N-myc下游调节基因2、微卫星不稳定在不同病理学特征胃癌患者中的表达及意义

目的:探讨N-myc下游调节基因2(NDRG2)、微卫星不稳定(MSI)在不同病理学特征胃癌患者中的表达及意义。方法:回顾性分析2019年1月至2020年12月该院收治的98例行胃癌根治术患者的临床资料,统计胃癌患者NDRG2、MSI的检测结果,比较不同病理学特征胃癌患者NDRG2、MSI的表达情况。结果:临床分期Ⅰ~Ⅱ期、未合并淋巴结转移的胃癌患者NDRG2阳性率高于临床分期Ⅲ~Ⅳ期、合并淋巴结转移的患者,差异均有统计学意义(P<0.05);肿瘤位置在胃窦、Lauren分型为肠型、低分化、临床分期Ⅰ~Ⅱ期、未合并淋巴结转移胃癌患者的MSI阳性表达率高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:NDRG2在临床分期Ⅰ~Ⅱ期、未合并淋巴结转移的胃癌患者中呈高表达;MSI在肿瘤位置在胃窦、Lauren分型为肠型、低分化、临床分期Ⅰ~Ⅱ期、未合并淋巴结转移的胃癌患者中呈高表达,二者共同参与胃癌的发生发展。

N-myc下游调节基因2对巨噬细胞极化及乳腺癌增殖、侵袭和迁移的影响

目的探究N-myc下游调节基因2(N-myc downstream-regulated gene 2,NDRG2)在乳腺癌中的表达及对巨噬细胞极化和乳腺癌增殖、侵袭及迁移的影响。方法生物信息学分析NDRG2在乳腺癌组织中的表达及与临床相关病理特征和预后的关系。免疫荧光检测乳腺癌组织中NDRG2与巨噬细胞分子标志物的定位与表达。构建巨噬细胞与乳腺癌细胞的共培养体系观察巨噬细胞内NDRG2水平改变对乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。结果NDRG2在乳腺癌组织中表达下调并与不良预后相关,巨噬细胞内NDRG2表达下调促进巨噬细胞向促瘤表型M2极化,NDRG2表达上调则促进巨噬细胞向抑瘤型M1极化,共培养体系中巨噬细胞内NDRG2表达下调可增加乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力,从而促进乳腺癌进展。结论巨噬细胞内NDRG2表达下调不仅可以促进巨噬细胞向促瘤型M2转变,还能增强乳腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。

miR-181b通过靶向调控N-myc下游调节基因2影响骨肉瘤细胞的迁移和侵袭

目的探讨miR-181b对骨肉瘤细胞迁移和侵袭的影响。方法培养骨肉瘤细胞,实时荧光定量PCR检测miR-181b在骨肉瘤细胞中的表达。抑制miR-181b的表达,Transwell检测对骨肉瘤迁移和侵袭的影响;生物信息学分析miR-181b靶基因并采用荧光素酶报告基因分析miR-181b和靶基因在骨肉瘤中是否直接作用,同时采用Western Blotting检测靶基因在骨肉瘤细胞中的表达以及Transwell检测靶基因对骨肉瘤迁移和侵袭的影响。结果实时荧光定量PCR结果表明miR-181b在骨肉瘤细胞中高表达。抑制miR-181b的表达能够抑制骨肉瘤细胞的迁移和侵袭;生物信息学分析表明N-myc下游调节基因2(NDRG2)是miR-181b直接作用的靶基因,荧光素酶报告基因分析验证了该结果;Western blotting检测表明NDRG2在骨肉瘤中低表达,而抑制miR-181b能够显著提高NDRG2的表达。抑制miR-181b的表达的同时抑制靶基因NDRG2的表达,能够逆转抑制miR-181b的表达对骨肉瘤细胞的迁移和侵袭的影响,从而显著提高骨肉瘤细胞的迁移和侵袭。结论 miR-181b在骨肉瘤中过表达,NDRG2为miR-181b直接调控靶基因,抑制miR-181b能够提高NDRG2的表达从而抑制骨肉瘤细胞的迁移侵袭。

