鱼腥藻N-乙酰-D-葡萄糖胺2-差向异构酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达

目的从鱼腥藻7120(Anabaenasp.PCC 7120)中克隆N-乙酰-D-葡萄糖胺2-差向异构酶(N-acyl--Dglucosamine 2-epimerase,AGE)基因,并在大肠杆菌中表达。方法利用PCR技术从鱼腥藻染色体组扩增AGE基因,通过基因工程方法构建表达质粒pLY-11,在大肠杆菌中表达,并利用Ni-NTA柱分离纯化。利用柱前衍生化的方法,通过HPLC检测表达产物转化N-乙酰-D-甘露糖胺(N-acyl-D-mannosamine,ManNAc)的活性,并联合N-乙酰神经氨酸裂合酶(N-acetylneuraminatelyases,NAL),进行双酶转化生成N-乙酰神经氨酸(N-acetylneuraminic acid,Neu5Ac)实验。结果AGE基因在大肠杆菌中表达,可溶性产物蛋白占总可溶性蛋白质量的18%,经纯化后得到1.6 g.L-1产物蛋白。双酶转化实验中,转化终产物Neu5Ac质量浓度为14.8 g.L-1。结论鱼腥藻7120 AGE基因在大肠杆菌中的表达产物具有活性,为双酶转化制备Neu5Ac进行了初步的探索。

N-乙酰-D-葡萄糖胺-2-差向异构酶基因的克隆及表达

N-乙酰-D-葡萄糖胺-2-差向异构酶(AGE)是合成N-乙酰-D-神经氨酸(Neu5Ac)的关键酶。该酶的高效表达是提高全细胞细胞催化法合成Neu5Ac的有效途径。根据集胞藻(Synechocystis sp. PCC 6803)AGE编码基因slr1975序列信息和大肠杆菌密码子偏好性,优化密码子并人工合成目的基因序列slr975-co。将该基因克隆到表达载体pET28a中,构建了重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET28-slr并实现了目的基因的诱导表达。SDS-PAGE分析表明,重组蛋白质的相对分子质量在43 000左右,与预期大小一致,纯化产物蛋白质质量浓度约为1.7 g/L。重组AGE的最适反应温度为42℃,最适反应pH为6.0。AGE对GlcNAc、ManNAc的Km值分别为39.0、46.5 mmol/L。以分别表达AGE和N-乙酰神经氨酸裂合酶(NanA)的重组大肠杆菌作为催化剂,以N-乙酰-D-葡萄糖胺为底物,实现了N-乙酰-D-神经氨酸的全细胞催化合成。结果表明,对AGE密码子进行优化实现了该基因在大肠杆菌中的高效表达,为全细胞催化法高效合成N-乙酰-D-神经氨酸奠定了坚实的基础。

N-乙酰-D-葡萄糖胺-2-差向异构酶基因的克隆、表达及产物纯化

目的:从猪肾中提取RNA,从中克隆出N-乙酰-D-葡萄糖胺-2-差向异构酶(GNE)基因,并在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中表达。方法:从猪肾中提取总RNA,通过RT-PCR克隆出GNE基因,经测序,感受态大肠杆菌E.coli DH5a转化,质粒抽提,鉴定以及大肠杆菌BL21(DE3)转化表达,通过His-tag亲和纯化(Ni Sepharose 6 Fast Flow),G-25柱脱盐,SDS-PAGE电泳检测。结果:RNA提取物经紫外分光光度计检测OD260/OD280=1.77,说明无明显的蛋白质和酚污染。RT-PCR扩增目的片段,测序证明该基因的ORF为1 206 bp,编码402个氨基酸组成的酶蛋白(GNE)。SDS-PAGE显示,纯化蛋白为45 kD的单一条带,与基因序列推测值一致。结论:GNE基因已被成功地克隆和表达。

