高效液相色谱-电喷雾串联质谱法测定饲料中的N-氨基甲酰-L-谷氨酸

建立了高效液相色谱-电喷雾串联质谱（HPLC-ESI-MS/MS）测定饲料中N-氨基甲酰-L-谷氨酸（NCG）含量的方法.饲料样品经甲醇提取、混合型强阴离子交换反相固相萃取（PXA）柱净化、HPLC分离后,采用ESI-MS/MS在正离子多反应监测（MRM）模式下进行检测,以碎片离子m/z 148.0和m/z 84.0进行定性,以碎片离子m/z130.0进行定量.NCG的检出限（S/N＞3）为24 μg/kg,定量限（S/N＞ 10）为80μg/kg,在20～1 000 μg/L的质量浓度范围内峰面积与含量的线性关系良好,相关系数为0.999 9.对饲料中NCG在80、200、500 mg/kg等3个添加水平下的回收率进行了测定,分别为104.0％、103.5％、95.3％,相对标准偏差分别为7.5％、6.3％、5.8％.结果表明,该方法操作简单,净化效果好,快速,灵敏度和准确度高,符合对饲料样品中NCG检测分析的要求.

HPLC法测定N-对氨基苯甲酰-L-谷氨酸中杂质含量

采用高效液相色谱法,检测原料N-对氨基苯甲酰-L-谷氨酸中对氨基苯甲酸、对硝基苯甲酸、N-对硝基苯甲酰-L-谷氨酸的含量。色谱柱:5μm 150 mm×4.6 mm C18,检测波长:245 nm,进样量:20μL,流速:1.2 mL/min,柱温:40℃。结果表明,对氨基苯甲酸与N对氨基苯甲酰-L-谷氨酸的分离度为4.82,杂质对氨基苯甲酸在0.01009~0.6054μg/mL(r=0.9997)、对硝基苯甲酸在0.025~0.6000μg/mL(r=0.9990)、N-对硝基苯甲酰-L-谷氨酸在0.027027~0.6006μg/mL(r=0.9998)范围内线性关系良好。该方法简便、灵敏、可靠、重复性好,因而可作为N-对氨基苯甲酰-L-谷氨酸中杂质含量的控制方法。

N-氨甲酰谷氨酸对断奶仔猪生长性能、养分消化率及血清游离氨基酸含量的影响

本研究旨在探讨不同水平N-氨甲酰谷氨酸(NCG)对断奶仔猪生长性能、养分消化率及血清游离氨基酸的影响。试验选取60头平均体重为(6.4±0.7)kg的26日龄断奶仔猪,按完全随机区组设计分为4个处理,每个处理5个重复,每个重复3头仔猪,分别饲喂含NCG为0、0.04%、0.08%或0.12%的玉米-豆粕型饲粮。结果表明:1)随着NCG添加量的升高,除26～40日龄断奶仔猪平均日增重外,其他日龄阶段仔猪平均日增重和料重比均呈显著的二次曲线改善规律(P<0.05),其中,0.04%和0.08%的NCG对仔猪的促生长效果显著(P<0.05);2)饲粮中添加0.04%、0.08%和0.12%的NCG,仔猪对饲粮粗蛋白质和磷的消化率呈提高趋势(P>0.05);3)饲粮中补充低剂量(0.04%)的NCG可显著改善仔猪腹泻状况(P<0.05),与其相比,高剂量(0.12%)的NCG导致26～47日龄仔猪腹泻指数的显著升高(P<0.05);4)随着饲粮中NCG添加量的增加,仔猪血清游离精氨酸的含量呈线性升高趋势(P=0.077),其中NCG达0.08%以上时,血清游离精氨酸显著高于对照组(P<0.05)。由此可知,饲粮中添加0.04%和0.08%的NCG能显著改善断奶仔猪的生长性能和腹泻状况。综合促生长效果和经济成本,断奶仔猪饲粮中NCG的添加量以0.04%最为合适。