老年急性缺血性脑卒中患者N-myc下游调节基因3和信号素3A表达及其临床意义

目的分析老年急性缺血性脑卒中患者N-myc下游调节基因3(NDRG3)和信号素3A(SEMA3A)表达及其临床意义。方法选择2020年9月至2022年9月聊城市人民医院老年病科收治的老年急性缺血性脑卒中患者100例(研究组)。研究组根据入院时美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分分为轻度组34例,中度组31例,重度组35例;出院后随访3个月,依照改良的Rankin量表评分分为预后良好组69例,预后不良组31例。另选取同期我院健康体检者100例(对照组)。使用Westernblot法检测外周血单个核细胞(PBMC)中NDRG3、SEMA3A表达,ELISA法检测外周血内皮生长因子、转化生长因子β1、TNF-α、白细胞介素17水平,Spearman等级相关性分析NDRG3、SEMA3A与NIHSS评分的相关性,ROC曲线分析NDRG3、SEMA3A对老年急性缺血性脑卒中患者预后不良的预测价值。结果研究组PBMC中NDRG3、SEMA3A表达较对照组明显升高(1.11±0.16vs0.76±0.13,0.78±0.13vs0.42±0.09,P<0.01)。轻度组、中度组、重度组PBMC中NDRG3、SEMA3A表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。预后不良组NDRG3、SEMA3A表达明显高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.01)。Spearman等级相关性分析显示,老年急性缺血性脑卒中患者NIHSS评分与NDRG3、SEMA3A表达呈正相关(r=0.597,P<0.01;r=0.618,P<0.01),NDRG3与SEMA3A表达呈正相关(r=0.477,P<0.01)。ROC曲线分析显示,NDRG3+SEMA3A联合预测的曲线下面积优于NDRG3、SEMA3A单独预测(0.962vs 0.861、0.880,P<0.01)。结论老年急性缺血性脑卒中患者NDRG3、SEMA3A表达上调,且与患者病情严重程度及预后密切相关。

胰腺疾病组织N—myc下游调节基因2的表达与分布

分离胰岛细胞增生症患者、胰岛素瘤患者、胰尾高中分化腺癌患者和正常人胰腺组织，制成石蜡切片，用抗N-myc下游调节基因2（Ndrg2）单克隆抗体进行免疫组织化学染色（ABC法），用Western印迹法检测Ndrg2的表达与分布情况。结果显示，Ndrg2阳性反应物主要分布在胰岛细胞的胞浆，与胰岛素的阳性反应物分布与定位相似；胰岛细胞增生症患者胰岛数量增加，体积增大，且该疾病患者胰腺中Ndrg2表达增加；Western印迹实验结果显示胰岛细胞增生症患者胰腺组织中Ndrg2蛋白的表达量较正常组增高。提示Ndrg2基因可能在胰岛细胞中发挥重要的生理功能。

褪黑素对大鼠肠缺血再灌注肺损伤及N-myc下游调节基因2表达的影响

目的研究褪黑素对大鼠肠缺血再灌注肺损伤的保护作用及其对N-myc下游调节基因2(NDRG2)表达的影响。方法将健康雄性SD大鼠40只随机分为褪黑素高剂量组(10 mg/kg)、褪黑素低剂量组(1 mg/kg)、缺血再灌注组和假手术组。褪黑素高、低剂量组造模前30 min给予腹腔注射褪黑素,缺血再灌注组和假手术组造模前30 min腹腔注射与褪黑素治疗量等容量的生理盐水。褪黑素高、低剂量组和缺血再灌注组大鼠经夹闭肠系膜上动脉,缺血60 min后松开动脉夹造成再灌注,建立肠缺血再灌注肺损伤模型,于再灌注45 min后取右肺组织。假手术组全身麻醉后只切除右肺,缝合切口。观察肺组织病理学改变和湿/干重比值(W/D),免疫组化、Western-blot方法观察大鼠肺组织NDRG2的表达。结果与假手术组比较,缺血再灌注组肺泡壁增宽,肺泡腔内可见出血等炎症表现,W/D显著升高,肺组织NDRG2蛋白表达明显降低。与缺血再灌注组比较,褪黑素高、低剂量组肺泡腔内出血等炎症表现减轻,W/D显著降低,肺组织NDRG2蛋白表达明显增强。褪黑素高、低剂量组间各指标均无显著差异。结论褪黑素可能通过上调NDRG2的表达而减轻肠缺血再灌注造成的肺损伤。

