N-乙酰化壳聚糖的FTIR和XRD研究

壳聚糖分子的脱乙酰度(DD)是影响壳聚糖性质的主要因素之一。文章通过壳聚糖的N-乙酰化反应制备了不同脱乙酰度的壳聚糖。采用傅里叶变换红外光谱(FTIR)和X射线衍射(XRD)分别研究了由N-乙酰化反应得到的不同脱乙酰度的壳聚糖的红外光谱特性和晶体结构,并由此分别计算确定了样品的脱乙酰度和结晶度,探讨了N-乙酰化程度对壳聚糖脱乙酰度以及结晶度的影响。由FTIR可知,随N-乙酰程度的增加,壳聚糖分子中剩余氨基的反应速度变慢。另外XRD也表明,伴随N-乙酰反应,壳聚糖分子的结晶区被破坏,规整度下降,并逐渐形成新的结晶区。

N-乙酰化壳聚糖膜的制备和性质研究

以乙酸和甲醇为介质 ,利用壳聚糖和乙酸酐制备出N 乙酰化壳聚糖膜。对膜的亲水性、吸水性、结晶性、透光性、渗透性以及对血清蛋白的吸附性和与兔角膜上皮细胞的生物相容性进行了研究。结果表明N 乙酰化壳聚糖膜有一定的亲水性、吸水性、结晶性 ,有很好的透光性和渗透性 ,对血清蛋白有一定的吸附能力 ,以该膜为载体培养兔角膜上皮细胞实验结果表明膜与兔角膜上皮细胞具有很好的生物相容性。

一步等位基因特异扩增法检测中国人N-乙酰化酶基因型

目的建立简化的一步等位基因特异扩增法(ASA),研究中国人N-乙酰化酶(NAT2)多态性等位基因的分布。方法用一步法直接检测215名中国健康人NAT2 *5,*6,*7等位基因。结果一步法测定结果与两步法一致。215名健康中国人NAT2 *5,*6,*7 3种突变型等位基因的基因频率分别为3.3％,24.6％和10.0％。基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。野生型纯合子、杂合子和突变型纯合子分别为85,96和34人,分别占39.5％,44.7％和15.8％。结论一步法测定NAT2基因准确、方便,为临床个体化合理用药提供理论基础。

咖啡因代谢物AFMU,1X的测定及其在N-乙酰化分型中的应用

目的：建立一套测定咖啡因的２种主要代谢物ＡＦＭＵ和１Ｘ的高效液相色谱（ＨＰＬＣ）方法。方法：选用岛津ＳｈｉｍＰａｃｋＣＬＣＯＤＳ柱，流动相为甲醇乙腈水醋酸（１２∶１．５∶８６．４５∶０．０５）。对１２０名健康志愿者服用咖啡５ｇ后４ｈ～５ｈ尿样进行测定，以ＡＦＭＵ与１Ｘ摩尔比作为代谢指标，并作频谱显示。结果：受试者可明显划分为快乙酰化者和慢乙酰化者，快、慢乙酰化表型之比１０１∶１９。结论：咖啡因ＨＰＬＣ方法的建立及在Ｎ乙酰化分型中的成功应用。

N-乙酰化酶2基因型对中国肺结核患者异烟肼代谢的影响

目的研究N-乙酰化酶2(NAT2)基因型对中国肺结核患者异烟肼(INH)代谢的影响。方法采用反向点交法(RDB)检测中国肺结核患者NAT2基因型;柱前衍生化高效液相色谱法检测服药2 h后血浆中INH及其代谢物乙酰化INH(Ac- INH)浓度。结果46例患者基因型包括野生型wt/wt(n=17)、杂合子m/wt(n=22)、突变型纯合子m/m(n=7)。血浆INH及AcINH浓度分别为(12.74±10.51)和(12.49±9.61)μmol·L^(-1)。3个基因组INH、AcINH浓度比为1:1.37:1.77和1:0.77:0.75;3组AcINH与INH比值(R_(A/I))为1:0.52:0.40(P<0.01)。结论不同NAT2基因型的结核患者对INH代谢能力差异显著,存在基因剂量现象。NAT2基因分型对结核患者合理用药具有重要意义。

