决明子水提物干预N-硝基-L-精氨酸甲酯诱导高血压模型大鼠血压的变化

背景:高血压现代诊疗理念是通过降压治疗保护靶器官、改善临床症状与最大程度减少临床事件。决明子在动物实验和临床实践中有降压作用,但是其是否有助于改善高血压血管功能障碍、氧化应激和终末器官损害仍有待于进一步研究。目的:评估决明子水提物对N-硝基-L-精氨酸甲酯诱导的高血压大鼠的降压功效。方法:灌胃N-硝基-L-精氨酸甲酯构建高血压大鼠模型,然后给予决明子水提物[500 mg/(kg·d)]治疗,均连续灌胃4周,1次/d。每周测量1次血压、心率。最后一次灌胃给药24 h后,检测血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶、尿素、血肌酐、脂质谱以及肝脏和肾脏中丙二醛、一氧化氮、还原型谷胱甘肽水平、血管紧张素转化酶活性。通过免疫组化和实时定量PCR分析大鼠肾脏组织中内皮型一氧化氮合酶、诱导型一氧化氮合酶蛋白及基因表达。结果与结论:与高血压模型组相比,决明子水提物治疗4周有效降低了高血压大鼠的平均动脉压、舒张压、收缩压(P<0.05),并改善肝脏和肾脏标志物、脂质分布和氧化状态。此外,决明子水提物显著降低了高血压大鼠肝脏和肾脏中血管紧张素转化酶活性(P<0.05)。在决明子水提物处理的大鼠肾脏中,内皮型一氧化氮合酶的基因和蛋白表达均显著高于高血压模型组。以上结果表明,决明子水提物显示出相当大的降压潜力,其降压机制包括上调内皮型一氧化氮合酶表达、抗氧化和血管紧张素转化酶抑制作用。

N-硝基-L-精氨酸甲酯对大鼠隐睾生精细胞凋亡的影响

目的 :研究N 硝基 L 精氨酸甲酯 (L NAME)对实验性大鼠隐睾生精细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 :手术建立大鼠单侧隐睾模型 ,术后分别注射L NAME及生理盐水 ,7d后采用流式细胞术检测 2组大鼠隐睾生精细胞凋亡 ,免疫组化法检测隐睾内Bcl 2和Bax基因表达变化。结果 :实验组隐睾重量较对侧正常睾丸重量减轻的程度低于对照组 ,生精细胞凋亡百分比及Bax表达较对照组低 ,而Bcl 2表达较对照组高。结论 :L NAME可通过调控Bcl 2和Bax的表达抑制隐睾导致的生精细胞凋亡。

N-硝基-L-精氨酸甲酯对大鼠实验性隐睾生精细胞凋亡及Bax表达的影响

目的研究N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对大鼠实验性隐睾生精细胞凋亡及凋亡相关基因Bax表达的影响。方法手术建立大鼠单侧隐睾模型,实验分为隐睾组、隐睾+L-NAME组[术后腹腔注射溶于生理盐水的L-NAME 50 mg/(kg.d)]、隐睾+生理盐水组、假手术组,7 d后采用化学比色法检测睾丸组织NOS活性,流式细胞术(FCM)和原位缺口末端标记法(TUNEL)检测生精细胞凋亡,RT-PCR和免疫组织化学法检测Bax基因表达变化。结果隐睾组和隐睾+生理盐水组之间检测指标无明显差异;隐睾+L-NAME组隐睾凋亡细胞百分比和生精细胞凋亡指数均低于隐睾组及隐睾+生理盐水组,高于假手术组(P<0.05);Bax mRNA和蛋白表达水平隐睾组及隐睾+生理盐水组最高,假手术组次之,隐睾+L-NAME组最低。结论隐睾生精细胞Bax表达增加,L-NAME可通过下调Bax的表达抑制隐睾生精细胞凋亡。

N-硝基-L-精氨酸甲基酯对阿霉素致大鼠心肌损伤的影响

目的研究一氧化氮合酶抑制剂N鄄硝基鄄L鄄精氨酸甲基酯(L鄄NAME)对阿霉素(ADM)致大鼠心肌损伤的保护作用。方法85只雄性Wistar大鼠,随机分为ADM组、ADM+L鄄NAME组及对照组。实验第30天,光镜下观察心肌形态结构病理改变;测定血清及心肌组织中的脂质过氧化物(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)活性;测定心肌组织中的一氧化氮(NO)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的活性。结果光镜下ADM + L鄄NAME组大鼠心肌病理损害程度较ADM组轻,ADM + L鄄NAME和ADM两组心肌坏死灶的检出率分别为16.7%和43.3%,二者比较差异显著意义(P< 0.05)。与ADM组比较,ADM + L鄄NAME组血清、心肌组织中的MDA显著降低,而SOD活性显著增加;与对照组比较,ADM组心肌中NO和iNOS的活性均显著升高。结论L鄄NAME对ADM致大鼠心肌损伤有保护作用,其机理可能与抑制iNOS活性使心肌组织NO减少有关。