N-myc下游调节基因-2在大鼠肠缺血再灌注肺损伤中的表达及其与NF-κBp65的相关研究

目的通过建立大鼠肠缺血再灌注肺损伤(IIRI)模型,观察大鼠肠缺血再灌注肺损伤,肺组织中N-myc下游调节基因-2(NDRG2)表达水平的变化。方法 50只健康成年雄性SD大鼠随机分成对照组(control)、缺血再灌注组(I/R)(其中根据缺血再灌注时间又分4个亚组),每组10只。缺血再灌注4个亚组选择缺血60min后分别再灌注30、60、120和180min,获取样本肺组织。术后样本行病理(HE)、湿干重比例(W/D)检测,免疫组化、Western-blot对NDRG2、核转录因子-κBp65(NF-κBp65)检测,RT-PCR方法对NDRG2在mRNA水平含量进行检测,TUNEL法对凋亡细胞进行检测。结果缺血再灌注组与对照组比较,缺血再灌注组肺泡壁增宽,肺泡腔内可见出血等炎症表现,W/D比值显著性升高(P<0.05),免疫组化显示NF-κBp65发生核转位现象,NF-κBp65蛋白水平表达明显升高(P<0.05),肺组织NDRG2在mRNA水平和蛋白水平的表达明显降低(P<0.05)。结论缺血再灌注损伤可下调肺组织中NDRG2的表达,NDRG2可能通过对NF-κB通路进行调控,是导致缺血再灌注后肺损伤的靶向调控位点,对肠缺血再灌注肺损伤的大鼠起保护作用。

三叶因子2和N-myc下游调节基因1在不同子宫内膜组织中的表达

目的 探讨三叶因子2（TFF2）和N-myc下游调节基因1（NDRG1）在不同子宫内膜组织中的表达,为早期诊断子宫内膜癌提供新的生物学指标。方法 收集珠海市人民医院经手术切除并经病理检查确诊为子宫内膜癌组织157例,另选择同期经手术切除并经病理检查确诊的子宫内膜不典型增生组织30例及其他病因手术切除的正常子宫内膜20例,分别检测其TFF2和NDRG1蛋白的表达情况,并分析TFF2和NDRG1蛋白的表达与子宫内膜癌临床病理因素的关系。结果 与正常子宫内膜和子宫内膜不典型增生组织比较,TFF2在子宫内膜癌组织中的阳性表达率显著降低（P〈0.05）,但NDRG1在子宫内膜癌组织中的阳性表达率显著升高（P〈0.01）。TFF2在Ⅰ、Ⅱ期子宫内膜癌组织中的阳性表达率显著高于Ⅲ~Ⅳ期（P〈0.05）;高、中分化子宫内膜癌组织中TFF2的阳性表达率显著高于低分化组织及其他类型（P〈0.01）。与深肌层浸润的子宫内膜癌比较,浅肌层浸润的子宫内膜癌组织中TFF2的阳性表达率显著升高（P〈0.05）;与有淋巴结转移的子宫内膜癌比较,无淋巴结转移的子宫内膜癌组织中TFF2的阳性表达率显著升高（P〈0.01）。而高、中度分化的子宫内膜癌组织中NDRG1的阳性表达率显著低于低分化及其他类型（P〈0.05）。浅肌层浸润的子宫内膜癌组织中NDRG1的阳性表达率显著低于深肌层浸润（P〈0.01）,与无淋巴结转移的子宫内膜癌比较,有淋巴结转移的子宫内膜癌组织中NDRG1的阳性表达率显著升高（P〈0.01）。结论 在子宫内膜组织中,TFF2表达的缺失及NDRG1蛋白的高表达可能与子宫内膜癌的发生发展有重要关系,有望在子宫内膜癌的早期诊断、判断是否存在侵袭转移等临床评估中发挥作用。