离子液体中均相合成N-乙酰化壳聚糖及其性能研究

合成了对壳聚糖溶解效果好、可重复使用的离子液体氯化2-氨基乙酸[Gly]Cl,用1H NMR和FT-IR对其结构进行了确定。在制得的离子液体水溶液中,制备了水溶性N-乙酰化壳聚糖。用XRD和FT-IR对产物进行了结构表征。通过单因素实验得到了较佳反应条件:n(乙酸酐)∶n(壳聚糖)=2.75∶1,反应温度60℃,反应时间5 h。并对产物的吸湿保湿性能进行初步研究,结果表明,产物具有良好的吸湿保温性能。还考察了离子液体的重复使用性能,重复使用3次后,N-乙酰化壳聚糖的取代度仍大于89%。

N-乙酰化壳聚糖膜的制备及其结构与性能表征

利用L-S(液-固)相转换法制备壳聚糖膜,并对其进行N-乙酰化,采用扫描电镜(SEM)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)和X射线衍射(XRD),研究了N-乙酰化壳聚糖膜的微观形貌、微观结构以及晶体结构特征,并测试了其厚度、溶胀性能等物理指标.结果表明:壳聚糖膜经N-乙酰化后,部分壳聚糖大分子被接枝上乙酰胺基团,膜的结晶度提高,但大分子中吸水性基团减少,膜溶胀度降低.

等位基因特异PCR检测N-乙酰化转移酶遗传多态性研究

目的与方法 :改良一种适用于流行病学研究的N 乙酰化转移酶 (NAT2 )基因型的等位基因特异PCR(AS PCR)检测方法 ,分析了 3个NAT2基因突变点 :481T、5 90A、85 7A ,并用此法对 76例南京地区健康人群的NAT2基因型多态性进行了研究。从而也检验了该方法。结果 :该人群中各基因频率 :Wt(野生型 )为 0 .5 72 3:481T为 0 .0 395 ;5 90A为 0 .2 36 8;85 7A为 0 .15 13。与白种人比较差异有显著性 ,而与文献报道的亚州人群频率分布特征基本一致。结论 :南京地区健康人群中与快反应相关的NAT2基因型占多数 (82 .9% ) ;本文改良的AS PCR检测方法经验证为NAT2基因多态性研究的有效实验手段。

反向点杂交法检测中国人N-乙酰化酶基因型

目的 建立快速方便的反向点杂交法 (RDB)检测中国人N 乙酰化酶 (NAT2 )基因型。方法 采用PCR法扩增生物素标记的DNA片段 ,与固定在尼龙膜上的等位基因特异性寡核苷酸探针进行杂交 ,通过非同位素法显色检测杂交结果 ,分析NAT2 5种主要突变位点。用本法对 4 8名肺结核患者NAT2基因型进行了分析。结果 RDB法与等位基因特异扩增法结果完全一致。 4 8名肺结核患者NAT2 5、 6、 73种突变型等位基因的基因频率分别为 1 0 4 %、2 2 9%和 15 6 %。野生型纯合子、杂合子和突变型纯合子分别为 33 3%、5 4 2 %和 12 5 %。结论 RDB法检测NAT2基因型准确、方便 ,适用于指导临床合理用药。