N-氨甲酰谷氨酸对环江香猪生长性能、营养物质消化率及血浆游离氨基酸含量的影响

为了探讨N-氨甲酰谷氨酸（N-carbamylglutam ate,NCG）对环江香猪生长性能、营养物质消化率及血浆游离氨基酸含量的影响,试验选用平均体重为（12.6±1.7）kg的环江香猪10头,随机分为2组,每组5个重复,每个重复1头猪,单笼饲养,分别饲喂基础饲粮和添加0.1%NCG的试验饲粮,试验期为10d。每日记录采食量,分别在试验开始和结束时称取试猪空腹体重;试验第8~10天收集粪样,用外源指示剂（T iO2）法测定常规营养物质的表观消化率;试验第10天采集血样,测定血浆中生化指标和氨基酸含量。结果表明,与基础饲粮组相比,0.1%的NCG添加组平均日增重显著升高（P〈0.05）,料重比显著降低（P〈0.05）;粗蛋白质、粗脂肪和干物质表观消化率均有所升高（P〉0.05）;血浆尿素氮、血氨和低密度脂蛋白含量均显著降低（P〈0.05）,碱性磷酸酶活性显著升高（P〈0.05）;血浆总氨基酸、必需氨基酸、芳香族氨基酸、苯丙氨酸和蛋氨酸含量均显著升高（P〈0.05）。上述结果提示,饲粮中添加0.1%的NCG可促进机体对营养物质的消化吸收,改善机体氨基酸平衡,从而提高环江香猪的生长性能。

N-氨甲酰谷氨酸对罗非鱼幼鱼生长、血液氨基酸组成及脂肪沉积的影响

为研究精氨酸对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)的生物学效应,采用精氨酸内源合成途径的必需辅助因子N-氨甲酰谷氨酸(NCG)代替精氨酸,研究不同剂量包被NCG制剂(实际NCG含量为80%)对尼罗罗非鱼生长及脂肪沉积的影响。实验共设6个制剂添加组,分别为0.025%、0.05%、0.1%、0.2%、0.4%、0.5%及对照组。结果显示,罗非鱼血液中所有NCG添加组(0.025%—0.5%)和对照组相比,赖氨酸、苏氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸等必需氨基酸含量无显著性差异(P>0.05),而当NCG添加量为0.4%时,精氨酸含量显著高于其他各组(P<0.05),且约为对照组的4倍,继续提高NCG添加量至0.5%时,精氨酸含量无显著提高(P>0.05);所有NCG添加组的末均重、特定生长率、饲料系数、内脏比和肥满度等指标与对照组相比均无显著性差异(P>0.05),当NCG添加量为0.2%时,增重率和蛋白质效率均显著高于其他组(P<0.05),除了0.1%NCG添加组,其他各组全鱼蛋白质含量均高于对照组;脂肪沉积方面,所有NCG添加组均显示肝体比显著低于对照组(P<0.05),全鱼干物质中脂肪含量显著高于对照组(P<0.05),脂肪有从肝转移至肌肉的倾向。饲料中添加0.4%NCG,对于血液中精氨酸含量的提高有较好的促进作用,而且不影响其他氨基酸的吸收;饲料中添加0.025%—0.5%NCG有利于减少肝脏脂肪沉积而增加了肌肉中的脂肪沉积,研究结果为进一步开展精氨酸影响鱼体脂肪沉积的机理研究提供了科学依据。

日粮中添加N-氨甲酰-L-谷氨酸及精氨酸对断奶小鼠生长性能的影响

目的:研究日粮中添加N-氨甲酰-L-谷氨酸(NCG)及精氨酸(Arg)对断奶小鼠生长性能的影响。方法:首先通过在日粮中添加0.025%、0.05%、0.1%的NCG,研究NCG对断奶小鼠生长性能的影响。在此基础上,选择同时添加0.05%的NCG和3个水平(0.025%、0.05%、0.1%)的Arg,研究NCG与Arg联合作用对断奶小鼠生长性能的影响。结果:日粮中添加0.1%的NCG,断奶小鼠平均日增质量较对照组提高了12.40%,饲料与体质量比与对照组相比下降了14.65%;同时添加0.05%的NCG和0.025%的Arg,断奶小鼠平均日增质量提高了10.53%。结论:日粮中添加0.1%的NCG能显著提高断奶小鼠生长性能;日粮中同时添加0.05%的NCG和0.025%的Arg,断奶小鼠生长性能也得到显著提高,其提高生长性能的效果与添加0.1%剂量的NCG达到相同水平。