过表达N-myc下游调节基因2(NDRG2)抑制直肠癌细胞的增殖和迁移并促进细胞凋亡

目的探讨N-myc下游调节基因2(NDRG2)基因对直肠癌细胞增殖、迁移、凋亡的影响。方法培养SW480人直肠癌细胞,以p CDNA3.1为载体,将p CDNA3.1-NDRG2和空载体(SW480-Ve)转染至SW480人直肠癌细胞,并设定SW480细胞为空白对照组。MTT法检测SW480、SW480-Ve、SW480-NDRG2组细胞增殖活性;划痕愈合试验检测三组细胞在24、48、72 h迁移距离;流式细胞术检测三组转染48 h细胞凋亡率;Western blot法检测三组细胞Bax、caspase-3、Bcl-2蛋白表达。结果细胞培养7 d后,SW480-NDRG2组细胞生存率显著低于SW480组和SW480-Ve组,且细胞生存率随着培养时间延长逐渐降低,而SW480-Ve组细胞生存率与SW480组无显著差异;SW480-NDRG2组细胞迁移距离显著低于SW480-Ve组和SW480组,SW480-Ve组和SW480组细胞迁移距离无显著差异;SW480-NDRG2组细胞凋亡率显著高于SW480组和SW480-Ve组,SW480组和SW480-Ve组细胞凋亡率差异不明显;SW480-NDRG2组细胞Bax和caspase-3蛋白表达量显著高于SW480组和SW480-Ve组,Bcl-2蛋白表达量显著低于SW480细胞和SW480-Ve细胞,SW480组和SW480-Ve组Bax、caspase-3和Bcl-2蛋白表达差异不明显。结论过表达NDRG2抑制人直肠癌细胞株SW480的增殖,降低细胞迁移,通过调控Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白表达促进细胞凋亡。

鸟嘌呤核苷酸抑制因子2和N-myc下游调节基因2在肝癌的表达及与病理生物学特点的相关性

目的探讨鸟嘌呤核苷酸抑制因子2(RhoGDI2)和N-myc下游调节基因2(NDRG2)在肝癌组织中的表达及意义。方法所有患者手术中取原发灶癌组织及癌组织旁的正常组织,做好标签,立即放到液氮中保存,以备后期对标本石蜡包埋,免疫组化染色,对RhoGDI2和NDRG2的定位和表达情况进行分析。结果肝癌组织RhoGDI2阳性表达率为69.66%,明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05),而NDRG2阳性表达率为22.47%,明显低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅲ~Ⅳ期患者RhoGDI2阳性表达率为91.11%,明显高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异有统计学意义(P<0.05),而NDRG2阳性表达率为8.89%,明显低于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移患者RhoGDI2阳性表达率为87.50%,明显高于无淋巴结转移患者(P<0.05);RhoGDI2与NDRG2表达呈负相关(r s=-0.640,P<0.05)。结论RhoGDI2在肝癌组织中呈高表达,而NDRG2呈低表达,与临床病理特征有一定关系,值得进一步研究。

增殖细胞核抗原、人类N-myc下游调节基因1在肝细胞性肝癌中的表达及临床意义

目的：研究增殖细胞核抗原（PCNA）及人类N-myc下游调节基因1（NDRG1）在人肝细胞性肝癌中的表达情况,探讨其与肝癌生物学行为的关系及临床意义。方法：选择有存档的原发性肝癌标本58例,肝硬化34例,正常肝组织标本15例,用H-E染色观察组织形态,用免疫组织化学SABC检测PCNA和NDRG1的表达。结果：肝癌组织中PCNA表达明显高于肝硬化组织和正常组织;在肝硬化组织和正常肝组织中,PCNA的表达没有差异;肝癌中PCNA的表达与患者的性别、年龄、HbsAg阳性、AFP水平、部位和肿瘤的直径无关。NDRG1在正常肝组织、肝硬化组织、肝癌组织中表达逐渐减弱;肝硬化组与正常肝组织组相比,差异无统计学意义,在肝癌组织中NDRG1与患者的性别、年龄、HbsAg阳性、AFP水平、部位和肿瘤的直径无关。PCNA及NDRG1在肝癌组织中的表达呈负相关。结论：PCNA、 NDRG1在肝癌发生、发展过程中起着重要的作用,联合检测可以为肿瘤的早发现、早诊断、早治疗提供判断依据。

