 右美托咪定预防瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏的机制与减少脊髓背角神经元含NR1和NR2B亚基的NMDA受体转运有关.

切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓NMDA受体功能与δ阿片受体的关系

目的 探讨切口痛-瑞芬太尼痛党过敏大鼠脊髓NMDA受体功能与δ阿片受体的关系.方法 鞘内置管及尾静脉置管成功的雄性SD大鼠30只,体重260 - 280 g,2-3月龄,采用随机数字表法分为3组（n=10）：对照组（C组）经尾静脉输注生理盐水0.1 ml·kg-·min-60 min;瑞芬太尼＋切口痛组（RI组）经尾静脉输注瑞芬太尼1.0 μg·kg-1 ·min-1 60 min,于输注即刻建立切口痛模型;δ阿片受体抑制剂纳曲吲哚组（NI组）鞘内注射30 nmol纳曲吲哚溶液10μl,随后经尾静脉输注瑞芬太尼1.0μg· kg-·min-60 min,于输注即刻建立切口痛模型.于静脉输注生理盐水或瑞芬太尼前24 h、输注结束后2、6、24和48 h（T0-4）时测定机械缩足反应阈（MWT）和热缩足潜伏期（TWL）.T4时行为学测试结束后处死大鼠,取脊髓L4-6节段,采用Western blot法测定脊髓总蛋白和膜蛋白NMDA受体的表达水平,并计算膜蛋白和总蛋白NMDA受体表达的比值（m/t比值）.结果 与T0时比较,RI组和NI组T1-4时MWT降低,TWL缩短（P＜0.05）;RI组和NI组T13时MWT逐渐降低,TWL逐渐缩短（P＜0.05）,T3时与T4时MWT和TWL比较差异无统计学意义（P＞0.05）.与C组比较,RI组和NI组T1-4时MWT降低,TWL缩短,脊髓总蛋白及膜蛋白含NR1亚基和NR2B亚基的NMDA受体表达上调,m/t比值均增加（P ＜0.05或0.01）;与RI组比较,NI组T1-4时MWT升高,TWL延长,脊髓总蛋白及膜蛋白含NR1亚基和NR2B亚基的NMDA受体表达下调,m/t比值均降低（P＜0.05或0.01）.结论 脊髓δ阿片受体激活后可增强含NR1及NR2B亚基的NMDA受体功能,该作用可能参与了大鼠切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏的形成.

鞘内注射艾芬地尔对骨癌痛小鼠脊髓NR2B mRNA表达的影响

目的探讨鞘内注射艾芬地尔对骨癌痛小鼠脊髓N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体2B亚基（NR2B）mRNA表达的影响。方法雄性C3H／HeJ小鼠140只，体重20～25g，4～6周龄，随机分为5组（n=28）：假手术组（S组）、骨癌痛组（B组）和艾芬地尔2．5μg、5μg、10μg组（I1～3组）。I1-3组和B组于小鼠右侧股骨远端骨髓腔接种NCTC 2472溶骨性纤维肉瘤细胞，建立骨癌痛模型；S组不接种肿瘤细胞。I1-3组于接种肿瘤细胞后14d分别鞘内注射艾芬地尔2．5、5、10μg，B组和S组鞘内注射艾芬地尔溶媒。各组于接种肿瘤细胞前1d、鞘内注射艾芬地尔或溶媒前1h、注射后2。12和24h（T1～5）时随机取7只小鼠测定机械痛阈和热痛阈，并于T2～5时测定后断头处死，取L3-5脊髓，采用RT-PCR法测定脊髓组织NR2B mRNA的表达水平。结果与S组比较，除I3组T3时热痛阈差异无统计学意义（P〉0．05）外，B组和I1-3组机械痛阈和热痛阈均降低（P〈0．05），B组和I1组脊髓组织NR2B mRNA表达上调，I2-3组该指标表达下调（P〈0．05）；与B组比较，I2,3组机械痛阈和热痛阈升高，脊髓组织NR2B mRNA表达下调（P〈0．05），I1组各时点以上指标差异均无统计学意义（P〉0．05）；与I2组比较，I3组机械痛闽和热痛阚升高，脊髓组织NR2B mRNA表达下调（P〈0．05）。结论鞘内注射艾芬地尔可通过阻断含2B亚基的NMDA受体缓解小鼠骨癌痛，并下调脊髓组织NR2B mRNA的表达抑制痛敏反应。