N-氨基甲酰-L谷氨酸对北京鸭生产性能及免疫机能的影响

为研究N-氨基甲酰-L谷氨酸(N-carbamylglutamate,NCG)对北京鸭生产性能及免疫机能的影响,试验选取1日龄北京鸭996只,随机分为4组,每组设3个重复,每个重复83只。每天按标准耗料量的0.016%、0.018%、0.020%称取NCG溶于水中供试验鸭饮用。试验期40 d。试验结果表明:与对照组相比,日粮中添加NCG可提高1～10日龄北京鸭平均日增重8%以上(P <0.05),其中0.016%添加组,料重比降低19.76%(P <0.05)。添加0.016%和0.020%的NCG,脾脏指数及胸腺指数分别提高39.49%和41.25%(P <0.05);添加0.018%的NCG,血浆IgG含量增加33.08%,C4含量降低37.60%(P <0.05);添加0.020%的NCG,血浆IgG含量增加75.96%(P <0.05)。对11～40日龄育成鸭,添加0.016%或0.020%的NCG,胸腺指数分别提高24.75%和30.79%,血浆IgA含量增加80.45%和102.36%,C4含量降低41.52%和53.08%(P <0.05)。综上表明,1～10日龄北京鸭补充添加NCG可显著改善生产性能,促进其免疫器官的发育和免疫力的提高,0.016%的添加量较为适宜。

N-对氨基苯甲酰-L-谷氨酸的制备

以对硝基苯甲酰氯与谷氨酸钠缩合制得N-对硝基苯甲酰-L-谷氨酸,再经铁粉还原制得标题化合物,收率83.6％。

N-邻苯二甲酰-L-谷氨酸的合成工艺的研究

N-邻苯二甲酰-L-谷氨酸的合成工艺研究。以吡啶为溶剂,邻苯二甲酸酐和L-谷氨酸为原料酰化合成N-邻苯二甲酰-L-谷氨酸,讨论了影响酰化反应的各个因素。总收率可达91%。最优化工艺条件为溶剂用量吡啶(mL)∶谷氨酸(g)=4∶1;反应物配比n(邻苯二甲酸酐)∶n(谷氨酸)=1.0∶1.1;回流反应时间5.0 h;脱水剂无水硫酸钠。

围产期饲喂N-氨基甲酰谷氨酸对奶牛泌乳性能、血清生化及免疫指标的影响

本研究旨在探究奶牛围产期不同时间段饲喂N-氨基甲酰谷氨酸(NCG)对其泌乳性能、血清生化及免疫指标的影响。选用体重、胎次、产奶量和体况评分相近的80头围产期荷斯坦母牛,随机分为4组,每组20头。A组:产前21 d开始饲喂NCG,至产犊当天结束;B组:产犊当天开始饲喂NCG,至产后第21天结束;C组:产前21 d至产后21 d始终饲喂NCG;D组(对照组):产前21 d至产后21 d始终饲喂不添加NCG的基础饲粮。NCG的添加量为每头奶牛20 g/d。产前10 d、产犊当天、产后21 d的3个时间点进行血样的采集,用于血清生化和免疫指标的分析。产后19~21 d采集乳样,用于乳成分的测定。结果表明:与对照组相比,产前、产后或整个围产期饲喂NCG均能显著提高奶牛脂肪校正乳产量和乳蛋白含量(P<0.05),其中产后和整个围产期饲喂对脂肪校正乳产量的提高效果更好。产犊后饲喂NCG能显著降低奶牛血清谷草转氨酶活性(P<0.05)。NCG在产犊前有升高奶牛血清白细胞介素-6、产后降低白细胞介素-6的趋势(0.05<P<0.10)。综上所述,围产前期、围产后期和整个围产期3个时期饲喂NCG都能提高奶牛的产奶量和乳蛋白含量,围产后期和整个围产期添加对提高产奶量有更好的效果,但NCG添加对围产期奶牛的血清生化及免疫指标影响较小。

N-氨基甲酰谷氨酸在仔猪生产中的应用

N-氨基甲酰谷氨酸是一类新型饲料添加剂,具有相对成本低,效果明显,体内代谢稳定等特点。它能有效激活仔猪内源性精氨酸的合成,改善仔猪肠道功能,提高仔猪免疫性能,在畜牧业生产中被广泛使用。本文就N-氨基甲酰谷氨酸的生物学功能及在仔猪生产中的应用作一综述。