人类N-乙酰化酶2蛋白质分子的计算机三维模拟

目的:对人类N-乙酰化酶2(NAT2)蛋白质分子进行计算机三维模拟。方法:将下载的蛋白质序列结合计算机三维模拟技术对NAT2进行三维模拟,并对其进行物理、化学、生物学等特征分析,初步判断蛋白质分子的部分化学和物理学性质,对其某些功能作出预测。结果:利用蛋白质序列分析软件包ANTHEPORT5.0模拟出NAT2可能的结构;预测到NAT2的蛋白等电点(pH i)=5.495,相对分子质量=33 544以及NAT2的滴定曲线和物理化学特征性曲线;对NAT2第282个氨基酸位点附近的片段绘制出HelicalW heel图。结论:能利用计算机模拟出NAT2的可能结构,并可作出一定的分析和预测,此种方法可用于NAT2基因多态性的分析。

N-乙酰化反应制备水溶性壳聚糖研究

将高度脱乙酰化的壳聚糖在均相介质中进行N-乙酰化反应,制备水溶性壳聚糖。研究了制备工艺条件对脱乙酰度及水溶性的影响。结果表明,在乙酸—乙醇均相体系中进行乙酰化反应时,壳聚糖与乙酸酐的质量比为1∶0.6,反应温度控制在20℃,反应时间为8 h时,产品的脱乙酰度在50%左右,获得了水溶性良好的N-乙酰化壳聚糖。

N-乙酰化制备水溶性壳聚糖研究

以高脱乙酰度壳聚糖为原料,在不使用吡啶的无水乙醇均相体系中用乙酸酐通过N-乙酰化制备了水溶性壳聚糖,采用酸碱滴定、XRD、IR对壳聚糖原料和所制得水溶性壳聚糖的脱乙酰度、结晶状态、红外光谱分别进行了测试分析,并探讨了水溶性壳聚糖的结构与水溶性机理。

120名中国人磺胺二甲嘧啶N-乙酰化表型分析

目的：对１２０名健康志愿者进行了Ｎ乙酰化表型分析。方法：以磺胺二甲嘧啶（ＳＭ２）为探针药物，用ＨＰＬＣ测得受试者３ｈ尿样，６ｈ后尿样及血样中ＳＭ２及乙酰化磺胺二甲嘧啶（ＡｃＳＭ２），以ＡｃＳＭ２摩尔百分数（ＡｃＳＭ２％）为分型指标。结果：作频数图后，受试者均呈明显两态分布，３种样品中ＡｃＳＭ２％值小于７２％，８５％，５０％者被分为慢代谢者，１２０名受试者中慢代谢者分别为２２，２０，２１人，对３种样品的相关分析表明方法之间相关性达０．９以上。结论：经综合分析，２０名受试者可明确划分出慢代谢者，占１６．６％。此研究结果将为进一步探讨应用咖啡因作为探针药物以及进一步的基因分析打下了一定基础，同时也有助于进一步明确中国人Ｎ乙酰化分型的情况。

汉族儿童N-乙酰化代谢表型分布及其与21-三体综合征和假肥大性肌营养不良症相关性研究(英文)

目的 以咖啡因为代谢探针，研究汉族儿童Ｎ－乙酰化代谢表型分布规律及其与２１－三体综合征（ＤＳ）和假肥大性肌营养不良症（ＤＭＤ）相关性。方法 根据参试者尿中咖啡因代谢物５－乙酰氨基－６－甲酰氨基－３－甲基尿嘧啶（ＡＦＭＵ）和甲磺嘌呤（１Ｘ）峰高比的对数值（１ｇＡＦＭＵ／１Ｘ）绘制频率分布直方图，寻找区分快、慢乙酰化代谢表型的截点，确定患儿和健康儿童的Ｎ－乙酰化代谢表型分布。结果 正常儿童乙酰化代谢表型分布直方图呈双态性，截点明显，为 ０．２５（ｌｇＡＦＭＵ／１Ｘ），慢乙酰化代谢表型个体为１６．９％，而 ＤＳ和ＤＭＤ患儿则分别为４１．９％和５０％（ｘ２分别为８．２８７和１１．３８７，Ｐ＜０．０５）。男、女和＞６岁与≤６岁儿童快、慢乙酰化代谢表型分布差异无显著性。结论 汉族儿童乙酰化代谢表型分布呈多态性，与成人相似。年龄和性别对结果无显著影响。