糖原合成酶激酶-3β在切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓含NR1及NR2B亚基的NMDA受体转运中的作用

目的探讨糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）在切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓含NR1及NR2B亚基的NMDA受体转运中的作用。方法雄性sD大鼠24只，体重240-260g，2-3月龄，采用随机数字表法，将大鼠随机分为3组（n=8）：对照组（C组）尾静脉注射二甲基亚砜（DMSO）2ml／kg，随后输注与瑞芬太尼等容量生理盐水60min；瑞芬太尼组（R组）尾静脉注射DMSO2ml／kg后制备切口痛模型，同时静脉输注瑞芬太尼1．2μg·kg-1·min-1 60min；GSK-3B抑制剂组（TDZD-8组）尾静脉注射GSK．38抑制剂（TDZD-8）1mg／kg后制备切口痛模型，同时静脉输注瑞芬太尼1．2μg·kg-1·min-160min。于静脉输注生理盐水或瑞芬太尼前24h、输注后2、6、24和48h（T0-4）时测定机械刺激缩足阈值（PWT）和热刺激缩足潜伏期（PWL），最后1次测定痛阈后处死，取脊髓L4-6节段，采用Westernblot法测定脊髓细胞膜（s）及胞浆内（i）NMDA受体NR1及NR2B亚基的表达，计算sNRl／iNRl及sNR2B／iNR2B比值。结果与C组比较，R组和TDZD-8组PWT降低，PWL缩短，sNR1和sNR2B表达上调，iNR1和iNR2B表达下调，sNR1／iNR1及sNR2B／iNR2B升高（P〈0．05）。与R组比较，TDZD-8组PWT升高，PWL延长，sNR1和sNR2B表达下调，iNR1和iNR2B表达上调，sNRl／iNRl及sNR2B／iNR2B降低（P〈0．05）。结论GSK．3B参与切口痛．瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓含NR1及NR2B亚基的NMDA受体从胞浆向胞膜的转运。

右美托咪定对瑞芬太尼诱导大鼠脊髓背角神经元NMDA受体mEPSCs的影响

目的评价右美托咪定对瑞芬太尼诱导大鼠脊髓背角神经元NMDA受体微小兴奋性突触后膜电流（mEPSCs）的影响。方法取出生14～18 d雄性SD幼鼠30只，体重50～60 g，制备腰段脊髓切片，取切片180张，采用随机数字表法分为5组（n＝36）：空白对照组（C组）：人工脑脊液中孵育90 min；瑞芬太尼组（R组）：在含终浓度4 nmol/L瑞芬太尼的人工脑脊液中孵育90 min；低剂量右美托咪定组（L组）、中剂量美托咪定组（M组）和高剂量右美托咪定组（H组）：在含终浓度4 nmol/L瑞芬太尼和右美托咪定终浓度分别为2、4和6 nmol/L的人工脑脊液中孵育90 min。采用全细胞膜片钳法记录大鼠脊髓背角神经元NMDA受体mEPSCs幅值与时间间隔。结果与C组比较，其余4组mEPSCs幅值增大，时间间隔缩短（P〈0.05）；与R组比较，L组、M组和H组mEPSCs幅值减小，时间间隔延长（P〈0.05）；与L组比较，M组和H组mEPSCs幅值减小，时间间隔延长（P〈0.05）；与M组比较，H组mEPSCs幅值减小，时间间隔延长（P〈0.05）。结论右美托咪定可能通过突触前和突触后机制减弱瑞芬太尼诱导的大鼠脊髓背角神经元NMDA受体功能增强。

δ受体在瑞芬太尼诱发大鼠脊髓背角神经元NMDA受体微小兴奋性突触后膜电流中的作用

目的探讨8受体在瑞芬太尼诱发大鼠脊髓背角神经元NMDA受体微小兴奋性突触后膜电流（mEPSCs）中的作用。方法取出生14—18d的雄性Wistar大鼠，体重50～60g，取腰段脊髓（L2～S1），制备脊髓切片，取脊髓切片24张，采用随机数字表法，将其随机分为4组（／t=6）：对照组（C组）置入人工脑脊液中培养；甘氨酸组（G组）置人含甘氨酸（终浓度0．24μmol／L）的人工脑脊液中孵育；瑞芬太尼组（R组）制备脊髓切片，置入含瑞芬太尼（终浓度为4nmol／L）的人工脑脊液中孵育；瑞芬太尼＋8受体拮抗剂纳曲吲哚组（RN组）制备脊髓切片，置人含瑞芬太尼和纳曲吲哚（终浓度分别为4nmol／L和1nmol／L）的人工脑脊液中孵育。各组孵育60min后应用全细胞膜片钳技术记录脊髓背角神经元NMDA受体mEPSCs的幅值和频率。结果与C组比较，R组mEPSCs的幅值和频率升高（P〈0．01），G组和RN组差异无统计学意义（P〉0．05）；与R组比较，RN组mEPSCs的幅值和频率降低（P〈0．01）。结论脊髓背角神经元6受体激活后可增强NMDA受体功能，该作用可能参与了瑞芬太尼诱发的痛觉过敏。