慢病毒介导NDRG2基因过表达抑制人膀胱癌T24细胞的侵袭和迁移

目的:观察N-Myc下游调节基因-2(N-Myc downstream-regulated gene 2,NDRG2)过表达对人膀胱癌T24细胞体外侵袭和迁移的影响。方法:采用携带NDRG2基因的慢病毒Lenti-NDRG2感染T24细胞,构建稳定过表达NDRG2的细胞株。Western blotting检测T24细胞中NDRG2、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2和MMP-9的表达,Transwell体外迁移和侵袭实验观察过表达NDRG2对T24细胞体外迁移和侵袭的影响。结果:建立了稳定过表达NDRG2的T24细胞株。与Lenti-Lacz组和空白对照组相比,Lenti-NDRG2组NDRG2蛋白的表达[(30.1±1.27)vs(9.9±1.24)、(8.2±1.28),P<0.01]明显提高;Lenti-NDRG2组MMP-2[(13.5±1.32)vs(30.7±1.29)、(28.8±1.30),均P<0.01]和MMP-9[(11.7±1.27)vs(25.2±1.28)、(26.4±1.31),均P<0.01]的表达明显降低;Lenti-NDRG2组T24细胞的侵袭细胞数[(18.1±3.4)vs(88.5±4.2)、(90.2±4.1)个,均P<0.01]和迁移细胞数[(20.1±3.5)vs(109.4±5.6)、(113.0±4.9)个,均P<0.01]明显减少。结论:慢病毒介导的NDRG2基因过表达可能通过降低MMP-2和MMP-9的表达而抑制人膀胱癌T24细胞的转移与侵袭。

转染NDRG1基因对宫颈癌细胞COX-2、VEGF表达及增殖的影响

目的:通过研究人类N-myc下游调节基因1(N-myc downstream regulated gene 1,NDRG1)对人宫颈癌SiHa细胞环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达及细胞增殖的影响,深入探讨NDRG1抑制宫颈癌侵袭转移的作用机制。方法:经脂质体介导将含有NDRG1真核表达质粒转染人宫颈癌SiHa细胞株,采用G418筛选阳性细胞克隆及RT-PCR、蛋白质印迹鉴定;蛋白质印迹法检测阳性克隆细胞COX-2及VEGF表达的改变;噻唑盐(MTT)比色法检测阳性细胞克隆的增殖活性。结果:成功建立高表达NDRG1的阳性SiHa细胞克隆(N-12),并证实其COX-2和VEGF蛋白表达及细胞增殖活性均显著降低。结论:NDRG1可能通过下调宫颈癌细胞COX-2、VEGF的表达及抑制细胞增殖而起到抑制宫颈癌进展的作用。

