N端乙酰转移酶家族敲低细胞系构建及功能研究

N端乙酰转移酶在肝癌细胞中的研究很少,为更好地研究其功能,本研究构建了全部6种已知的N端乙酰转移酶单基因敲低细胞系.首先设计PLKO载体适应的RNAi序列,将正确的RNAi质粒采用病毒包装并转染肝癌细胞,采用嘌呤霉素筛选,获得稳定细胞株后RT-PCR检测敲低效率,用细胞增殖曲线法检测细胞增殖.RT-PCR显示N端乙酰转移酶敲低细胞系构建成功,细胞增殖实验证实Naa10、Naa20、Naa30、Naa40敲低能够抑制细胞生长,该敲低细胞系的建立为进一步研究N端乙酰化的功能提供了稳定可靠的细胞模型.

乙酰转移酶基因NAA10的生物学功能及其在肿瘤中的作用

N端乙酰转移酶A(N-acetyltransferase A,NatA)复合体是真核生物最主要的N端氨基酸α位乙酰转移酶,N端α位乙酰转移酶10基因(N-α-acetyltransferase 10,NAA10)编码的N端α位乙酰转移酶10蛋白(N-α-acetyltransferase 10 protein,Naa10p)是NatA的催化亚基.Naa10p具备新生蛋白质N端氨基酸α位乙酰化活性、成熟蛋白质Lys残基ε位乙酰化活性以及对部分转录因子的协同调节作用.Naa10p能够通过调节细胞周期促进细胞增殖,通过调节雷帕霉素靶蛋白(mechanistic target of rapamycin,mTOR)通路促进细胞自噬,并通过多种不同的分子信号通路抑制细胞运动能力.根据乙酰化底物的不同,Naa10p还在细胞凋亡的调控中起双重作用.Naa10p参与的生物学过程还涉及血管生成和神经发育等.Naa10p在多种癌症组织中呈过表达,但其预后意义随肿瘤不同而有较大差别.对Naa10p的生理生化研究必将使我们对细胞的生理病理学过程及其机制的了解更加深入全面.本文将从蛋白质结构、机制功能及临床意义等不同角度系统地阐述NAA10的研究现状与进展.