用人透明带蛋白(hZPA)N端重组肽的免疫避孕展望

哺乳动物卵透明带(ZP)是避孕疫苗可能的候选抗原之一。研究结果表明人ZPA重组表达蛋白在兔体内诱导了可抑制人体外受精的抗血清。本研究旨在确定该重组蛋白是否也能在一非人灵长类动物中产生可阻断受精的抗血清。 方法 免疫原使用了去除信号肽的猪ZPA氨基端198和人ZPA氨基端206个氨基酸残基肽,它们均山含各重组pET21b质粒的大肠杆菌(BL21)表达,然后被分别纯化用作抗原、帽猴的免疫采用完全福氏佐剂和单次为500μg抗原的背部两位点肌肉注射方式,在每次间隔1个月的4次加强免疫后收集抗血清。关于抗血清效价的鉴定,抗体生成的测定采用人卵母细胞免疫荧光染色法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法,阻断受精试验使用人卵母细胞和精子。