缺血性脑卒中病人外周血中NDRG2蛋白、mTOR含量与预后的相关性分析

目的研究缺血性脑卒中病人外周血中N-Myc下游调节基因2(NDRG2)蛋白、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的含量,并分析其与病人预后的相关性。方法选取缺血性脑卒中病人300例为观察组,根据神经功能缺损评分分为轻度组(n=99)、中度组(n=113)、重度组(n=88),根据出院90 d改良Rankin量表(mRS)分为预后不良组(mRS>3分,n=108)与预后良好组(mRS≤3分,n=192),同期随机选取体检的健康者278名为对照组。收集研究对象的一般资料并检测常规生化指标水平;利用酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血NDRG2蛋白、mTOR含量,Pearson法分析NDRG2蛋白、mTOR与缺血性脑卒中病人常规生化指标的相关性;病人出院后随访3个月,利用ROC曲线分析NDRG2蛋白、mTOR含量预测缺血性脑卒中预后不良的价值。结果观察组病人外周血中NDRG2蛋白与mTOR含量均显著高于对照组(P<0.01);病人外周血中NDRG2蛋白与mTOR含量神经功能缺损重度组高于中度组和轻度组,中度组亦高于轻度组(P<0.05);缺血性脑卒中病人外周血NDRG2蛋白、mTOR含量分别与LDL-C、TG、TC、Hcy、D-D、Lp(a)、Hs-CRP呈正相关关系(P<0.05~P<0.01),与HDL-C呈负相关关系(P<0.01)。预后良好组病人外周血中NDRG2蛋白与mTOR含量均低于预后不良组(P<0.01);外周血NDRG2蛋白、mTOR含量评估缺血性脑卒中预后不良AUC分别为0.733、0.952,敏感度分别为62.04%、89.81%,特异度分别为76.56%、89.58%;二者联合评估缺血性脑卒中AUC为0.958,敏感度为86.11%,特异度为93.23%。结论缺血性脑卒中病人外周血中NDRG2蛋白、mTOR均呈高水平,二者联合检测对缺血性脑卒中预后不良具有较高的预测价值。

结直肠癌中NDRG2的表达与微卫星不稳定的相关性及其联合检测的意义

目的探讨结直肠癌(CRC)中N-myc下游调节基因2(NDRG2)的表达及其与微卫星不稳定(MSI)的相关性,进一步探索其临床意义。方法收集2017-06—2021-12湖北医药学院附属人民医院病理科存档的结直肠癌组织蜡块标本262例,采用免疫组化SP法检测NDRG2以及4种错配修复(MMR)蛋白(MLH1、MSH2、MSH6、PMS2)的表达情况,统计学分析其相关性及与患者临床病理特征及预后的关系。结果NDRG2表达阴性的肿瘤浸润较深,分化差,淋巴结易转移,TNM多处于Ⅲ~Ⅳ期(P<0.05)。相较于MSI-L/MSS,MSI-H好发生于女性、多位于右半结肠、肿瘤浸润较浅、多为黏液腺癌、淋巴结不常转移、TNM多为Ⅰ~Ⅱ期(P<0.05)。Spearman相关性分析显示NDRG2阳性表达与MSI-H具有正相关性(r=0.145,P=0.027)。Kaplan-Meier生存分析显示,NDRG2表达阴性和MSI-L/MSS的结直肠癌患者总生存率更低(P<0.05)。多因素COX回归分析显示,TNM分期Ⅲ~Ⅳ期及NDRG2阴性表达是结直肠癌预后的独立危险因素(P<0.05)。结论NDRG2阳性表达与MSI-H呈正相关,且可以预测良好的预后,联合检测可以为结直肠癌患者提供更多有益信息。

