内源性神经毒素Salsolinol和N-甲基-(R)-salsolinol诱导共培养SH-SY5Y细胞中Alpha-synuclein的聚集

路易氏小体是帕金森病(PD)患者典型的病理特征,其主要由alpha-synuclein(α-syn)蛋白组成。α-syn蛋白在PD患者脑内的聚集通常伴随着T细胞的浸润和神经元细胞的退化。已有的研究表明1-甲基-4-苯基-1,2,3,4-四氢异喹啉(Salsolinol,Sal)N-甲基转移酶与内源性神经毒素1(R),2(N)-二甲基-6,7-二羟基-1,2,3,4-四氢异喹啉(N-甲基-(R)-salsolinol,NMSal)在PD患者淋巴细胞中的升高有关。本文采用稳定转染EGFP的人母细胞瘤SH-SY5Y(SH-EGFP)细胞和人多形性胶质母细胞瘤U87细胞和外周T淋巴细胞Jurkat三种细胞共培养模型来研究内源性神经毒素Sal和NMSal对共同培养体系中SH-EGFP细胞中α-syn蛋白的聚集作用。结果表明,Sal和NMSal可以诱导三细胞共培养体系中SH-EGFP细胞中α-syn的聚集,但不会引起与U87或是Jurkat共培养中SH-EGFP细胞中α-syn的聚集。同时我们还发现Sal和NMSal处理的三细胞共培养体系中SH-EGFP细胞中自噬蛋白LC3表达水平的升高,而自噬诱导剂雷帕霉素可以减少α-syn的聚集。以上结果表明,Jurkat细胞可以影响Sal和NMSal诱导的共培养体系SH-EGFP细胞中α-syn的聚集,并且自噬可能通过清除错误折叠的α-syn蛋白来保护神经元细胞。

(R)-(+)-N,N-二甲基-3-羟基-3-(2-噻吩基)丙胺的消旋

为提高抗抑郁药度洛西汀合成收率,降低生产成本,研究了中间体拆分副产物(R)-(+)-N,N-二甲基-3-羟基-3-(2-噻吩基)丙胺在不同有机羧酸溶剂、反应温度、反应时间、共溶剂剂量下的消旋化反应。实验表明,以乙酸作溶剂,温度90℃,x(水杨醛)=0.1作共溶剂,反应8 h,最后消旋率达到100%,收率为70%。在同样实验条件下将反应投料量扩大至200 g,平均消旋率达99.2%,平均收率达90.8%,所得消旋体可以重新用于光学拆分及合成产物度洛西汀。

（-）反式-4R（4-氟苯基）-3S-羟甲基-1-甲基哌啶的合成

亚磷酸三乙酯与氯乙酸乙酯进行缩合、重排、脱氯乙烷合成磷酸酯，再与对氟苯甲醛经Knoevenagel反应合成肉桂酸酯，肉桂酸酯与丙二酸二乙酯胺解合成的N-甲胺基羰基乙酸乙酯环合得到哌啶二酮，环化物用硼氢化钾复合还原剂还原得混旋帕罗醇，混旋体进行手性拆分得（4R，3S）-4-氟苯基-3-羟甲基-1-甲基哌啶目标物。选择car1#、cat2#、cat3#为各步催化剂，反应收率分别为89．1％，96．3％，86．5％，76．3％，87．2％，43．7％，总收率24．3％，比旋光度-36—38°，纯度大于99％。

1-脱氧野尻霉素的N-取代苯丙烷衍生物的合成

以(2R,3R,4R,5S)-3,4,5-三(苄氧基)-2-((苄氧基)甲基)哌啶盐酸盐为起始原料,与取代苯乙酮及多聚甲醛在无水乙醇中经曼尼希反应缩合得到中间体1-(4-取代苯基)-3-((2R,3R,4R,5S)-3,4,5-三(苄氧基)-2-((苄氧基)甲基)哌啶-1-基)丙烷-1-酮,该中间体经Pd(OH)_(2)/C加氢、脱苄、脱氧得到1-脱氧野尻霉素(DNJ)的N-取代苯丙烷衍生物,总收率36.8%~46.8%,并通过^(1)HNMR、^(13)CNMR、LC-MS对产物结构进行了确证。

（R）—和（S）—石蚕蛾性信息素的合成

以樟脑衍生物(-)-莰烷磺内酰胺为原料,经N-(E-2-烷烯酰基)莰烷-10,2-磺内酰胺与烷基格氏试剂的不对称Michael加成反应,LiAlH4还原断裂,3-甲基己醇的碘代反应及有机镉试剂与丙酰氯的偶联反应制得(R)-和(S)-石蚕蛾雄性性信息素6-甲基-3-壬酮,其光学纯度达96%ee以上.

