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人甲状旁腺素N-端34肽基因的合成、克隆和融合表达
1
作者
文力
王革非
+2 位作者
冷武军
王贞慧
杨光
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2005年第4期284-287,共4页
目的构建重组人甲状旁腺素N-端34(PTH34)肽的大肠杆菌融合表达菌株,并对其表达产物进行检测。方法选用大肠杆菌偏爱密码子,设计优化的人甲状旁腺素N-端34肽基因序列,通过6个DNA片段分段合成、片段连接、PCR扩增,经TA克隆到pMD18载体中,...
目的构建重组人甲状旁腺素N-端34(PTH34)肽的大肠杆菌融合表达菌株,并对其表达产物进行检测。方法选用大肠杆菌偏爱密码子,设计优化的人甲状旁腺素N-端34肽基因序列,通过6个DNA片段分段合成、片段连接、PCR扩增,经TA克隆到pMD18载体中,经测序验证,构建GST融合表达载体。结果经SDS-PAGE检测PTH(1-34)肽与GST蛋白的融合表达,经Westernblot分析具有免疫活性,通过GST亲和层析和Xa因子酶切,利用小分子蛋白电泳可检测到PTH(1-34)肽。结论已获得了能表达GST-PTH(1-34)融合蛋白的菌株。表达产物具有免疫活性,且能被Xa因子消化得到PTH(1-34)肽。
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关键词
甲状旁腺素
n-端34肽
基因合成
基因克隆
融合表达
免疫活性
下载PDF
职称材料
题名
人甲状旁腺素N-端34肽基因的合成、克隆和融合表达
1
作者
文力
王革非
冷武军
王贞慧
杨光
机构
丝宝集团科研中心生命科学研究所
出处
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2005年第4期284-287,共4页
文摘
目的构建重组人甲状旁腺素N-端34(PTH34)肽的大肠杆菌融合表达菌株,并对其表达产物进行检测。方法选用大肠杆菌偏爱密码子,设计优化的人甲状旁腺素N-端34肽基因序列,通过6个DNA片段分段合成、片段连接、PCR扩增,经TA克隆到pMD18载体中,经测序验证,构建GST融合表达载体。结果经SDS-PAGE检测PTH(1-34)肽与GST蛋白的融合表达,经Westernblot分析具有免疫活性,通过GST亲和层析和Xa因子酶切,利用小分子蛋白电泳可检测到PTH(1-34)肽。结论已获得了能表达GST-PTH(1-34)融合蛋白的菌株。表达产物具有免疫活性,且能被Xa因子消化得到PTH(1-34)肽。
关键词
甲状旁腺素
n-端34肽
基因合成
基因克隆
融合表达
免疫活性
Keywords
Parathyroid hormone
Gene synthesis
Fusion expression
分类号
Q573 [生物学—生物化学]
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人甲状旁腺素N-端34肽基因的合成、克隆和融合表达
文力
王革非
冷武军
王贞慧
杨光
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2005
0
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职称材料
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参考文献
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