Zn^(2+)对棉铃虫N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力与性质的影响

以棉铃虫蛹为材料,经分离纯化获得棉铃虫N乙酰βD氨基葡萄糖苷酶制剂;研究了Zn2+对棉铃虫N乙酰βD氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.14)活力与性质的影响.结果表明,Zn2+对酶活力有抑制作用,酶活力丧失一半的Zn2+浓度(IC50)为1.3mmol/L.进一步研究Zn2+的抑制作用动力学,发现Zn2+对该酶的抑制作用是一种可逆过程,抑制机理表现为竞争型,抑制常数KI为1.158mmol/L.Zn2+不会影响酶的酸碱稳定性,但有Zn2+存在时,在30～40范围内,酶是稳定的,温度高于50℃后,随着Zn2+浓度的增加,酶的温度稳定性也相对增加.

肝硬化患者血清胆碱酯酶、β_2-微球蛋白和N-乙酰-D-氨基葡萄糖苷酶测定的临床分析

目的探讨肝硬化病人血清胆碱酯酶(CHE)、β2-微球蛋白(β2-MG)和N-乙酰-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG-ase)水平与肝硬化肝组织损害程度之间的关系。方法测定90例肝硬化病人和32例健康人的CHE,β2-MG,NAG-ase,并按Child-Puge分级进行比较。结果肝硬化组CHE活性比正常对照组显著降低,按Child-Puge分级,CHE活性与不同组之间差异均有非常显著性统计学意义(P<0.01)。肝硬化组β2-MG比正常对照组显著升高,按Child-Puge分级,β2-MG与不同组之间差异均有非常显著性统计学意义(P<0.01)。肝硬化组NAG-ase比正常对照组显著升高,按Child-Puge分级,NAG-ase与不同组之间差异均有非常显著性统计学意义(P<0.01)。CHE与β2-MG高度负相关(r=-0.892 1),β2-MG与NAG-ase高度正相关(r=0.901 5)。结论血清CHE,β2-MG,NAG-ase可作为判断肝硬化病人肝损害程度的有效指标,对病情的诊断和预后判断有重要的指导意义。

金黄色葡萄球菌N-乙酰甘露糖胺-6-磷酸2-异构酶基因的克隆与表达

目的对金黄色葡萄球菌N-乙酰甘露糖胺-6-磷酸2-异构酶基因(APE)进行克隆、鉴定与表达,为新型抗菌药物的设计提供参考依据。方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增APE基因,将扩增产物酶切后与原核表达载体pET-32a(+)连接,构建表达APE的重组质粒,将重组质粒先转化大肠杆菌TG1内并提取质粒,经PCR、双酶切鉴定后再转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3),对转化菌株进行诱导后进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果构建了表达载体pET-32a(+)-APE,在37℃经异丙基-β-D硫代半乳糖苷诱导时获得表达,表达的蛋白质相对分子质量为45.2×10~3。结论 APE基因成功克隆到表达质粒内并获得了表达。

以2-甲氧基-4-(2′-硝基乙烯基)酚-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷为底物测定尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活性

目的评价以2-甲氧基-4-(2′-硝基乙烯基)酚-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(MNP-NAG)为底物的全液体试剂两点终点法测定尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性。方法尿样中NAG作用于底物MNP-NAG水解产生游离MNP,其生成速率与酶活性在一定范围内成正比。结果该法显色最大吸收波长为505nm,试剂1和试剂2最适pH值分别为4.6和10.2,最适底物浓度为16mmol/L,线性范围达198U/L,批内变异系数(CV)和批间CV分别为2.2%和3.8%。166例健康体检者尿样NAG活性参考范围为:(6.21±4.53)U/gCr(x-±1.96s)。结论MNP-NAG底物法测定尿NAG灵敏度高,操作简便,结果可靠,适合临床应用。

血清胱抑素C、β_2-微球蛋白、视黄醇结合蛋白、尿微量白蛋白及N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶在诊断糖尿病早期肾损伤中的临床意义