转化生长因子-β1抑制人肾小管上皮细胞株HK-2中N-Myc下游调节基因2表达及意义

目的探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）对人肾小管上皮细胞株HK-2中N-myc下游调节基因2（NDRG2）表达的影响。方法按照是否孵育TGF-β1分别设置对照组和实验组，取两组细胞分别提取蛋白及RNA行Western blot及实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR），检验两组上皮细胞E-钙黏蛋白（E-cadherin）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、波形蛋白（Vimentin）和Snail蛋白的表达差异。然后根据孵育TGF-β1的不同浓度梯度设置不同组别，分别取各组细胞提取蛋白及RNA行Western blot及RT-qPCR以检验NDRG2在TGF-β1作用后的人肾小管上皮细胞（HK-2）中的表达。结果结果表明对照组和实验组在蛋白水平相关表达量分别为E-cadherin（1.0±0.2比0.3±0.2）（t＝4.850, P＝0.008），α-SMA（1.0±0.1比2.6±0.4）（t＝6.721, P＝0.003），Vimentin（1.0±0.1比2.6±0.4）（t＝6.721, P＝0.003），Snail（1.0±0.1比2.5±0.2）（t＝11.620, P＝0.000），以上标志物两组之间差异均有统计学意义。对照组和实验组在mRNA水平相关表达量分别为E-cadherin（1.0±0.2比0.2±0.1）（t＝7.686, P＝0.002），α-SMA（1.0±0.3比2.4±0.3）（t＝5.715, P＝0.005），Vimentin（1.1±0.2比2.6±0.5）（t＝4.977, P＝0.008），Snail（0.9±0.2比1.9±0.2）（t＝6.124, P＝0.004），以上标志物两组之间差异均有统计学意义。同时在TGF-β1孵育后，HK-2细胞中NDRG2在蛋白和RNA水平都明显下调，各组在蛋白水平相关表达量分别为1.00±0.04比0.80±0.03比0.50±0.05比0.30±0.03比0.20±0.02（P＝0.019），在mRNA水平相关表达量分别为1.00±0.05比0.70±0.03比0.50±0.04比0.30±0.02比0.20±0.05（P＝0.021）。尤其当孵育TGF-β1浓度大于10 ng/ml时这种作用最为显著，各组表达水平之间差异有统计学意义。结论TGF-β1可以促进HK-2细胞中上皮-间充质转化（EMT）过程，同时TGF-β1可以下调HK-2细胞中NDRG2在蛋白和RNA水平的表达量。

脊髓N-myc下游调节基因2对奥沙利铂诱导神经病理性疼痛及星形胶质细胞分化影响

目的探讨星形胶质细胞N-myc下游调节基因2(NDRG2)是否参与奥沙利珀诱导的神经病理性疼痛(OINP),并探索其对脊髓星形胶质细胞表型分化的影响。方法选取清洁级(SPF级)雄性SD大鼠32只。实验分为两部分,第一部分,将16只雄性大鼠随机分为Vehicle组(腹腔注射5%葡萄糖溶液,n=8)和Oxaliplatin组(腹腔注射奥沙利铂溶液,n=8);第二部分,将16只雄性大鼠随机分为对照腺病毒+OINP组(AD-control+OINP组,鞘内注射AD-control,腹腔注射奥沙利铂溶液,n=8)和Ndrg2干扰腺病毒+OINP组(AD-Ndrg2-RNAi+OINP组,鞘内注射AD-Ndrg2-RNAi,腹腔注射奥沙利铂溶液,n=8)。行为学检测各组大鼠机械缩足阈值(MWT)、热缩足潜伏期(TWL)。蛋白免疫印迹和实时荧光定量聚合酶链反应检测星形胶质细胞标记物GFAP、A1型星形胶质细胞标记物C3、A2型星形胶质细胞标记物S100A10及NDRG2的蛋白及mRNA表达,免疫荧光检测GFAP和C3、NDRG2的荧光表达。结果腹腔注射奥沙利铂7、11、18、25 d,Vehicle组的MWT、TWL均高于Oxaliplatin组,差异有统计学意义(P<0.05)。Oxaliplatin组脊髓星形胶质细胞标记物GFAP蛋白含量、A1表型星形胶质细胞标记物C3蛋白含量均高于Vehicle组,而A2表型星形胶质细胞标记物S100A10蛋白含量低于Vehicle组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Oxaliplatin组脊髓NDRG2蛋白含量显著高于Vehicle组,差异有统计学意义(P<0.05)。AD-Ndrg2-RNAi+OINP组NDRG2蛋白含量及Ndrg2相对mRNA含量显著低于AD-control+OINP组,差异有统计学意义(P<0.05)。给药11 d,AD-Ndrg2-RNAi+OINP组的MWT和TWL显著高于AD-control+OINP组,差异均有统计学意义(P<0.05)。AD-Ndrg2-RNAi+OINP组A1表型星形胶质细胞标志物C3的蛋白含量及mRNA含量低于AD-control+OINP组,而A2表型星形胶质细胞标志物S100A10的蛋白含量及mRNA含量显著高于AD-control+OINP组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论脊髓背角NDRG2促进星形胶质细胞向神经毒性A1表型分化,从而促进OINP雄性大鼠产生机械痛觉过敏和热痛觉过敏,为治疗OINP提供潜在的干预靶点。