N-硝基-L-精氨酸甲酯对兔主动脉舒张反应的影响

目的 :探讨N -硝基 -L -精氨酸甲酯 (L -NAME)对兔主动脉舒张反应的影响。方法 :30只大白兔随机均分为正常对照组 (N) ,高脂对照组 (H)与实验组 (E)。N组饲普通饲料 ,H组、E组饲胆固醇饲料 ,E组饲胆固醇饲料并加用L -NAME。实验 8周后 ,检测各组兔主动脉环对Ach的舒张度。结果 :与N组相比 ,H、E组对Ach的舒张度均明显降低 (P <0 .0 5 ) ,E组明显低于H组 (P <0 .0 5 ) ,E组主动脉舒张反应性明显低于其他 2组 (P <0 .0 5 )。结论 :高脂饮食可降低兔主动脉对Ach的舒张反应 ,加用L -NAME后 ,兔主动脉对Ach的舒张反应性更低 ,推测为L

N-亚硝基-L-精氨酸对兔局灶性脑缺血脑细胞线粒体钙、镁离子的影响

目的 探讨一氧化氮合成酶抑制剂对兔局灶性脑缺血脑细胞线粒体钙、镁离子的影响。方法 分别于兔局灶脑缺血前、后应用一氧化氮合成酶抑制剂N 亚硝基 L 精氨酸 (L NNA) ,观察缺血 4h后脑细胞线粒体钙、镁离子的含量及脑组织含水率情况。结果 L NNA组与单纯缺血组相比 ,脑细胞线粒体中钙离子含量明显增加 ,而镁离子明显下降。结论 L NNA能增加脑细胞线粒体中钙离子的含量 。

N-硝基-L-精氨酸对吗啡依赖小鼠催促戒断反应的治疗作用及对吗啡耐受性的影响

目的 :研究一氧化氮合酶 (NOS)抑制剂N -硝基 -L -精氨酸 (LNNA)对吗啡依赖小鼠催促戒断反应的治疗作用。方法 :采用小鼠戒断模型 ,观察不同给药途径 (ip和ig) ,不同剂量的LNNA对吗啡依赖小鼠戒断综合症的治疗效果。结果 :NOS抑制剂LNNA可明显延长戒断小鼠跳跃潜伏期 ,减少小鼠的戒断跳跃反应次数 ,且抑制其腹泻症状。结论

N-硝基-L-精氨酸甲酯对隐睾下降固定术后生精细胞凋亡的影响

目的：探讨一氧化氮合酶（NOS）抑制剂N硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME）对隐睾下降固定术后生精细胞凋亡的影响。方法：将雄性SD大鼠建立单侧隐睾模型。术后12d将隐睾组大鼠随机分为隐睾组、隐睾固定组、隐睾固定＋生理盐水组、隐睾固定＋L-NAME组，建立隐睾下降固定模型。术后分别于腹腔内注射生理盐水或L-NAME。术后第12天于腹腔内给药后2h大鼠尾部采血，取血清测定NO含量及NOS活性。术后第24天脱颈椎处死大鼠，TUNEL原位末端标记法结合流式细胞术检测各组右侧睾丸生精细胞凋亡。结果：隐睾组血清中NO浓度、NOS活性以及生精细胞凋亡率最高，隐睾固定组则高于假手术组，隐睾固定＋L-NAME组凋亡率低于其他隐睾固定组。结论：L-NAME降低隐睾下降固定后NO的产生，减少生精细胞凋亡，提示NOS抑制剂能提高隐睾下降固定术后睾丸的生精能力。