6-(2,6-二氟苯基)-5-氟吡啶甲酸合成工艺

为了解决N-(4-((1R,3S,5S)-3-氨基-5-甲基环己基)吡啶-3-基)-6-(2,6-二氟苯基)-5-氟吡啶酰胺(PIM447)中间体6-(2,6-二氟苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(化合物1)的放大工艺问题,以5-氟吡啶-2-甲酸(化合物2)为原料,经氧化、氯代、卤素交换、酯化、Suzuki偶联、水解反应制备了化合物1。化合物2与H_(2)O2的氧化反应生成2-羧酸-5-氟吡啶-N-氧化物(化合物3)。化合物3与POCl3氯代反应得到6-氯-5-氟吡啶-2-甲酸(化合物4),在HBr-HOAc溶液中,化合物4发生卤素交换反应得到6-溴-5-氟吡啶-2-甲酸(化合物5)。化合物5与MeOH酯化反应生成6-溴-5-氟吡啶-2-甲酸甲酯(化合物6)。化合物6与2,6-二氟苯硼酸发生Suzuki偶联反应得到6-(2,6-二氟苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸甲酯(化合物7)。最后,化合物7在NaOH/MeOH溶液中水解生成目标化合物1,总收率达到58.7%。

包结法拆分1,1＇-联-2-萘酚：包结物的晶体结构及CD光谱

以D/L-缬氨醇为原料,通过二步反应得到价廉易得的拆分剂碘化(R)/(S)-N,N,N-三甲基-1-羟基-3-甲基-2-丁铵,采用包结拆分法,成功实现了对1,1′-联-2-萘酚(BINOL)的拆分.对具有(R)-构型的季铵盐与(R)-BINOL在甲醇中所形成包结物的晶体结构分析结果表明:I-离子桥联主体(拆分剂)的醇羟基和客体(BINOL)的酚羟基形成O-H…I-氢键,以及相邻层的主客体分子之间的C-H…O氢键相互作用是在包结物中实现手性识别的关键.同时对两个包结物的溶液和固体圆二色(CD)光谱进行了研究.

磷酸特地唑胺的合成新方法

以(5R)-3-(4-溴-3-氟苯基)-5-羟甲基噁唑烷-2-酮为起始原料,在[Pd Cl2(dppf)]·CH2Cl2催化下与联硼酸频那醇酯反应得到硼化物,继而与5-溴-2-(2-甲基-2H-四唑-5-基)吡啶进行Suzuki反应得到特地唑胺,收率82.9%。分别考察了催化体系对硼化反应和Suzuki反应的影响,确定了较佳的反应条件。特地唑胺与二苄基N,N-二异丙基亚磷酰胺反应得到二苄基保护的磷酸特地唑胺,随后经Pd/C脱苄得到磷酸特地唑胺,总收率66.2%。

依立曲坦中间体的合成

N-苄氧羰基-D-脯氨酸(2)经酰氯化反应制得N-苄氧羰基-D-脯氨酰氯(3),在三氯化铝催化下与5-溴吲哚经傅-克酰化反应制得(R)-3-(N-苄氧羰基吡咯烷-2-基甲酰基)-5-溴-1H-吲哚(5),再经二氢-双(2-甲氧基乙氧基)铝酸钠(SDMA)还原,得依立曲坦中间体(R)-5-溴-3-(N-甲基吡咯烷-2-基甲基)-1H-吲哚,总收率约41.5%(以2计)。

新型NK1受体拮抗剂的合成及生物活性研究

目的制备一类新型N-甲基-N-(4-(2-苯甲基)-6-(4-甲基-1-哌嗪基)-3-吡啶基)苯甲酰胺衍生物,并评价其对NK1受体的体外拮抗活性。方法以6-(4-甲基-1-哌嗪基)-4-(2-甲基苯基)烟酰胺为起始原料,经过霍夫曼降解、酰胺还原和N-酰化等化学反应得到目标化合物;采用钙流实验,在HEK293/NK1R细胞株上进行体外对NK1受体拮抗活性的测定。结果制备了13个新型化合物(Ⅰ1~Ⅰ13),并经1HNMR确证结构。化合物Ⅰ12对HEK293/NK1R细胞有较好的NK1受体拮抗活性。结论化合物Ⅰ12作为一类新型NK1受体拮抗剂,具有深入研究的价值。

HPLC测定吸入用乙酰半胱氨酸溶液中的异构体

目的采用HPLC法测定乙酰半胱氨酸溶液中异构体的含量。方法参照氨基酸类物质柱前衍生的方法,以(R)-(+)-α-甲基苄基异氰酸酯为衍生化试剂,采用CHIRALPAK IC手性色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为正己烷-无水乙醇-三氟乙酸(90∶10∶0.1),流速1.2 mL·min^-1,检测波长215 nm,进样量10μL。结果1.514~12.613μg·mL^-1乙酰半胱氨酸异构体衍生物与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998);最低检测限为5.047 ng,乙酰半胱氨酸与异构体衍生物的分离度良好。结论所用方法可用于测定乙酰半胱氨酸中的异构体。

加雷沙星的合成

目的合成加雷沙星。方法1(R)-甲基-5-溴-1H-异吲哚啉经N-烷基化、硼酸化、缩合、去保护反应制得加雷沙星。结果通过优化条件合成了加雷沙星,总收率51.0%,目标化合物结构经红外、质谱、核磁共振谱、元素分析确证。结论本工艺步骤少,原材料价廉易得,适合工业化生产。