目的探究血清胱抑素C(Cys C)、β_2-微球蛋白(β_2-MG)、视黄醇结合蛋白(RBP)、尿微量白蛋白(MA)及N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)在诊断糖尿病早期肾损伤中的临床意义。方法选取2015年10月至2016年10月在濮阳市第三人民医院住院的86例糖尿病患者,根据是否伴有肾损伤将患者分为糖尿病肾损伤组和单纯糖尿病组,每组43例;另选取43例同期体检健康者为对照组。采用免疫散射比浊法检测尿MA及血清RBP、β_2-MG水平,比色法检测尿NAG水平,免疫透射比浊法检测血清Cys C水平。观察并比较3组受试者血清Cys C、β_2-MG、RBP及尿MA、NAG水平和阳性率。结果糖尿病肾损伤组患者血清Cys C、β_2-MG、RBP及尿MA、NAG阳性率分别为67.44%(29/43)、62.79%(27/43)、62.79%(27/43)、67.44%(29/43)、69.77%(30/43),均高于单纯糖尿病组患者的46.51%(20/43)、41.86%(18/43)、39.53%(17/43)、44.19%(19/43)、44.19%(19/43)和对照组的2.33%(1/43)、4.65%(2/43)、2.33%(1/43)、0.00%(0/43)、2.33%(1/43)(P<0.05),单纯糖尿病组患者血清Cys C、β_2-MG、RBP及尿MA、NAG阳性率亦显著高于对照组(P<0.05)。糖尿病肾损伤组患者血清Cys C、β_2-MG、RBP及尿MA、NAG水平均高于对照组和单纯糖尿病组,单纯糖尿病组患者各指标水平均高于对照组(P<0.05)。结论血清Cys C、β_2-MG、RBP及尿MA、NAG为糖尿病早期肾损伤的敏感指标,可通过检测上述指标对糖尿病肾损伤进行诊断并制定有针对性的干预方案。

Hg2+和Pb2+对中国鲎N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的影响

节肢动物蜕皮与N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.52,NAGase)密切相关。为了探究Hg^2+和Pb^2+这2种重金属离子对节肢动物NAGase的影响,以中国鲎(Tachypleus tridentatus)为材料,从其内脏分离提取了NAGase。利用酶促反应动力学方法,研究Hg^2+和Pb^2+对中国鲎NAGase的影响;通过对酶荧光发射光谱的测定,研究NAGase酶蛋白经Hg^2+和Pb^2+作用后的空间构象变化。结果表明,Hg^2+和Pb^2+对中国鲎NAGase均有较强的抑制作用,Hg^2+对NAGase的抑制作用强于Pb^2+,Hg^2+和Pb^2+对NAGase的抑制作用均表现为可逆过程,其中Hg^2+对NAGase的抑制属于竞争性抑制作用,抑制常数K I为22.68μmol·L^-1,Hg^2+只与游离酶结合,不与酶-底物络合物结合;而Pb^2+对NAGase的抑制是属于竞争性-非竞争性混合型抑制作用,抑制常数K I和K IS分别为19.13 mmol·L^-1和75.23 mmol·L^-1,Pb^2+与游离酶的亲和力相比与酶-底物络合物的亲和力更强。NAGase经Hg^2+和Pb^2+作用后荧光发射强度均降低,但荧光发射峰值并没有发生位移,说明Hg^2+和Pb^2+对中国鲎NAGase的抑制作用均为酶蛋白空间构象的变化所致。这证明了Hg^2+和Pb^2+对中国鲎NAGase活力具调控作用。

N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶新型底物的合成及在肾小管疾病诊断中的应用

目的优化N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)的新型底物6-甲基-2-吡啶基-1-硫-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(MPT-NAG)的合成方法,探讨其在肾小管疾病诊断中的应用价值。方法采用活泼中间物(1-氯-1-脱氧乙酰糖)与6-甲基-2-巯基吡啶成苷合成底物;以MPT-NAG为底物,采用全自动生化仪测定糖尿病肾病、肾病综合征、肾移植患者和正常对照者尿液样本中NAG的活性。结果底物MPT-NAG的结构经元素分析和1HNMR谱鉴定,高效液相色谱(HPLC)检测纯度达99.8%。NAG活性测定结果表明,糖尿病肾病、肾病综合征和肾移植患者的尿NAG活性增高,与正常对照者比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论经优化制备工艺合成获得NAG新型底物MPT-NAG,所用原料成本低、操作简便且产物得率较高,在肾小管疾病的诊断中具有临床应用价值。