N-硝基-L-精氨酸抑制大鼠吗啡身体依赖的强啡肽机制

目的 研究N 硝基 L 精氨酸 (NO2 Arg)在抑制吗啡身体依赖形成中的作用及探讨强啡肽在该过程中的可能作用。方法 采用剂量递增皮下注射吗啡法建立大鼠吗啡身体依赖模型 ;身体依赖程度采用皮下注射 5mg·kg-1 纳洛酮激发戒断症状并对大鼠 6 0min内可数和不可数的戒断症状评分的方法进行 ;采用放射免疫法分别测定大鼠脑各分区、垂体、脊髓和血浆内免疫活性强啡肽A(ir-Dyn)的含量。结果 NO2 Arg可剂量相关性地抑制吗啡身体依赖的形成 ,其中 5mg·kg-1 NO2 Arg可显著抑制吗啡依赖大鼠大多数戒断症状 ;NO2 Arg处理可显著升高吗啡依赖大鼠脊髓、纹状体、垂体及血浆内ir-Dyn的水平。该作用可被特异性κ -受体阻滞剂norbinaltorphimine (nor-BNI)所拮抗。结论 NO2 Arg剂量相关性地抑制吗啡身体依赖的形成 。

N-硝基-L-精氨酸甲酯对大鼠后肢动脉生成过程中eNOS、Ki67及CD11b表达的影响

目的：探讨大鼠后肢动脉生成过程中eNOS、Ki67和CD11b的表达及N-硝基-L-精氨酸甲酯（LNAME）对eNOS、Ki67、CD11b表达的影响。方法：18只健康SD大鼠，雌雄性各半，随机分为假手术组、模型组及LNAME组。模型组采用大鼠股动脉结扎诱导动脉生成动物模型；L-NAME组在建立动物模型的基础上，腹腔注射L-NAME干预；假手术组除不结扎股动脉外，其他步骤与模型组相同。采用免疫荧光组织化学显色法检测血管eNOS、Ki67、CD11b等蛋白的表达。结果：eNOS主要表达于血管内皮细胞，Ki67、CD11b可表达于血管壁各层，模型组eNOS、Ki67、CD11b免疫荧光强度较假手术组强，L-NAME组eNOS、Ki67、CD11b免疫荧光强度较模型组弱。结论：在大鼠后肢动脉生成过程中，eNOS、Ki67和CD11b蛋白在血管大量表达，L-NAME可下调eNOS的表达并抑制血管增殖及巨噬细胞的浸润。

N-硝基-L-精氨酸甲酯对实验性大鼠隐睾Bcl-2表达的影响

①目的研究一氧化氮合酶抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯对实验性大鼠隐睾生精细胞凋亡过程中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)表达的影响。②方法 42天龄雄性SD大鼠建立单侧隐睾模型,随机分为隐睾组、隐睾+L-NAME组、隐睾+生理盐水(溶媒)组、假手术组,每组12只大鼠,隐睾+L-NAME组和隐睾+生理盐水组大鼠术后分别腹腔内注射L-NAME或生理盐水,每天1次,定时定量(50mg/Kg),术后第7天分别采用RT-PCR和免疫组织化学方法检测各组隐睾Bcl-2mRNA和蛋白表达的变化。③结果与假手术组睾丸相比,隐睾组、隐睾+生理盐水组睾丸生精上皮和睾丸间质细胞内Bcl-2mRNA和蛋白表达降低,差异有显著性(P<0.05);而隐睾+L-NAME组Bcl-2 mRNA和蛋白与假手术组睾丸无明显差别。④结论 L-NAME可通过调节Bcl-2的表达抑制热应激导致的生精细胞凋亡。

N-硝基-L-精氨酸甲酯诱导的高血压大鼠胸主动脉血管紧张素转换酶2和血管紧张素转换酶的表达

目的通过观察高血压大鼠胸主动脉组织中血管紧张素转换酶(ACE)、ACE2活性及mRNA表达的改变,探讨ACE2及其与ACE相互平衡对高血压的调节作用。方法 40只血压正常且年龄匹配的SD大鼠分为模型组和对照组,每组20只。模型组大鼠每100 mL饮水中加入Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)50 mg,每日摄入L-NAME 50 mg/kg,制作高血压模型;按照L-NAME的摄入时间分为第2、4、8、12周4个亚组(n=5);对照组设立相同的亚组,于相应时间分别摄入相同体积的清水。采用总活性比色法检测胸主动脉ACE和ACE2活性;RT-PCR技术检测胸主动脉ACE和ACE2 mRNA的表达。结果模型组大鼠在服用L-NAME后第4、8、12周,血压均较相应对照组显著升高(P<0.05);而对照组各亚组入组前后血压差异无统计学意义(P>0.05)。服用L-NAME后第4、8、12周,模型组大鼠的胸主动脉组织ACE活性和mRNA相对表达量均较相应对照组显著升高(P<0.05),ACE2活性及其mRNA相对表达量均较对照组显著降低(P<0.05);对照组各亚组间ACE、ACE2活性和mRNA相对表达量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论通过抑制NO合成所导致的高血压的发病过程中,胸主动脉组织ACE2、ACE的mRNA表达及活性与血压升高有关。