响应面法优化N-氨基甲酰谷氨酸的合成工艺

关于N-氨基甲酰谷氨酸的合成国内外已有许多报道,通过以L-谷氨酸和尿素为原料,研究了N-氨基甲酰谷氨酸的合成工艺。在单因素实验的基础上,采用响应面分析法的Box-Behnken设计方法,利用软件Design-Expert 10考察了反应温度、反应时间、物料比等因素以及因素之间的交互作用对合成N-氨基甲酰谷氨酸产率的影响。建立了N-氨基甲酰谷氨酸产率的二次线性回归方程,获得了最优工艺条件:反应时间2.05 h、反应温度119.83℃、n(L-谷氨酸)∶n(尿素)=1∶2.2,在此条件下N-氨基甲酰谷氨酸产率为82.47%,并进行了3次验证性实验,得到N-氨基甲酰谷氨酸的产率为81.76%,与理论预测值相对误差较小,与响应面模型预测值非常吻合,说明采用响应面优化方案有效、可靠。

日粮添加N-氨基甲酰谷氨酸对黄羽肉鸡生长性能、组织发育及血液指标的影响

目前研究关于N-氨基甲酰谷氨酸(NCG)对肉鸡生长性能、组织发育及血液指标的影响尚不清楚。本次研究进行2个系列试验,研究不同饲粮NCG浓度水平对不同生长阶段中国本土黄羽肉鸡的影响,设置NCG的日粮浓度分为0.05%,0.10%,0.15%和0.20%,持续生长前期(1-18d)、生长后期(19-36d)及整个试验期(1-36d)。饲粮NCG浓度从0.05%增加至0.20%,可提高1-18 d肉鸡的体重、肌间脂肪宽度、肝脏重量、血清尿素氮、低密度脂蛋白(P <0.05,二次)及白蛋白浓度(P <0.05,线性),而对日增重和死亡率无影响。NCG的日粮处理组显著提高了1-36日龄肉鸡体重和日增重(P <0.05),最适宜NCG浓度为0.1%P <0.05),主要表现:肌肉重量增加,而皮下脂肪、血清尿酸、甘油三酯及白蛋白血清的浓度下降。本试验条件下,进行拟合模型回归分析估测黄羽肉鸡生长期最适添加量为0.09%～0.12%。血液相关指标的变化表明NCG可能响应肉鸡的精氨酸代谢,脂质沉积、蛋白质合成和免疫应答等反应。

N-月桂酰基-L-谷氨酸钠的合成及性能

以月桂酰氯和谷氨酸钠为原料,合成了表面活性剂N-月桂酰基-L-谷氨酸钠。考察了投料比、溶剂配比、反应pH、反应时间以及反应温度等因素对N-月桂酰基-L-谷氨酸产率的影响,确定了最佳反应条件,并利用红外光谱对合成产品进行结构鉴定。性能测试结果表明,产品具有很好的泡沫性能。

N-氨甲酰谷氨酸和精氨酸对京海黄鸡肉仔鸡生长性能和血液指标的影响

本试验旨在探讨N-氨甲酰谷氨酸(N-carbamylglutamate,NCG)和精氨酸(Arg)对京海黄鸡肉仔鸡生长性能、血清生化参数及游离氨基酸含量的影响。选用1日龄体重相近的京海黄鸡肉仔鸡600只,随机分为5组,每组6个重复,每个重复20只。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组饲喂在基础日粮中分别添加0.05%、0.10%、0.15%NCG及0.10%Arg的试验日粮。试验期28d。结果表明,与对照组相比,添加0.05%、0.10%、0.15%NCG及0.10%Arg组平均日增重(ADG)升高,添加0.10%NCG组料重比(F/G)显著降低(P<0.05);添加0.10%NCG组血清中血氨(AMM)、尿酸(UA)和低密度脂蛋白(LDL)含量相对于其他各组显著降低(P<0.05),添加0.15%NCG组血清中一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶(NOS)和碱性磷酸酶(ALP)含量显著高于对照组(P<0.05);与对照组相比,添加0.10%、0.15%NCG组和添加0.10%Arg组血清中Arg含量显著升高(P<0.05)。综上所述,日粮中添加NCG有助于提高京海黄鸡肉仔鸡血清中Arg和脯氨酸(Pro)的含量,改善血液指标,提高肉仔鸡的生长性能,其中NCG添加水平为0.10%时效果较好。