脊髓蛋白激酶C在瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏中的作用：与NR1磷酸化的关系

目的 评价脊髓蛋白激酶C（PKC）在瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏中的作用及其与含R1亚基NMDA受体（NR1）磷酸化的关系.方法 SPF级健康成年雄性SD大鼠60只,体重220～ 250 g,采用随机数字表法分为5组（n=12）：对照组（C组）、切口痛组（Ⅰ组）、瑞芬太尼组（R组）、Gt7874＋切口痛组（G组）和G67874＋瑞芬太尼组（G＋R组）.除C组外均做右足底切口痛模型,R组和G＋R组切皮同时经皮下输注瑞芬太尼（0.04 mg/kg,1 mg溶于40 ml生理盐水）30 min,G组和G＋R组术前30 min鞘内注射PKC抑制剂Gt7874 10μl（12.5 nmol溶于10 μl 10％二甲基亚砜中）,余组鞘内注射10％二甲基亚砜10μl.于术前24 h、术后2、6、24和48 h（T0-4）时测定术侧足底机械缩足反应阈（MWT）和热缩足潜伏期（TWL）,于术后24 h各组随机取3只大鼠取L3-5节段右侧脊髓背角,采用Western blot法检测磷酸化NR1（p-NR1）的表达水平.结果 与C组比较,Ⅰ组、R组和G＋R组T1-4时、G组T3,4时MWT降低,TWL缩短,Ⅰ组、R组、G组和G＋R组T3时右侧脊髓背角p-NR1表达上调（P＜0.05）;与Ⅰ组比较,R组T1-4时MWT降低,TWL缩短,G组T1-4时MWT升高,TWL延长,G＋R组T3,4时MWT升高,T1-4时TWL延长,R组T3时右侧脊髓背角p-NR1表达上调,G组和G＋R组T3时右侧脊髓背角p-NR1表达下调（P＜0.05）;与R组比较,G＋R组T1-4时MWT升高,TWL延长,T3时右侧脊髓背角p-NR1表达下调（P＜0.05）.结论 脊髓PKC参与了瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏的过程,与降低脊髓背角NR1磷酸化水平有关.

脊髓P2Y1R在瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏形成中的作用:与脊髓NR1和NR2B功能的关系