N-硝基-L-精氨酸甲酯对大鼠精索静脉曲张生精细胞的保护作用

目的探讨一氧化氮合酶(NOS)抑制剂N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对大鼠精索静脉曲张生精细胞的保护作用。方法(45±5)天的SD雄性大鼠复制左侧精索静脉曲张模型。假手术组、手术组、手术+L-NAME组术后8周起腹腔注射L-NAME,剂量:50mg/(kg.d),每组10只大鼠。术后10周用流式细胞仪检测睾丸生精细胞凋亡,分光光度法检测Caspase-3活性,用硝酸还原酶法测定睾丸组织一氧化氮(NO)含量和NOS活性。结果与假手术组相比,精索静脉曲张组发生凋亡的生精细胞数显著增加,Caspase-3活性升高。与精索静脉曲张组相比,本实验精索静脉曲张手术+L-NAME组生精细胞凋亡率下降,Caspase-3活性降低,睾丸组织中NO含量及NOS活性与显著降低。结论精索静脉曲张睾丸组织中NO含量升高导致Caspase-3活性升高可能是精索静脉曲张生精细胞凋亡增加的机制之一。L-NAME通过抑制NOS活性,减少NO产生来降低睾丸组织生精细胞的凋亡,发挥其保护作用。

日粮中添加N-氨甲酰-L-谷氨酸及精氨酸对断奶小鼠生长性能的影响

目的:研究日粮中添加N-氨甲酰-L-谷氨酸(NCG)及精氨酸(Arg)对断奶小鼠生长性能的影响。方法:首先通过在日粮中添加0.025%、0.05%、0.1%的NCG,研究NCG对断奶小鼠生长性能的影响。在此基础上,选择同时添加0.05%的NCG和3个水平(0.025%、0.05%、0.1%)的Arg,研究NCG与Arg联合作用对断奶小鼠生长性能的影响。结果:日粮中添加0.1%的NCG,断奶小鼠平均日增质量较对照组提高了12.40%,饲料与体质量比与对照组相比下降了14.65%;同时添加0.05%的NCG和0.025%的Arg,断奶小鼠平均日增质量提高了10.53%。结论:日粮中添加0.1%的NCG能显著提高断奶小鼠生长性能;日粮中同时添加0.05%的NCG和0.025%的Arg,断奶小鼠生长性能也得到显著提高,其提高生长性能的效果与添加0.1%剂量的NCG达到相同水平。

Ν-硝基-L-精氨酸甲酯对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的保护作用

目的 :探讨一氧化氮合酶 (NOS)抑制剂N 硝基 L 精氨酸甲酯 (L NAME)对大鼠隐睾生殖细胞凋亡的保护作用。 方法 :用 2 2dSD雄性大鼠复制单侧隐睾模型。实验分假手术组、隐睾组、隐睾 +L NAME组 [术后腹腔注射L NAME ,10mg/(kg·d) ],每组大鼠各 10只。术后 7d ,用生物素 dUTP/酶标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡 ,用硝酸还原酶法测定睾丸组织中N0含量 ,用化学比色法测定睾丸组织中NOS活性。 结果 :术后第 7d ,与假手术组睾丸相比 ,隐睾组睾丸发生凋亡的生殖细胞数显著增加 ,隐睾 +L NAME组睾丸发生凋亡的生殖细胞数比隐睾组显著减少 (P <0 .0 1) ,隐睾 +L NAME组睾丸组织中NO含量及NOS活性与隐睾组相比显著降低 (P<0 .0 1)。 结论 :隐睾组织中NO和NOS升高是隐睾生殖细胞凋亡增加的病理机制之一 ,L NAME通过抑制NOS活性、减少NO的产生来降低睾丸组织生殖细胞的凋亡发挥其保护作用。

