N型钙黏蛋白与心血管疾病

N型钙黏蛋白是一种Ca^(2+)依赖的单通道跨膜糖蛋白,可促进相邻心肌细胞间的机械和电耦合,减少血管平滑肌细胞凋亡、迁移和增殖,提高植入心肌干细胞的存活率,参与维持心脏结构和功能、胚胎心脏发育以及心脏疾病的病理生理过程。该文介绍N型钙黏蛋白与心脏发育、心血管疾病及心肌修复和再生的关系。

沉默RhoA基因对腺样囊性癌细胞迁移和侵袭的影响

目的探讨RhoA基因对唾液腺腺样囊性癌(salivary adenoidcysticcarcinoma,SACC)细胞的迁移和侵袭能力的影响。方法将液氮冻存的20例SACC及正常癌旁组织研磨匀浆,分别提取总RNA和总蛋白检测RhoA的表达情况。同时构建RhoA⁃siRNA转染2个细胞株SACC⁃LM和SACC⁃83细胞进行细胞学实验,实验分为实验组(转染RhoA⁃siRNA基因),阴性对照组(转染siRNA⁃NC基因)和空白对照组。通过qRT⁃PCR检测各组细胞RhoA的mRNA表达并确定转染效率;Western blot分析各组细胞RhoA及上皮-间充质转换(epithelial⁃mesenchymal transition,EMT)标志分子(E⁃cadherin、N⁃cadherin、Vimentin)的蛋白表达;Transwell实验及划痕实验分析各组细胞侵袭和迁移能力的变化。结果与正常癌旁组织相比,RhoA mRNA和蛋白相对表达量在SACC组织中增高(P<0.01);实验组与对照组相比,RhoA mRNA的相对表达量和蛋白的相对表达量降低,E⁃cadherin蛋白的相对表达量增加,N⁃cadherin、Vimentin蛋白的相对表达量降低(P<0.01);实验组细胞侵袭和迁移能力降低(P<0.01)。结论RhoA在SACC组织中表达增高;体外沉默RhoA基因可有效抑制SACC⁃LM和SACC⁃83细胞迁移和侵袭能力,其可能通过作用EMT影响SACC细胞迁移和侵袭能力。

吗啡对非小细胞肺癌A549细胞增殖、侵袭、迁移及上皮间质转化的影响

目的观察吗啡对非小细胞肺癌A549细胞增殖、侵袭、迁移及上皮间质转化的影响。方法体外培养人非小细胞肺癌A549细胞,随机分为对照组、1μg/mL吗啡组、10μg/mL吗啡组、100μg/mL吗啡组。取对数生长期细胞加入相应浓度的药物后培养24 h。采用CCK-8法检测细胞增殖率,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell法检测细胞侵袭能力,Western blotting法检测细胞中上皮细胞标志物E型钙黏蛋白(E-cadherin)、间充质细胞标志物N型钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达。结果吗啡组细胞增殖率、划痕愈合率均低于对照组,100μg/mL吗啡组低于1、10μg/mL吗啡组(P均<0.05)。吗啡组穿膜细胞数较对照组减少,100μg/mL吗啡组少于1、10μg/mL吗啡组(P均<0.05)。与对照组相比,吗啡组E-cadherin蛋白表达升高,N-cadherin、Vimentin蛋白表达降低(P均<0.05)。结论吗啡能够抑制A549细胞的增殖、侵袭和迁移能力,其机制可能与抑制EMT有关。

当归芍药散对子宫内膜异位症模型大鼠上皮间充质转化相关因子的影响

目的探讨当归芍药散对子宫内膜异位症(EMs)模型大鼠异位内膜上皮间充质转化相关因子的影响。方法采用大鼠自体子宫内膜移植法构建EMs模型大鼠。将造模成功的48只EMs模型大鼠随机分为假手术组、模型组、当归芍药散低、中、高剂量组(3.96,7.92,15.84g·kg^(-1))、西药组(孕三烯酮胶囊0.25mg·kg^(-1)),每组8只。假手术组和模型组大鼠给予生理盐水(10mL·kg^(-1))灌胃。采用苏木素-伊红(HE)染色法对正常内膜及异位内膜进行组织形态学观察;免疫组化法检测正常子宫内膜与异位内膜组织的E-cadherin、N-cadherin蛋白表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测正常内膜及异位组织β-catenin蛋白表达。结果与假手术组正常内膜相比,EMs各组异位子宫内膜组织的E-cadherin蛋白表达下降而β-catenin、N-cadherin蛋白含量升高(P<0.05)。与模型组相比,当归芍药散各剂量组的E-cadherin蛋白上调而β-catenin、N-cadherin蛋白表达含量下降(P<0.05)。结论当归芍药散对EMs模型大鼠的治疗作用可能与调节上皮间充质转化相关因子β-catenin以及E-cadherin、N-cadherin的表达有关。

藤梨根总三萜化合物通过下调N-Cadherin、Snail抑制BGC-823胃癌细胞侵袭的体内外实验研究

目的:考察藤梨根总三萜化合物(KRTC)对BGC-823胃癌细胞的侵袭能力和肿瘤活性的影响。方法:体外实验通过Transwell实验分析KRTC对BGC-823胃癌细胞侵袭能力的影响,Western blot实验分析KRTC对上皮-间质转化相关标记蛋白表达的影响;体内实验通过构建裸鼠胃癌皮下移植瘤模型研究KRTC抗肿瘤生长的有效性,并通过免疫组织化学法检测N型钙黏蛋白(N-Cadherin)、Snail的表达。结果:与表皮生长因子(EGF)组比较,EGF+KRTC组穿过聚碳酸脂膜的细胞数量明显减少(P<0.01),N-Cadherin、Snail表达明显下调(P<0.01);KRTC能够抑制BGC-823胃癌移植瘤的生长,中、高剂量组有显著性差异(P<0.01)。与模型组比较,给药组中N-Cadherin、Snail的表达明显下调(P<0.01)。结论:KRTC能够抑制BGC-823胃癌细胞的侵袭并能抑制胃癌移植瘤生长,下调核转录因子Snail进而引起N-Cadherin下调可能是其实现抗胃癌的机制之一。