对氨基苯甲酰谷氨酸的合成

对氨基苯甲酰-L-谷氨酸是合成叶酸的重要中间体,对该产品质量要求较高,本文以对硝基苯甲酰氯为原料,水为溶剂在15℃、p H值8～9与谷氨酸钠缩合,然后酸化制得对硝基苯甲酰-L-谷氨酸,mp112～113℃,收率96%,再经还原、酸化制得对氨基苯甲酰-L-谷氨酸,mp170～173℃,收率97%,能够达到工艺要求。

假单胞菌菌株ON-4a中的一个新型N—氨基甲酰—L—氨基酸酰胺水解酶：在大肠杆菌中表达的N—氨基甲酰—L—半胱氨酸酰胺水解酶的纯化和特性研究 Ohmachi T等[Appl microbiol biotechnol，2004，65（6）：686．693]

从表达编码假单胞菌菌株ON-4a的N-氨基甲酰-L-半胱氨酸(NCC)酰胺水解酶基因的大肠杆菌的粗提物中纯化了NCC酰胺水解酶并进行了特性研究。用三步柱色谱将该酶纯化58倍达到同质，收率为16．1％。在交联葡聚糖S-300上的凝胶过滤和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果表明该酶是同一45kD的亚单位的四聚物蛋白。酶活性的最适pH和温度分别为9．0和50℃。

N'-乙氧羰基取代甲基-N-β-吡啶甲酰硫脲的合成及晶体结构

从α-L-氨基酸乙酯出发,设计合成了9种新N'-乙氧羰基取代甲基-N-β-吡啶甲酰硫脲衍生物.其结构经IR,1H NMR,MS和元素分析测试确证.对化合物7d的单晶进行了X射线晶体结构测定,其属于单斜晶系,C2空间群,晶胞参数a=1.6912(6)nm,b=0.5197(19)nm,c=1.9399(7)nm,Z=4,V=1.6962(11)nm3,Dc=1.266Mg/m3,α=90.00°,β=95.89°,γ=90.00°,F(000)=688,R=0.0667,wR=0.1709.经MTT法三次平行实验,首次发现部分目标化合物对白血病K562细胞的增殖有明显的抑制作用.

N-氨甲酰谷氨酸对育肥猪血清及肌肉中氨基酸水平的影响

为了研究日粮中添加不同水平N-氨甲酰谷氨酸（NCG）对育肥猪血清及肌肉中氨基酸水平的影响,选用420头日龄体重接近的＂杜×长×大＂三元杂交猪,随机分为4个处理,对照组饲喂基础日粮,其他3个试验组分别在基础日粮中添加0.05%、0.1%和0.15%的NCG,每个处理3个重复,每个重复35头,预饲期为3 d,正试期为44 d。结果显示：日粮中添加不同含量的NCG,血清中的丝氨酸、组氨酸和谷氨酰胺浓度均显著上升（P〈0.05）,精氨酸和蛋氨酸浓度呈现上升趋势,但差异不显著（P〉0.05）,添加0.1%NCG组,半胱氨酸浓度显著高于对照组（P〈0.05）;日粮中添加不同含量的NCG,肌肉中的氨基酸浓度均无显著差异（P〉0.05）,但添加0.05%NCG组氨基酸浓度及总氨基酸浓度均比对照组高（P〉0.05）。结果表明：日粮中添加NCG能够提高育肥猪血清中丝氨酸、谷氨酰胺和组氨酸的浓度,但对肉中氨基酸无显著影响。

中试规模制备L-茶氨酸及其衍生物

报道了中试规模制备L-茶氨酸和L-谷氨酰胺的一种方法。以廉价的L-谷氨酸为原料,采用邻苯二甲酰基作为保护基,保护L-谷氨酸的α-氨基,醋酐回流10 m in使其分子内脱水生成N-邻苯二甲酰-L-谷氨酸酐,在常温、常压条件下,分别与2 mol/L氨水和2 mol/L乙胺水溶液反应生成中间产物N-邻苯二甲酰-L-谷氨酰胺、N-邻苯二甲酰-L-茶氨酸,中间产物在室温条件下与0.5 mol/L水合肼反应48 h脱除保护基,分别以57%、61%的收率得到L-谷氨酰胺和L-茶氨酸。