MPT-NAG测定N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的应用价值

目的应用新型底物6-甲基-2-硫代吡啶-N-乙酰--βD-氨基葡萄糖苷(MPT-NAG)建立检测N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力的紫外动力学新方法,用于尿液中NAG活性测定。方法基于NAG催化水解对硝基苯-N-乙酶-β-D-氨基葡萄糖苷生成有色的对硝基酚这一反应,对缓冲液离子强度、pH值、底物浓度等最佳反应条件及各种实验参数进行研究。用该法测定了多种病尿样中NAG活活性。结果该法最低检出限为1.5 U/L,线性范围可达250 U/L(r=0.998 9),批内CV为<3%,批间CV<5%,回收率为101.3%。结论本法灵敏度高,线性、精密度好,结果准确,且操作简便快速,适用于全自动生物化学分析仪操作。

尿液N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶和视黄醇结合蛋白在早期肾损伤中的临床价值

目的：探究尿液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）和视黄醇结合蛋白（KBP）在早期肾损伤中的作用和意义。方法：选取福建省立医院2016年9月-2017年5月健康体检者61例作为对照组（A组），高血压病患者69例和2型糖尿病患者63例作为病例组（B、C组），检测各组尿液NAG、RBP和微量白蛋白（mAlb），比较各组间的尿NAG和RBP水平的差异；然后在B、C组中选取尿蛋白阴性、血清肌酐和尿素氮在正常参考值范围的49例患者，根据尿mAlb是否超出30mg／L，分为尿mAlb升高组7例和尿mAlb正常组42例，比较组间尿NAG和RBP阳性率的差异，并比较单项检测与尿NAG、RBP和mAlb三项联合检测的阳性率；同时收集5例肾肿瘤手术患者的尿液，比较其在术前、术后当天、术后一周不同时段的尿NAG和RBP水平的变化。结果：B、C组的尿NAG和RBP水平显著高于A组（P〈0．05）；在尿mAlb升高组中，尿NAG和RBP的阳性率分别为85．71％和71．43％，尿mAlb正常组的尿NAG和RBP的阳性率与尿mAlb升高组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；三项联合检测的阳性率为89．80％，高于单独检测尿RBP和mAlb，差异有统计学意义（P〈0．05），而与单独检测尿NAG的阳性率相比，差异无统计学意义（P〉0．05）；在5例肾肿瘤手术患者中，术后当天的尿NAG和1KBP的水平最高，与术前和术后一周比较差异具有统计学意义（P〈0．05），术后一周与术前比较尿NAG水平差异具有统计学意义（P〈0．05），尿RBP水平无统计学差异（P〉0．05）。结论：尿NAG和RBP是比尿mAlb更敏感的辅助诊断早期’肾损伤的指标，且可作为术后预测急性肾损伤的良好指标，具有较高的临床应用价值。

