N-磷酰化二肽甲酯和金属离子的相互作用

用紫外光谱研究了合成的系列磷酰化肽酯(DPP)与几种不同价态的常见金属离子——K+、Ag+、Mg2+、Cu2+、Fe3+和Al3+的相互作用,讨论了不同结构的磷酰化肽酯与金属离子相互作用的规律.结果表明,系列磷酰化肽酯与6种金属离子的相互作用没有差别,均表现为与K+、Fe3+和Al3+几乎没有相互作用,与Mg2+和Cu2+有弱的相互作用,与Ag+有较强的相互作用.相互作用的结果使磷酰化肽酯在190 nm左右的吸收峰强度下降、最大吸收波长红移.主要的作用位点应是系列磷酰化肽酯分子中不饱和基团的杂原子.它们的相互作用主要受金属离子的离子半径、电荷数、电子构型、水解性能和浓度的影响.

N-磷酰化二肽甲酯诱导K562细胞凋亡

背景与目的:磷被认为是生命代谢过程中的中心元素,许多N-磷酰化氨基酸和N-磷酰化肽具有重要的生物活性和药用价值,本实验研究N-磷酰化二肽甲酯诱导人慢性髓性白血病K562细胞凋亡作用。方法:采用四甲基偶氮唑盐还原法犤3-(4,5-dimethylthiazo-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazoliumbromide,MTT犦检测15种N-磷酰化二肽甲酯对K562细胞的增殖抑制作用;用Hoechst33258染色后观察细胞核的形态学变化;DNA琼脂糖凝胶电泳、双染法和流式细胞术检测细胞凋亡。结果:MTT法筛选出细胞增殖抑制活性较好的化合物是(DIPP-L-Leu)2-L-Lys-OCH3,IC50为22.66μmol/L;Hoechst33258染色后细胞核出现明显的凋亡形态学变化;DNA琼脂糖凝胶电泳出现典型的梯状条带;流式细胞仪检测到早期的凋亡细胞。结论:(DIPP-L-Leu)2-L-Lys-OCH3能够诱导K562细胞凋亡。

(DIPP-L-Leu)_2-L-Lys-OCH_3抑制K562细胞周期并诱导细胞凋亡

利用本实验室建立的方法,合成了20种N-磷酰二肽甲酯,通过MTT比色实验筛选,发现（DIPP-L-Leu）2-L-Lys-OCH3对K562细胞的增殖抑制作用明显好于其他的N-磷酰二肽甲酯（IC50为22.66μmol/L）.通过对其结构类似物的活性研究,发现DIPP-和-OCH3都是使其具有活性的必不可少的基团.细胞核的形态学改变、DNA琼脂糖凝胶电泳出现梯状条带及流式细胞仪检测到早期的凋亡细胞都证明（DIPP-L-Leu）2-L-Lys-OCH3对K562细胞的增殖抑制作用是通过诱导其发生细胞凋亡实现的.利用碘化丙锭对细胞核内染色质进行着色,流式细胞仪测定细胞内DNA分布情况,发现（DIPP-L-Leu）2-L-Lys-OCH3同时具有细胞周期抑制作用,推测（DIPP-L-Leu）2-L-Lys-OCH3可能通过将细胞阻滞在G2/M期,再启动这一时相的凋亡调控机制而引发细胞凋亡.