咖啡因探针法测定正常人肝脏N-乙酰化转移酶活性

目的建立一套测定咖啡因的3种主要代谢物5乙酰氨基6甲酰氨基3甲基尿酸(AFMU)、1甲基黄嘌呤(1X)和1甲基尿酸(1U)的高效液相色谱法,探讨咖啡因代谢物在N乙酰化酶活性评价中的意义。方法采用反相高效液相梯度洗脱法测定尿液内咖啡因代谢产物AFMU、1U和1X的相对含量,计算AFMU/(AFMU+1X+1U)比值,绘制概率分布直方图,确定正常人快、慢乙酰化代谢表型的截点(临界点)。结果受试者可明显划分为快乙酰化者和慢乙酰化者,快、慢乙酰化代谢表型的临界点为0.26,快、慢乙酰化表型之比73∶17。结论本方法简便、准确、快速,适合于尿中咖啡因代谢物的测定及N乙酰化转移酶活性的研究。

N-乙酰化转移酶1基因分型及其与炎症性肠病相关性研究

目的:探讨药物代谢酶N-乙酰化转移酶1(NAT1)基因多态性在中国人群中的分布及其与炎症性肠病(IBD)的相关性。方法:应用PCR-RFLP和AS-PCR技术检测中国湖北地区无血缘关系的IBD患者105例,其中溃疡性结肠炎组(UC组)87例与克罗恩病组(CD组)18例,和正常对照120例的NAT1基因多态性。结果:IBD组中,NAT1*3,NAT1*4,NAT1*10和NAT1*11等位基因频率分别是20.48%,50.00%,21.90%和7.62%,与正常对照组比较无显著差异。CD组NAT1*10等位基因频率略高于UC组(25.00%比21.26%),但差异无显著性(P>0.05);将NAT1基因型分为快代谢和慢代谢乙酰化基因型,与正常对照组比较亦无显著差异。UC组快代谢基因型(NAT1*10纯合子)与CD组相比有增高趋势(16.67%比12.64%),但差异无显著性(P>0.05)。结论:NAT1基因多态性与炎症性肠病不存在关联。

芳胺和脂环仲胺的N-乙酰化

芳胺和脂环仲胺与乙酸铵在乙酸中回流反应，得到N-乙酰化产物。18例收率中至优。邻氯（硝基）苯胺不反应。其它吸电子基团取代的苯胺乙酰化收率降低。

N-乙酰化转移酶基因多态与肝癌遗传易感性的研究

为探讨Ｎ－乙酰化转移酶（ＮＡＴ）基因多态与肝癌遗传易感性的关系，应用ＰＣＲ、ＡＳＰＣＲ和ＲＦＬＰ，对６５例肝癌患者和１０６例健康对照进行了研究。结果表明，病例组慢型基因频率为７０．７７％，对照组为５２．８３％，两者差异显著（Ｐ＝０．００１）。ＯＲ值为２．１６，ＥＦ值为０．３８０１。提示携带慢型基因者患肝癌的危险性增加１．１６倍，由慢型基因所致的肝癌病例占人群中全部肝癌病例的３８．０１％。病例组基因型Ｆ１／Ｆ１、Ｆ１／Ｓ和Ｓ／Ｓ的频率分别为９．２３％、４０．００％和５０．７７％，对照组则分别为２２．６４％、４９．０６％和２８．３０％，两者差异显著（Ｐ＝０．００５６）。ＯＲ值分别为１．００、２．００和４．４０，存在剂量反应关系。发现４个新的慢型基因亚型，其点突变组合为３４１／５９０、５９０／８０３、２８２／３４１／５９０、２８２／３４１，将其暂命名为Ｓ９，Ｓ１０，Ｓ１１和Ｓ１２。