尿β2-MG、NAG及RBP联合检验在临床判定乙肝肝硬化患者发生早期肾损伤中应用价值分析

目的 探讨尿β2微球蛋白(β2-MG)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)及视黄醇结合蛋白(RBP)联合检验在临床判定乙肝肝硬化患者发生早期肾损伤中应用价值。方法 选择2021年3月至2023年5月就诊于本院的86例乙肝肝硬化患者,按肾小球滤过率(e GFR)将患者分为两组,40例e GFR值<90 m L/min/1.73m~2者设为合并早期肾损伤组,其余46例e GFR值≥90 m L/min/1.73m~2者设为肝硬化组。留取两组受检者患者晨间第1次尿液10m L,离心取上清液,使用免疫比浊法检测尿NAG、β2-MG和RBP。对比两组尿NAG、β2-MG、RBP水平差异,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析尿NAG、β2-MG、RBP单一与联合检测评定乙肝肝硬化患者发生早期肾损伤的价值。结果 合并早期肾损伤组尿NAG、β2-MG、RBP检测值分别为(12.46±3.16)U/L、(2.87±0.71)mg/L、(2.24±0.63)mg/L,均高于肝硬化组的(5.44±1.64)U/L、(0.32±0.09)mg/L、(0.43±0.11)mg/L,有统计学差异(P<0.05)。ROC曲线显示,尿NAG、β2-MG、RBP单一与联合检测评定乙肝肝硬化患者发生早期肾损伤的AUC分别为0.755、0.781、0.765、0.914,灵敏度分别为72.10%、77.90%、75.00%、92.60%,联合检测预测的AUC、灵敏度均高于单一指标(P<0.05)。结论 尿NAG、β2-MG、RBP均是检测乙肝肝硬化患者发生早期肾损伤的有效指标,三者联合检测可提高诊断准确性,值得临床推广。

糖耐量减低患者尿中白蛋白、转铁蛋白、N—乙酰—β—D葡萄糖苷酶和β2—微球蛋白的分析

目的：通过对尿中蛋白成分的分析，评价糖耐量减低与肾损伤的关系。方法：免疫比浊法测尿微量白蛋白，OLYM-PUS全自动生化分析仪终点法测N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酸，放射免疫分析法测β2-微球蛋白和转铁蛋白。结果：糖耐量减低患者、糖尿病患者的尿中蛋白成分与正常人比较，糖尿病患者多种蛋白成分均有升高。糖耐量减低患者白蛋白、N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶轻微升高，β2-微球蛋白和转铁蛋白升高明显。通过对各种蛋白成分的比较，转铁蛋白和β2-微球蛋白能更灵敏反映肾小球和肾小管损伤。糖耐量减低患者单纯的肾小球性和肾小管性蛋白尿的发生率都比 糖尿病组高，但混合性蛋白尿的发生率却低于糖尿病患者。说明糖耐量减低并出现混合性蛋白尿的病人很容易发展成糖尿病性肾病。结论：糖耐量减低患者尿中已经有蛋白成分增加，对糖耐量减低及肾损伤的关系应多加注意，尤其是多种蛋白成分的综合分析更为重要。

尿β_2-微球蛋白与视黄醇结合蛋白及N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶诊断成人心脏术后早期急性肾损伤的价值

目的 探讨尿β_2-微球蛋白（β_2-microglobulin,β_2-MG）、尿视黄醇结合蛋白（retinol-binding protein,RBP）、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG）在成人心脏手术后急性肾损伤（acute kidney injury,AKI）早期诊断中的价值。方法 行心脏手术患者60例,分别于术前及术后24、48、72h采用ELISA法检测尿β_2-MG、RBP水平,采用对硝基苯酚比色法检测尿NAG水平,采用酶法检测血清肌酐（serum creatinine,SCr）。以术后48h血清SCr较基础值增加≥50%为AKI判定标准,将60例患者分为AKI组41例,非AKI组19例,比较2组手术前、后尿β_2-MG、RBP、NAG水平变化;绘制ROC曲线,以AUC评价各标志物诊断AKI的效能。结果 2组术前尿β_2-MG、RBP、NAG水平比较差异均无统计学意义（P〉0.05）,AKI组术后24、48、72h尿β_2-MG[（1.010±0.137）、（1.803±0.278）、（0.783±0.619）mg/L]、RBP[（0.384±0.336）、（0.468±0.418）、（0.383±0.359）mg/L]、NAG[（29.276±23.406）、（33.275±26.175）、（36.404±22.903）u/L]及血清SCr[（71.529±18.666）、（91.930±32.017）、（89.135±44.988）μmol/L]较非AKI组[β_2-MG（0.168±0.150）、（0.227±0.155）、（0.160±0.124）mg/L,RBP（0.228±0.165）、（0.150±0.147）、（0.138±0.118）mg/L,NAG（10.441±5.535）、（13.900±8.243）、（11.940±6.307）u/L,SCr（64.517±17.392）、（68.761±20.176）、（64.268±19.119）μmol/L]明显增高,差异均有统计学意义（P〈0.01）;术后48h尿β_2-MG的AUC最大为0.822,95%CI：0.765~0.890,尿RBP的AUC为0.778,95%CI：0.701~0.878;术后72h尿NAG的AUC最大为0.850,95%CI：0.774~0.927。结论 成人心脏手术后发生AKI者尿β_2-MG、RBP及NAG水平明显增高;尿β_2-MG、RBP诊断心脏手术后AKI的最佳时间点为术后48h,尿NAG为术后72h。