N_ω-硝基-L-精氨酸和谷氨酸单氨钠对高血压大鼠血浆血管紧张素II的影响

目的:观察长期使用L-精氨酸(L-NNA)和谷氨酸单氨钠(MSG)后高血压大鼠血浆血管紧张素II(angiotensinII,ANGII)的变化。方法:建模后每日腹腔注射L-NNA和MSG,于7、30、70d用放免法测定大鼠血浆ANGII的质量浓度。结果:(1)高血压组各时期的血压均明显高于对照组(P<0 05);注射L-NNA组的血压在7d与高血压组无明显差异,但30、70d显著增高(P<0 05);注射MSG组的血压显著低于高血压组和注射L-NNA组,但仍未恢复至正常水平。(2)对照组大鼠各时期血浆ANGII的质量浓度介于(162 6±49 1)与(181 5±37 8)μg/L之间,高血压组大鼠血浆ANGII的质量浓度均高于对照组,7d时无差异,但30、70d差异显著(P<0 05);注射L-NNA后,ANGII的质量浓度升高明显,其中30、70d具有显著差异(P<0 05),而注射MSG组大鼠血浆ANGII的质量浓度明显降低(P<0 05),但仍然高于对照组和高血压组(P<0 05)。结论:一氧化氮可有效的减少外周组织ANG的分泌,其降压作用可能通过有效的降低血液中ANG的质量浓度来实现。

N_ω-硝基-L-精氨酸和谷氨酸单氨钠对高血压大鼠心率、血压及脑卒中的影响

目的:观察长期使用Nω-硝基-L-精氨酸(L-NNA)和谷氨酸单氨钠(MSG)后高血压大鼠心率、血压的变化,以及脑卒中发生的情况。方法:每日给SD大鼠腹腔注射L-NNA和MSG,于7、30和70d测心率、血压,观察脑卒中情况。结果:(1)高血压对照组心率30、70d较正常对照组增快(P<0 05);注射L-NNA组较正常对照组增快,但仅在30、70d高于高血压对照组(P<0 05);注射MSG组心率30、70d较高血压对照组和注射L-NNA组减慢,但未恢复至正常对照组水平(P<0 05)。(2)高血压对照组各时期的血压均较正常对照组明显增高(P<0 05);注射L-NNA组的血压在7d较高血压对照组升高不明显,但30、70d增高显著(P<0 05);注射MSG组的血压较高血压对照组和注射L-NNA组明显下降,但仍未恢复至正常水平。(3)高血压对照组在70d均出现程度不等的脑卒中症状,有20%由于脑卒中死亡。注射L-NNA组从30d开始即出现不同程度的脑卒中症状,有33%由于脑卒中死亡。注射MSG组在实验的全程中均未出现脑卒中症状。结论:NO生成减少不仅影响大鼠心率,还参与高血压发生、发展,并可能与高血压晚期发生脑卒中有关。

NG-硝基-L-精氨酸对脂多糖诱导大鼠肺损伤炎症反应和核因子-κB信号通路的影响

目的 观察非选择性一氧化氮合酶（NOS）抑制剂NG-硝基-L-精氨酸（NG-nitro-L-arginine, L-NA）对脂多糖诱导大鼠肺损伤炎症反应和核因子-κB（NF-κB）信号通路的影响.探讨L-NA对肺组织损伤的保护作用及其机制.方法 健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组（LPS组）和L-NA治疗组（L-NA组）.模型组和L-NA组静脉注射脂多糖（LPS）5 mg/kg复制内毒素性肺损伤模型,3 h和6 h后腹腔注射L-NA（L-NA组）和生理盐水（对照组及LPS组）,治疗3 h.免疫组化染色分析肺组织中核因子-κB（NF-κB）的核移位和肺组织细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达;放射免疫法分别测定肺组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）的含量;光镜、电镜观察肺组织病理变化.结果 与对照组比较,大鼠肺损伤后NF-κB活化,明显从细胞浆移位于细胞核,表达量也显著增加;ICAM-1蛋白表达上调;肺组织中TNF-α、IL-6含量明显升高.肺损伤3 h用L-NA治疗3 h后, NF-κB从细胞浆向细胞核的移位被明显限制,NF-κB的表达量、肺组织中ICAM-1的表达明显低于相应的LPS组,肺组织病理改变减轻;但TNF-α、IL-6含量没有明显的变化,肺损伤6 h用L-NA治疗3 h对LPS引起的ICAM-1的表达和TNF-α、IL-6含量变化没有明显影响.结论 肺损伤3 h后给予L-NA可减轻内毒素性肺损伤、抑制核因子的活化,在一定程度上阻断NF-κB相关信号通路的传导是其机制之一.