目的评价脊髓P2Y1嘌呤受体(P2Y1R)在瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏形成中的作用及其与脊髓NMDA受体(NR)1和NR2B功能的关系。方法鞘内置管成功的健康成年雄性SD大鼠48只,10~12周龄,体重250~280 g,采用随机数字表法分为6组(n=8):对照组(C组)、P2Y1R拮抗剂MRS2179组(M组)、瑞芬太尼组(R组)、瑞芬太尼+MRS2179组(R+M组)、切口痛+瑞芬太尼组(I+R组)和切口痛+瑞芬太尼+MRS2179组(I+R+M组)。C组鞘内注射生理盐水10μl,10 min后经尾静脉输注生理盐水0.1 ml·kg^(-1)·min^(-1) 60 min;M组鞘内注射MRS21790.6 nmol/kg,10 min后经尾静脉输注生理盐水0.1 ml·kg^(-1)·min^(-1) 60 min;R组鞘内注射生理盐水10μl,10 min后经尾静脉输注瑞芬太尼1μg·kg^(-1)·min^(-1) 60 min;R+M组鞘内注射MRS21790.6 nmol/kg,10 min后经尾静脉输注瑞芬太尼1μg·kg^(-1)·min^(-1) 60 min;I+R组鞘内注射生理盐水10μl,10 min后经尾静脉输注瑞芬太尼1μg·kg^(-1)·min^(-1) 60 min,瑞芬太尼输注开始后10 min制备切口痛模型;I+R+M组鞘内注射MRS21790.6 nmol/kg,10 min后经尾静脉输注瑞芬太尼1μg·kg^(-1)·min^(-1) 60 min,瑞芬太尼输注开始后10 min制备切口痛模型。分别于输注瑞芬太尼或生理盐水前24 h、输注停止后2、6、24和48 h时测定机械缩足反应阈(MWT)、热缩足潜伏期(TWL)和冷板抬足次数。最后一次痛阈测定结束后处死大鼠,取脊髓L4-6节段,采用Western blot法检测脊髓P2Y1R、磷酸化NR1(p-NR1)、NR1、磷酸化NR2B(p-NR2B)和NR2B表达,并计算p-NR1/NR1比值及p-NR2B/NR2B比值,采用RT-PCR法检测P2Y1R、NR1和NR2B的mRNA表达。结果与C组比较,R组MWT降低,TWL缩短,冷板抬足次数增加,脊髓P2Y1R及其mRNA、NR1及其mRNA、p-NR1、NR2B及其mRNA、p-NR2B表达上调,p-NR1/NR1比值和p-NR2B/NR2B比值升高(P<0.01)。与R组比较,R+M组MWT增加,TWL延长,冷板抬足次数减少,脊髓P2Y1R、p-NR1、NR1及其mRNA、p-NR2B、NR2B及其mRNA表达下调,p-NR1/NR1比值和p-NR2B/NR2B比值降低(P<0.05或0.01);与I+R组比较,I+R+M组MWT增加,TWL延长,冷板抬足次数减少,脊髓P2Y1R、p-NR1、NR1及其mRNA、p-NR2B、NR2B及其mRNA表达下调,p-NR1/NR1比值和p-NR2B/NR2B比值降低(P<0.01)。结论脊髓P2Y1R可增强NR1和NR2B功能,该作用可能参与了瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏的形成。

右美托咪定对瑞芬太尼诱导的大鼠脊髓背角神经元NMDA受体mEPSCs的影响

目的评价右美托咪定对瑞芬太尼诱导的大鼠脊髓背角神经元NMDA受体微小兴奋性突触后膜电流（mEPSCs）的影响。 方法取出生14～18 d雄性SD幼鼠30只，体重50～60 g，制备腰段脊髓切片，取切片180张，采用随机数字表法分为5组（n＝36）：空白对照组（C组）人工脑脊液中孵育90 min；瑞芬太尼组（R组）在终浓度4 nmol/L瑞芬太尼的人工脑脊液中孵育90 min；低剂量右美托咪定组（L组）、中剂量美托咪定组（M组）和高剂量右美托咪定组（H组）在终浓度4 nmol/L瑞芬太尼和右美托咪定终浓度分别为2、4和6 nmol/L的人工脑脊液中孵育90 min。采用全细胞膜片钳法记录大鼠脊髓背角神经元NMDA受体mEPSCs幅值与时间间隔。 结果与C组比较，其余4组mEPSCs幅值增大，时间间隔缩短（P〈0.05）；与R组比较，L组、M组和H组mEPSCs幅值减小，时间间隔延长（P〈0.05）；与L组比较，M组和H组mEPSCs幅值减小，时间间隔延长（P〈0.05）；与M组比较，H组mEPSCs幅值减小，时间间隔延长（P〈0.05）。 结论右美托咪定可能通过突触前和突触后机制减弱瑞芬太尼诱导的大鼠脊髓背角神经元NMDA受体功能增强。

糖原合成酶激酶-3β在瑞芬太尼诱发大鼠脊髓背角神经元NMDA受体微小兴奋性突触后膜电流中的作用

目的探讨糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）在瑞芬太尼诱发大鼠脊髓背角神经元NMDA受体微小兴奋性突触后膜电流（mEPSCs）中的作用。方法取出生14～18d的Wistar大鼠24只，体重50～60g，制备腰段脊髓切片，取切片144张，采用随机数字表法，将其分为4组（n=36）：对照组（C组）：置人人工脑脊液中培养；甘氨酸组（G组）：置入含甘氨酸（浓度0．24μmol／L）的人工脑脊液中孵育；瑞芬太尼组（R组）：置人含瑞芬太尼（浓度为4nmol／L）的人工脑脊液中孵育；瑞芬太尼＋GSK-3β抑制剂TDZD-8组（RT组）：置入含瑞芬太尼和TDZD-8（浓度分别为4nmol／L和10gmol／L）的人工脑脊液中孵育。各组孵育60min后应用全细胞膜片钳技术记录脊髓背角神经元NMDA受体mEPSCs的幅值和频率。结果与C组比较，R组mEPSCs的幅值和频率升高（P〈0．01），G组和RT组差异无统计学意义（P〉0．05）；与R组比较，RT组mEPSCs幅值和频率降低（P〈0．01）。结论脊髓背角神经元GSK-30参与了瑞芬太尼增强NMDA受体mEPSCs的作用，提示其可能参与了瑞芬太尼诱发的痛觉过敏。