尿Ⅳ型胶原、N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶和血清胱抑素C、β2-微球蛋白用于糖尿病肾病辅助诊断的效能比较

目的 通过对糖尿病患者的尿Ⅳ型胶原（ⅣC）、N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（NAG）、血清胱抑素C（CysC）、β2-微球蛋白（β2-MG）进行检测,比较四种指标用于糖尿病肾病（DN）早期诊断的诊断效能大小,并建立四种指标的多元回归方程.方法 收集108例糖尿病病例,参照目前糖尿病合并DN的公认诊断指标,以24 h尿微量白蛋白排泄率（UAE）=30 mg/24 h为界,把糖尿病分成2组,分别为非DN组（UAE＜30 mg/24 h）与DN组（UAE≥30 mg/24 h）,建立尿ⅣC、NAG、血清CysC、β2-MG对DN的诊断效能的受试者工作特征曲线（ROC曲线）,再根据ROC曲线下面积（AUCBOC）的大小评价四种指标在DN中的诊断效能,并以全变量回归法建立四种指标的回归方程.统计工具采用SPSS 13.0统计软件.结果 2组的尿ⅣC、NAG、血清CysC、β2-MG的检测结果非DN组分别为（3.91±1.93）μg/L、（12.20±3.46）U/L、（1.18±0.41）mg/L、（2.50±0.74）g/L;DN组分别为（14.14±11.17）μgL、（23.12±13.57）U/L、（2.69±1.69）mg/L、（5.21±2.78）g/L;非DN组与DN组的四种指标比较差异有统计学意义（P均＜0.01）.尿ⅣC、NAG、血清CysC、β2-MG的ROC曲线下面积分别为0.747、0.732、0.764、0.823,对DN的诊断效能β2-MG＞CysC＞ⅣC＞NAG,四种指标用于辅助诊断DN均有统计学意义（P均＜0.01）;尿微量白蛋白排泄率与四种指标的回归方程为UAE=-242.624＋6.362ⅣC＋8.662 NAG＋64.622 CysC＋29.488 β2-MG,方程经方差分析检验有统计学意义（P＜0.01）.结论 尿ⅣC、NAG、血清CysC、β2-MG用于辅助诊断DN均有显著性意义,可作为诊断糖尿病肾病的敏感指标.

尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶在2型糖尿病亚临床动脉粥样硬化中的变化及预测价值

目的探讨尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(UNAG)在T2DM亚临床动脉粥样硬化(SAS)患者中的变化及预测价值。方法选取2018年3月至2019年2月于玉林市第一人民医院内分泌科就诊的T2DM患者259例,根据颈动脉超声检测结果分为SAS组149例和单纯T2DM组(T2DM)110例。收集临床资料并检测生化指标、UNAG及UACR。结果SAS组UNAG、UACR高于T2DM组[20.00(15.50,28.00)vs 7.50(5.00,12.05)U/L;7.81(4.39,14.46)vs 4.72(2.79,8.81)mg/g,P<0.05]。Spearman相关性分析显示,UANG与TC、LDL-C、FPG、2 h PG、HbA1c、UACR呈正相关(r=0.123、0.166、0.208、0.155、0.206、0.243,P<0.05);UACR与年龄、BMI、WC、SBP、DBP、UNAG呈正相关(r=0.186、0.153、0.184、0.207、0.151、0.288,P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,年龄、吸烟史、UNAG、UACR是SAS的影响因素。UNAG、UACR受试者工作特征曲线下面积为0.902、0.685,约登指数为0.691、0.314,敏感度为84.6%、70.5%,特异度为84.5%、60.9%。结论UNAG可能与T2DM患者SAS发生发展相关。UNAG预测T2DM合并SAS的切点为13.75 U/L。UNAG不受BP影响,相比UACR能更好地预测T2DM患者SAS。

