位于大鼠肌乳酸脱氢酶(LDHA)N端结构中的点突变对其四体稳定性的影响

乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）为典型的相同亚基的四聚体蛋白，其Ｎ端结构十分特殊，包含着一个α螺旋和一个β结构，它们对于ＬＤＨ四级结构的形成起着十分重要的作用．为了进一步研究Ｎ端结构中的特殊残基对其四体形成的影响，构建了Ｌｅｕ３Ｐｒｏ （Ｌ３Ｐ）和Ｉｌｅ８Ｇｌｕ（Ｉ８Ｅ）两个突变体．在同野生型 ＬＤＨ（ＷＴ）稳定性实验的比较中发现，两个突变体的四级结构稳定性均有不同程度的降低：野生型酶在０．６～０．８ ｍｏｌ／Ｌ ＧｄｍＣｌ中解离为二体；Ｌ３Ｐ在天然态时虽是四体的形式，但在０．３ ｍｏｌ／Ｌ ＧｄｍＣｌ中已解离成二体；而Ｉ８Ｅ在天然态时主要以二体的形式存在，并且其ＫＭ升高，Ｋｃａｔ降低，且可以被 Ｎａ２ＳＯ４激活．上述结果充分证明了Ｎ端结构，特别是在β结构中引入一个负电荷，能够显著影响亚基的相互作用，影响四级结构的稳定性．