肿瘤抑制基因N-myc下游调节基因2调节结肠癌细胞糖代谢

目的 观察肿瘤抑制因子N-myc下游调节基因2（NDRG2）于结肠癌细胞葡萄糖代谢调节作用.方法 稳定转染NDRG2于结肠癌细胞HCT116,乳酸检测试剂盒检测细胞（1×10^6个）乳酸代谢的水平;葡萄糖试剂盒检测通过细胞（1 ×10^6个）消耗培养基葡萄糖的水平;Western blot检测HCT116细胞（1×10^6个）糖酵解中丙酮酸激（PKM）、乳酸脱氢酶（LDHA）、己糖激酶（HK）表达水平.结果 转染NDRG2后,NDRG2可有效抑制HCT116细胞乳酸[（38.2 ±3.4） mol/L比（62.1±4.8）mol/L,P＜0.05]的生成,培养基剩余葡萄糖量则明显增多[（137.0±3.6） mol/L比（88.2±2.2）mol/L,P＜0.05].Western blot检测NDRG2转染的HCT116细胞显示PKM、LDHA、HK表达显著低于对照组HCT116细胞.结论 NDRG2作为肿瘤抑制基因,能够 调控结肠癌细胞糖代谢,抑制糖酵解关键酶生成,从而抑制肿瘤细胞糖酵解.

NDRG2通过抑制β-catenin表达和入核调控乳腺癌细胞增殖

背景与目的:乳腺癌是女性发病率最高的恶性肿瘤之一,肿瘤细胞的恶性增殖是造成患者死亡的重要原因。本研究利用具有相同遗传背景但不同增殖能力的乳腺癌细胞模型,研究N-myc下游调节基因2(N-myc downstream regulated gene 2,NDRG2)调控乳腺癌细胞增殖的作用及分子机制。方法:通过蛋白[质]印迹法(Western blot)检测MCF-7/LM-MCF-7细胞中NDRG2蛋白表达水平;构建NDRG2真核表达载体及si RNA干扰片段,通过转染上调或沉默NDRG2表达,流式细胞实验检测细胞增殖能力,Western blot检测β-连环蛋白(β-catenin)表达,免疫荧光染色检测β-catenin细胞定位;共转染MCF-7细胞NDRG2 si RNA和pCMV-Tcfδ,流式细胞实验检测细胞增殖能力。结果:NDRG2的蛋白表达水平同乳腺癌细胞增殖能力负相关;在增殖的LMMCF-7细胞中上调NDRG2表达,细胞增殖指数(proliferation index,PI)由47.18%下降至31.78%(P<0.001);在低增殖的MCF-7细胞中沉默NDRG2表达,PI由32.00%上升至52.59%(P<0.001);Western blot及免疫荧光结果显示,NDRG2可抑制β-catenin表达,并抑制其聚集入核;流式细胞检测结果显示,共转染si RNA和pCMV-Tcfδ的MCF-7细胞增殖能力未增强,进一步说明NDRG2是通过抑制β-catenin的转录调节作用抑制肿瘤细胞增殖。结论:在乳腺癌细胞中,NDRG2的表达水平下调,导致β-catenin聚集入核,并激活下游靶基因,促进乳腺癌细胞增殖。此分子机制对阐明乳腺癌细胞增殖调控机制具有重要意义。

NDRG2对卵巢癌迁移和侵袭能力的影响

目的:研究N-myc下游调节基因2(NDRG2)对卵巢癌迁移和侵袭能力的影响。方法:首先应用qRT-PCR实验检测NDRG2在正常卵巢组织和卵巢癌组织中的表达水平。再应用划痕实验和transwell小室实验检测NDRG2对卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的影响。最后检测NDRG2对SKOV3细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达水平的影响。结果:在卵巢癌组织中NDRG2的表达水平明显低于正常卵巢组织。NDRG2的表达水平可以影响卵巢癌细胞的侵袭和迁移能力,NDRG2减少MMP-2和MMP-9的表达水平。结论:NDRG2在卵巢癌中作为一个抑癌基因可以影响癌症的侵袭和转移。