瑞芬太尼和芬太尼对大鼠脊髓背角神经元NMDA受体通道电流的影响

目的探讨瑞芬太尼和芬太尼对大鼠脊髓背角神经元NMDA受体通道电流的影响。方法采用全细胞膜片钳技术记录NMDA受体通道电流。原代培养的E14SD大鼠脊髓背角神经元（DH细胞）30个，采用随机数字表法，将其分为3组（n=10）：瑞芬太尼组（R组）、芬太尼组（F组）、对照组（C组）。4nmol／L瑞芬太尼（R组）、10μmol／L芬太尼（F组）灌流DH细胞60min后洗脱。于给药后即刻（T0）、药物作用15min（T1）、30min（L）、45min（T3）、60min（T4）、洗脱后15min（L）、30min（L）时记录NMDA受体通道电流。结果与C组比较，F组各时点NMDA受体通道峰电流差异无统计学意义，R组T0、T1时NMDA受体通道峰电流差异无统计学意义（P〉0．05），T2-T6时NMDA受体通道峰电流升高（P〈0．01）；与R时比较，R组T1-T6时NMDA受体通道峰电流升高（P〈0．01）；与T5时比较，R组T2-T4时、L时NMDA峰电流下降（P〈0．01）。结论瑞芬太尼可增强大鼠脊髓背角神经元NMDA受体功能，于洗脱后达峰效应，芬太尼无此作用。

瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏时脊髓NR2B与CaMKⅡα的关系

目的评价瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏时脊髓含2B亚基的NMDA受体(NR2B)与钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱα(CaMKⅡα)的关系。方法取尾静脉置管及鞘内置管成功的雄性SD大鼠40只,体重260~280g,2~3月龄,采用随机数字表法分为4组(n=10):对照组(C组)鞘内注射生理盐水0.1ml,10min后经尾静脉输注生理盐水0.1ml·kg^-1·min^-1,持续60min;瑞芬太尼+切口痛组(RI组)鞘内注射生理盐水0.1ml,10min后尾静脉输注瑞芬太尼1.0μg·kg^-1·min^-1,持续60min,输注开始即刻建立切口痛模型;NR2B拮抗剂Ro25-6981组(Ro组)鞘内注射Ro25-6981(0.1ml)10μg,10min后尾静脉输注生理盐水0.1ml·kg^-1·min^-1,持续60min;瑞芬太尼+切口痛+Ro25-6981组(RI+Ro组)鞘内注射Ro25-6981(0.1ml)10μg,10min后尾静脉输注瑞芬太尼1.0μg·kg^-1·min^-1,持续60min,输注开始即刻制备切口痛模型。于静脉输注生理盐水或瑞芬太尼前24h、输注完毕后2、6、24和48h(T0-4)时测定机械缩足反应阈(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)。最后一次行为学测试后处死大鼠,取L4-6脊髓节段,采用Westernblot法测定脊髓总蛋白和膜蛋白NR2B(tNR2B和mNR2B)及总蛋白CaMKⅡα(tCaMKⅡα)和磷酸化CaMKⅡα(pCaMKⅡα)的表达水平,计算mNR2B/tNR2B比值及pCaMKⅡα/tCaMKⅡα比值。结果与C组比较,RI组MWT降低,TWL缩短,脊髓tNR2B、mNR2B,tCaMKⅡα及pCaMKⅡα表达上调,mNR2B/tNR2B比值、pCaMKⅡα/tCaMKⅡα比值升高(P<0.05或0.01)。与RI组比较,RI+Ro组MWT升高,TWL延长,脊髓tNR2B、mNR2B和tCaMKⅡα及pCaMKⅡα表达下调,mNR2B/tNR2B比值、pCaMKⅡα/tCaMKⅡα比值降低(P<0.05或0.01)。结论瑞芬太尼诱发切口痛大鼠痛觉过敏时脊髓NR2B功能增强可激活CaMKⅡα,该过程可能参与了瑞芬太尼诱发术后痛觉过敏形成的机制。