N-乙酰葡萄糖胺-6-转磺酶(CHST2)和岩藻糖基转移酶7(FucT-VII)在输卵管上皮的表达与输卵管妊娠的关系

目的:探讨输卵管上皮内N-乙酰葡萄糖胺-6-转磺酶(CHST2)和岩藻糖基转移酶7(Fuc T-VII)表达与输卵管妊娠发生的关系。方法:采用免疫组织化学和实时荧光定量PCR(RTPCR)的方法,检测输卵管妊娠患者的输卵管胚囊着床部位组织(EP-2组,n=23),输卵管胚囊着床旁部位组织(EP-1组,n=23),正常输卵管组织(CT组,n=16)的CHST2和Fuc T-VII的表达情况。结果:免疫组织化学法检测到输卵管妊娠胚囊着床部位CHST2和Fuc T-VII表达明显上调,与正常组相比差异有显著统计学意义(P<0.05)。RT-PCR方法检测CHST2 m RNA和Fuc T-VII m RNA在输卵管妊娠胚囊着床部表达水平高于正常组,差异有显著统计学意义(P<0.05)。结论:L-选择素与其配体相结合的机制可能参与了输卵管妊娠的发生。

NAG及β_2-微球蛋白联合检测对糖尿病肾病早期诊断的意义

通过对尿中N 乙酰 β D 氨基葡萄糖苷酶 (NAG)及血、尿 β2 微球蛋白 (β2 m )的联合检测探讨早期诊断糖尿病肾病的方法。NAG采用 72 1分光光度计比色法 ,β2 m采用放射免疫法测定。结果糖尿病肾病患者尿中的NAG、血及尿中的 β2 m均比对照组显著增高 (P <0 0 1,P <0 0 5)。表明NAG及血、尿 β2 m的测定对糖尿病肾病的早期诊断有意义。

补肾导浊汤对输尿管镜钬激光碎石术后留置内支架管的影响及Cys C、β2-MG、NAG变化的研究

目的观察和研究补肾导浊汤对输尿管镜钬激光碎石术后留置内支架管患者的影响及胱抑素C(Cys C),β2-微球蛋白(β2-MG),尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)水平变化。方法选取2018年1月—2018年12月医院输尿管镜钬激光碎石术后留置内支架管患者130例,采用单双号法将其分为观察组和对照组,每组65例。对照组加用热淋清颗粒、观察组加用补肾导浊汤,观察和比较两组患者用药前后肾功能[尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)]、Cys C、β2-MG、NAG水平及术后排石率、留置内支架管不适感及相关并发症等。结果观察组住院时间(3.10±0.57)d,对照组(5.44±1.02)d,二者比较差异有统计学意义(t=4.204,P=0.045<0.05);观察组结石完全排出率60.00%(39/65)、排出有效率92.31%(60/65)均高于对照组(P<0.05)。观察组术后并发症12例(18.46%)低于对照组(P<0.05)。用药后,两组患者BUN、Scr水平均较本组用药前下降,但仅有观察组差异有统计学意义(P<0.05);且用药后,观察组BUN、Scr水平低于对照组(P<0.05)。用药后,两组患者血清Cys C、β2-MG和尿NAG水平均较本组用药前下降(P<0.05);且用药后,观察组血清Cys C、β2-MG和尿NAG水平均低于对照组(P<0.05)。结论补肾导浊汤能促进输尿管镜钬激光碎石术留置内支架管患者结石排出、保护肾功能,对降低碎石与内支架管留置风险意义巨大;值得进一步增加样本数量、纳入更多指标加以观察和比较,为补肾导浊汤在输尿管镜钬激光碎石术后留置内支架管中的使用价值提供更加完善的理论依据。